李 鋒,王賢波
(浙江省杭州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院 實驗中心,浙江 杭州 310024)
茶葉中兒茶素是茶葉中重要的一類天然活性物質(zhì),是天然的抗氧化劑和自由基清除劑,被廣泛應(yīng)用于食品加工、醫(yī)藥保健等領(lǐng)域[1-3]。兒茶素占茶葉中茶多酚總量的60%~80%,主要有表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)、表兒茶素沒食子酸酯(ECG)、表沒食子兒茶素(EGC)及表兒茶素(EC)等[3-4]。大量研究已證明兒茶素具有抗腫瘤、降血壓、降血脂、清除自由基、壓制黑色素合成等作用[2-5]。在降血脂方面,主要是以茶多酚為材料進行的研究[6-7],單純的以 EGC為材料進行的研究鮮有報道。作者以高脂飼料喂養(yǎng)大鼠,建立高脂大鼠模型,給予相應(yīng)劑量的 EGC,探討EGC對高脂大鼠血清中脂質(zhì)代謝相關(guān)指標(biāo)的影響,為相關(guān)應(yīng)用研究提供實驗依據(jù)。
實驗用EGC,為茶葉中提取物,含量>80%,本實驗室提取。
實驗用動物為清潔級SD雄性大鼠32只,體重200~250 g,由浙江省實驗動物中心提供(生產(chǎn)許可證號:SCXK(浙)2008-0033;使用許可證號:SYXK(浙)2008-0113)。
飼喂大鼠高脂飼料:80.5%普通飼料,2%膽固醇,10%蛋黃粉,7%豬油,0.5%膽鹽。
主要儀器:TGL-16G低溫高速臺式離心機(上海安亭科學(xué)儀器廠),電子天平(METTLER公司),HITACHI7180全自動生化分析儀(日立公司)。
大鼠在溫度(23±2)℃、相對濕度50% ~70%的SPF屏障系統(tǒng)內(nèi)飼養(yǎng)。在實驗環(huán)境下大鼠用基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后稱重,空腹16 h后眼眶采血,測定血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平,根據(jù)血清總膽固醇水平,隨機分為4組:正常對照組(Ⅰ組),喂基礎(chǔ)飼料;模型對照組(Ⅱ組),喂高脂飼料;實驗組(Ⅲ組),喂高脂飼料,并每日灌喂0.5 g·kg-1的EGC;和實驗組(Ⅳ組),喂高脂飼料,并每日灌喂1.0 g·kg-1的 EGC)。每組8只大鼠。
大鼠連續(xù)飼喂30 d,每周稱量體重,實驗結(jié)束時,禁食16 h后麻醉,腹主動脈采血,室溫靜置3 h后,1 500 r·min-1離心 10 min,取上清液,測定血清 TC、TG、HDL-C、LDL-C,并計算動脈硬化指數(shù)(AI)值。
數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件分析,采用One Way ANVOA分析,所有數(shù)據(jù)以x±SD表示。
大鼠以基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后稱重,空腹16 h后眼眶采血,測定血清 TC、TG、HDL-C、LDL-C水平,隨機分為4組。實驗結(jié)果(表1)顯示,各組血清中 TC、TG、HDL-C、LDL-C含量沒有顯著性差異。
表1 各組別EGC喂飼前大鼠的血脂水平
表2 各組別EGC實驗前后大鼠的體重
連續(xù)喂高脂飼料30 d后,體重測定結(jié)果(表2)顯示,大鼠體重增加,喂高脂飼料組比基礎(chǔ)飼料組大鼠生長稍快,各組之間無顯著性差異。
對大鼠的血清測定結(jié)果(表3)顯示:Ⅲ、Ⅳ實驗組 TC、HDL-C、LDL-C含量與模型對照組(Ⅱ組)比較均無顯著性差異。Ⅲ、Ⅳ實驗組 TG含量與模型對照組比較,有極顯著性差異,說明EGC能調(diào)節(jié)甘油三酯的代謝。Ⅲ、Ⅳ實驗組在降低LDL-C含量上雖然在統(tǒng)計學(xué)上與模型對照組比較沒有顯著性差異,但從均值上觀察有降低趨勢。
表3 各組別EGC喂飼后大鼠的血脂水平
(TC-HDL-C)/HDL-C,稱為動脈硬化指數(shù)(atherosclerosis index,AI),AI值能反映動脈粥樣硬化程度。數(shù)值越小動脈硬化的程度就越輕,引發(fā)心腦血管病的危險性就越低;數(shù)值越大動脈硬化的程度就越重,發(fā)生心腦血管病的危險性就越高。結(jié)果(表4)顯示:Ⅲ、Ⅳ實驗組AI值與模型對照組比較,Ⅲ實驗組略有升高,Ⅳ實驗組略有降低,但均無顯著性差異。
表4 實驗后各組別大鼠的AI值
高脂血癥是誘發(fā)動脈粥樣硬化和心血管病的重要因素之一。當(dāng)血清LDL-C濃度升高時,動脈壁內(nèi)脂質(zhì),特別是膽固醇酯沉積增多,可引起中膜平滑肌組織大量增殖,促進動脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展[6]。而HDL-C被稱為血管清道夫,能將外圍組織和血液中的膽固醇運送至肝臟進行代謝,具有抗動脈粥樣硬化作用[8]。EGC降血脂的機制可能是調(diào)節(jié)甘油三酯代謝,通過抑制胰脂肪酶的活性而降低了對外源性TG的吸收、降低脂肪酸合成酶的活性而減少了脂肪酸的合成、增強肝脂酶活性加速了TG的代謝及促進脂肪酸的排泄來調(diào)節(jié)TG代謝[7]。
研究結(jié)果表明,茶葉中EGC能極顯著降低高脂模型大鼠血清中TG含量,在一定程度上降低LDL-C含量,因此可知,EGC具有一定的降血脂作用,其詳細作用機制需進一步研究。
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