白新學(xué)

(南陽(yáng)市中心醫(yī)院神經(jīng)外科，河南 南陽(yáng) 473000)

膠質(zhì)瘤占顱腦腫瘤的45%～50%。多種基因或蛋白參與膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展。表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)屬酪氨酸激酶Ⅰ型受體家族，是多種腫瘤DNA合成和細(xì)胞生長(zhǎng)的催化劑，其過度表達(dá)常引起細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化及浸潤(rùn)〔1〕。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)是血管內(nèi)皮細(xì)胞的特異有絲分裂原，可促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，促進(jìn)新生血管生成，加速腫瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移〔2〕。本研究觀察腦膠質(zhì)瘤中EGFR和VEGF蛋白表達(dá)及二者關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 一般資料 2008年1月至2010年12月我院診治的腦膠質(zhì)瘤并手術(shù)患者，留取術(shù)后存檔的蠟塊組織93例為觀察組，年齡21～67(平均48.6)歲，其中男50例，女43例，術(shù)前均未進(jìn)行任何放、化療。納入均經(jīng)病理科主治醫(yī)師再次診斷，并符合WHO關(guān)于腦膠質(zhì)瘤診斷標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)選取正常腦組織標(biāo)本70例為對(duì)照，均為急性顱腦損傷行內(nèi)減壓術(shù)切除的腦組織，并經(jīng)病理科主治醫(yī)師確認(rèn)。其中男40例，女30例，年齡23～64(平均48.3)歲，兩組一般臨床特征無(wú)明顯差別。

1.2 試劑及方法 兔抗人EGFR和VEGF蛋白濃縮液均購(gòu)自武漢博士德生物技術(shù)有限公司，正式實(shí)驗(yàn)前均進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，并選擇最佳稀釋比例。EGFR和VEGF表達(dá)應(yīng)用免疫組化SP法，操作均由同一病理技師完成，以避免人為誤差，同時(shí)嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作，做好免疫組化的質(zhì)量控制。

1.3 免疫組化結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn) 免疫組化結(jié)果判讀均由病理科主治醫(yī)師應(yīng)用盲法進(jìn)行判斷。EGFR和VEGF蛋白陽(yáng)性部位為細(xì)胞質(zhì)，呈均勻棕黃色顆粒，每個(gè)切片選取有代表性的高倍鏡視野(×400)共5個(gè)，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞百分比，取其平均值，以＜25%的陽(yáng)性細(xì)胞為陰性，以≥25%的陽(yáng)性細(xì)胞為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SAS6.12統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)及相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 兩組EGFR和VEGF陽(yáng)性表達(dá)比較 觀察組EGFR〔65(69.89%)vs 24(34.29%)〕和 VEGF表達(dá)陽(yáng)性率〔60(64.52%)vs 18(25.71%)〕明顯高于對(duì)照組(χ2=20.427 3，P ＜0.000 1;χ2=24.096 8，P ＜0.000 1)。

2.2 觀察組不同臨床特征患者EGFR和VEGF表達(dá)差別 觀察組不同分級(jí)、不同最大腫瘤直徑、不同Ki67表達(dá)的EGFR和VEGF陽(yáng)性表達(dá)差別顯著(P＜0.05，P＜0.01)。見表1。

表1 EGFR和VEGF在觀察組不同臨床特征患者中的表達(dá)差別〔n(%)〕

2.3 膠質(zhì)瘤EGFR和VEGF表達(dá)關(guān)系 經(jīng)線性相關(guān)分析，膠質(zhì)瘤EGFR和VEGF表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.44，P=0.024 1)。

3 討論

實(shí)體腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)分為血管生長(zhǎng)前期和血管化浸潤(rùn)性生長(zhǎng)期，在血管前期，其原發(fā)腫瘤直徑常小于3 mm，中心部位主要靠彌散作用獲得營(yíng)養(yǎng)，因此病變相對(duì)靜止，腫瘤生長(zhǎng)緩慢，當(dāng)腫瘤生長(zhǎng)進(jìn)入浸潤(rùn)性生長(zhǎng)期，此時(shí)將新生大量血管。膠質(zhì)瘤是一種富含血管的惡性實(shí)體腫瘤，其生長(zhǎng)和侵襲與血管生成密切相關(guān)，其血管生成是一復(fù)雜過程，VEGF是公認(rèn)的最重要的血管生成因子〔3，4〕，對(duì)惡性腫瘤基質(zhì)的血管新生及促進(jìn)腫瘤進(jìn)展均具有重要作用。VEGF基因定位于染色體的6p21.3，全長(zhǎng)14 kb，由8個(gè)外顯子及7個(gè)內(nèi)含子構(gòu)成，常在正常胚胎發(fā)育時(shí)發(fā)揮功能，也在損傷修復(fù)時(shí)發(fā)揮作用，VEGF表達(dá)與多種腫瘤預(yù)后有重要關(guān)系。EGFR及其信號(hào)傳導(dǎo)通路是機(jī)體對(duì)細(xì)胞增殖及調(diào)控的重要途徑。EGFR酪氨酸激酶域被激活后，引起Ras-MAPK、PI3K-Akt及STAT等通路的活化，使細(xì)胞核外信號(hào)傳導(dǎo)到細(xì)胞核內(nèi)，調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)及分裂。如果EGFR表達(dá)持續(xù)增加，使細(xì)胞增殖能力增加，抑制細(xì)胞凋亡能力下降，引起機(jī)體調(diào)控異常，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖;有觀點(diǎn)也顯示EGFR可對(duì)腫瘤血管生成有重要促進(jìn)作用，主要以VEGF為中介蛋白，促使腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞增生，誘發(fā)血管新生〔5〕。

腦膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展涉及多種基因和蛋白交叉作用。本研究結(jié)果提示EGFR和VEGF參與腫瘤發(fā)生發(fā)展，二者有協(xié)同正向作用。EGFR可作為調(diào)節(jié)基因或作用的中介位點(diǎn)，調(diào)節(jié)VEGF過表達(dá)，進(jìn)而過度抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡并促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖，導(dǎo)致腫瘤血管新生〔6，7〕。EGFR高表達(dá)提示了惡性腫瘤細(xì)胞的強(qiáng)大增殖能力，在此過程中增生的腫瘤細(xì)胞對(duì)周圍間質(zhì)的壓迫作用，引起局部缺氧，而缺氧環(huán)境可使VEGF分泌明顯增多，引起微血管出芽生長(zhǎng)或新血管內(nèi)皮增生，血管密度增加，血供增加，以滿足腫瘤生長(zhǎng)的需要。此協(xié)同機(jī)制提供一條腫瘤治療的信息，即對(duì)EGFR促進(jìn)血管生成通路的干預(yù)，可有效減弱或阻斷腫瘤細(xì)胞增生及新生血管形成，抑制腫瘤旺盛的繁殖能力和快速生長(zhǎng)能力，為開展以EGFR和VEGF為通路的靶向治療提供了重要理論基礎(chǔ)。

1 Gan HK，Lappas M，Cao DX，et al.Targeting a unique EGFR epitope with monoclonal antibody 806 activates NF-kappaB and initiates tumour vascular normalization〔J〕.JCell Mol Med，2009;13(9B):3993-4001.

2 王國(guó)棟，李 俠，王連聰，等.胃癌組織EGFR和VEGF的表達(dá)及其意義〔J〕.實(shí)用腫瘤雜志，2009;24(1):34-7.

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