滕亞君

云南出入境檢驗檢疫局技術(shù)中心，云南昆明 650028

1 研究目的

圭山山羊是云南省四個保種山羊品種之一，具有抗逆性強，疾病少，耐粗飼，既產(chǎn)乳，又產(chǎn)肉等優(yōu)良特性。圭山山羊?qū)偃槿饧嬗眯偷胤缴窖蚱贩N，又稱路南乳山羊。產(chǎn)區(qū)以石林縣為中心[1]，分布于宜良、彌勒、滬西、陸良、師宗等縣。總計約45萬只，占全省山羊總數(shù)的 7.63%。圭山山羊肉中蛋白質(zhì)含量高，其賴氨酸，組氨酸含量豐富，氨基酸含量達理想蛋白的78.99%，據(jù)報道山羊肉中含膽固醇60MG/100G[2]比豬肉牛肉都低，是一種理想的保健品，圭山山羊背長肌，股二頭肌肌纖維直徑為82.20UM，95.35UM，比云南的瘤牛100.38UM，100.32UM小[3]，但其嫩度(剪切力)大于云南瘤牛（1.85Kg）。目前研究人員對圭山山羊的肉質(zhì)、乳質(zhì)、遺傳育種及繁殖等方面進行了大量研究。對普通圭山山羊和云南紅骨圭山山羊的骨骼、肉、血液及毛皮內(nèi)的礦物質(zhì)元素含量進行測定，對比分析云南紅骨山羊骨骼主要礦物元素沉積規(guī)律及代謝機理，研究云南紅骨圭山山羊紅骨特性的本質(zhì)及形成機理，對豐富骨骼礦物質(zhì)元素代謝理論具有重要科學意義，可為人和其它動物骨骼礦物質(zhì)元素代謝紊亂性疾病的研究和治療提供科學依據(jù)。而此方面的研究目前尚未見報道。

2 研究現(xiàn)狀

2.1 礦物質(zhì)元素測定方法研究

評定動物微量元素營養(yǎng)狀況最理想的方法之一就是測定動物體微量元素含量及相關(guān)活性物質(zhì)的變化。礦物元素的測定方法很多，常用的有化學分析法，比色法，原子吸收分光光度法。此外極譜法，離子選擇性電極法，熒光法等也有一定應用。日常的儀器分析中常使用紫外可見分光光度計、極譜儀及原子吸收分光光度計等儀器來測定鉀、鈣、鈉、鎂、鐵、鋅、銅等金屬元素的含量 ，原子吸收法又是其中使用較為普遍的一種方法。國內(nèi)外資料中提到[4]：分光廣度法：測K四苯硼鈉比色法，測Ca甲基麝香草酚藍比色法，測Na醋酸鈾鋅比色法，測Mg鈦黃比色法，測Cl硫氰酸汞比色法，測 P硫酸亞鐵鉬藍比色法；采用火焰原子吸收法分別測定羊奶中K、Ca、Na等礦物質(zhì)的元素含量。試驗證明，羊牛等動物奶中鉀、鈉、鎂、鈣、鐵、鋅、銅的含量依次降低，且RSD均小于1.47%。說明該方法測定羊奶中多種礦物元素的含量簡便、靈敏、準確度高，豬肉礦物質(zhì)元素的測量。使用原子吸收分光光度計是測定礦物質(zhì)元素的常用方法之一，有著相對偏差低、靈敏度高、準確度高的特點。但是普及的原子吸收法檢測手續(xù)繁瑣，檢驗周期長，試劑用量大，需單元素測定，而且基體干擾嚴重.近年來發(fā)展起來的ICP-AES技術(shù)具有多元素同時測定的特點，測定靈敏度高，檢測限低，精密度好，線性范圍寬，動態(tài)范圍寬，基體干擾小等明顯優(yōu)點，因而結(jié)合化學分離和富集技術(shù)得到廣泛應用。由于取樣量少，有利于縮短操作時間，減小試劑用量和降低空白，提高痕量分析靈敏度和精度，近年來在環(huán)境、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域都有應用。例如用電感耦合等離子體-發(fā)射光譜法（ICP-AES）同時快速測定水中微量元素的含量，試驗結(jié)果表明靈敏度、精密度及回收率都能都達到很高的要求。用電感耦合等離子體(ICP)發(fā)射光譜法直接測定世界珍稀瀕危鳥類－朱鹮羽毛中Cu，Zn，Mn，Ni，Cr，F(xiàn)e，Mo七種元素的含量。結(jié)果表明，此方法簡便，具有良好的精密度和準確性。試樣在高溫等離子火焰中（焰心溫度可高達6 000 K 10 000K）待測元素易于被原子化、激發(fā)和電離，發(fā)射譜線強度大，比經(jīng)典發(fā)射光譜法的靈敏度和準確度都要高，尤其對于那些難原子化的高溫元素的測定，更顯現(xiàn)出它的優(yōu)越性，其靈敏度可與石墨爐原子吸收相比。

2.2 分析儀器的使用研究

開機預熱四個小時最佳，然后點燃等離子體光源，待穩(wěn)定半小時后，分別進行儀器各參數(shù)的調(diào)試，當調(diào)試到最佳測試狀態(tài)以后，選擇最適當?shù)脑胤治鲎V線波長，再進行Hg燈定位，同時進行元素標準化，調(diào)節(jié)蠕動泵，達到最佳進樣量和進樣速度。試樣在激發(fā)過程中產(chǎn)生各元素的特征輻射譜線，分光系統(tǒng)進行分光過濾處理，記錄下經(jīng)光電元件接收后轉(zhuǎn)變成的電信號。依據(jù)樣品中譜線強度與被測元素濃度成正比的關(guān)系，計算機自動記錄下后，求得未知樣品中各種元素的濃度含量。上機前配置的標準液，首先必須考慮的因素是溶液中各離子間的會相互作用和反應。然后按照儀器中各元素的排列狀況，對待測的元素進行分組，此時嚴格控制酸度和介質(zhì)是另一個必須注意的環(huán)節(jié)。

采用低溫干灰化法制備樣品，干灰化法準確度與精密度均高于濕消化法。例如：ICP-AES同時分析毛皮動物貉被毛組織中多種微量元素。經(jīng)國家人發(fā)標準物質(zhì)GBW07601驗證，對于此方法相對誤差的范圍是0.83%～9.59%，相對標準偏差的范圍是0.81%～5.20%，各項檢測指標均能滿足生物樣品檢測要求。分別測得健康種貉、自咬癥輕、重病貉被毛中的22種微量元素，此種方法可以滿足生物樣品元素分析的要求[5]。而針對動物毛被樣品的復雜基質(zhì)，對樣品的預處理方法需進行專門研究，利用民用微波爐代替專業(yè)微波反應器，采用微波加熱技術(shù)也是目前被廣泛應用的一種前處理技術(shù)，需利用試劑的不同特點，分別對試劑硝酸、過氧化氫、鹽酸和水的配比及試液體積進行試驗，對不同的反應功率和反應進行所需的時間都進行條件試驗的研究，優(yōu)化實驗條件。例如：確定選擇HNO3-H2O2-HCl-H2O酸溶體系，四種試劑配比為8：1：1：5，輸出功率360W條件下加熱5min，進行試樣密閉消解處理動物毛被樣品，采用標準溶液基體匹配法消除動物毛被樣品復雜的基體干擾，利用電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜分析技術(shù)，同時檢測18個動物毛被樣品的常量和微量元素。該方法經(jīng)國家人發(fā)標準物質(zhì)GBW07601驗證，這一測試方法的相對誤差范圍是0.83～9.59，相對標準偏差的范圍是0.81～5.20，得到的檢測下限、精密度、準確度等指示檢測結(jié)果的指標對于實際樣品尤其是對動物毛被進行的分析中得到驗證，生物樣品的檢測要求雖高，但應用此方法能達到檢測目的。從分析設(shè)備的分析線數(shù)據(jù)庫中選擇，當選用恰當?shù)姆治鼍€時，干擾元素少，測定結(jié)果滿意。從以上離子中可看出在現(xiàn)階段的研究中利用電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜分析毛發(fā)中的礦物質(zhì)元素是一種科學、快速、準確而成熟的儀器分析方法。

[1]陳韜，等.放牧條件下圭山山羊產(chǎn)肉性能及肉質(zhì)特性[J].云南畜牧獸醫(yī)，1996,(4)：12-13.

[2]葛長榮，等.放牧條件下瘤牛的肉質(zhì)研究[J].云南畜牧獸醫(yī)，1995(4)：4-7.

[3]魏懷方，等.羊及其產(chǎn)品加工[M].北京科學技術(shù)出版社，1990：88-92，292-293.

[4]溫玉田，等.付其如,彭厚志，等.大熊貓毛發(fā)微量元素初析[J].南充師范學院學報：自然科學版，1987，8(1)：55-60.

[5]侯天平，等.貉被毛中多種元素ICP-AES同時測定方法研究[J].江西農(nóng)業(yè)大學學報，2008，30.