鄒桂欣，尤獻民，王光函

(遼寧省中醫(yī)藥研究院，遼寧 沈陽 110034)

農藥和重金屬殘留是中藥現(xiàn)代化、國際化的重要限制因素之一，農藥對人體的危害主要表現(xiàn)為神經毒性，而有機氯農藥易產生慢性毒性，因此中藥材中農藥和重金屬殘留問題已越來越受到關注。伸筋草是石松科植物石松的干燥全草，具有祛風除濕、舒筋活絡之功效。我國伸筋草資源十分豐富，多在海拔2000 m以下。筆者曾對不同產地及不同海拔高度的伸筋草藥材中玉柏堿進行含量研究[1]，但關于伸筋草藥材安全性方面的研究尚未見報道。本試驗采用原子熒光光譜法、等離子發(fā)射光譜法及氣相色譜法對不同產地及不同海拔高度的伸筋草藥材進行了重金屬砷、汞、鉛殘留及有機氯農藥殘留分析，并且由于伸筋草作為鋁礦標示植物，因此采用等離子發(fā)射光譜法對鋁離子也進行了含量分析，為該藥材的質量控制及進一步安全地開發(fā)應用提供科學依據(jù)。

1 儀器與試藥

AFS－2202型原子熒光(北京海光);SP8000型等離子發(fā)射光譜儀(日本精工);PRO－GC型氣相色譜儀(色譜柱為HP50+30 mm ×0.25 mm，0.25 μm);ECD 電子捕獲檢測器。砷、鉛、鋁和汞單元素標準溶液和六六六、滴滴涕(DDT)標準品購自國家標準物質研究中心;硝酸、硫酸(優(yōu)級純，沈陽化學試劑廠);所用其他試劑皆為分析純(沈陽化學試劑廠);水(二次蒸餾水)。

伸筋草分別采集于廣西桂林龍勝各族自治縣花坪國家自然保護區(qū)(廣西海拔600 m)、廣西大明山自然保護區(qū)(廣西海拔1200 m)、廣西桂林貓耳山(廣西海拔1400 m)，浙江省磐安縣城南山(磐安海拔400 m)、浙江天臺縣赤崗風景區(qū)(天臺海拔300 m)。

2 方法與結果

2.1 重金屬殘留量測定

2.1.1 供試液制備

砷(As)及汞(Hg):稱取樣品0.5 g，精密稱定，置玻璃燒杯中，加入10 mL硝酸放置過夜，置電熱板上，加熱消解至消化液呈淡黃色或無色(如消解過程中色澤較深，稍冷補加少量硝酸)，至消解液1.0～2.0 mL時停止，冷卻后加2 mL鹽酸加熱，然后移入25 mL容量瓶中，用去離子水稀釋至刻度，同時隨行空白。

鉛(Pb)及鋁(Al):取樣品 0.5 g，置于 50 mL瓷坩堝中，于馬福爐中500℃以下灰化，取出，加1 mL去離子水溶解殘渣并轉入25 mL容量瓶中，用去離子水稀釋至刻度，同時隨行空白。

2.1.2 工作曲線制備

Pb、As、Hg、Al標準液均由國家標準物質中心提供，質量濃度為1 g/L，稀釋至表1中的質量濃度。

表1 As，Hg，Pb 及 Al的工作曲線濃度

2.1.3 測定結果 結果見表2。

表2 As，Hg，Pb，Al含量測定結果

2.2 農藥殘留量測定

2.2.1 色譜條件

程序升溫:初始100℃，每分鐘10℃升至220℃，每分鐘8℃升至250℃，保持10 min。理論板數(shù)按α－BHC峰計算，不低于10，2個相鄰色譜峰的分離度應大于1.5。

2.2.2 溶液制備

對照品儲備液:精密稱取六六六(BHC)[α－BHC，β－BHC，γ－BHC，δ－BHC]，滴滴涕 (DDT)[PP'－DDE，PP'－DDD，OP'－DDT，PP'－DDT]及五氯硝基苯 (PCNB)農藥對照品適量，用石油醚(60～90℃)分別制成每1 mL約含4～5 μg的溶液，即得。

混合對照品溶液:精密量取上述各對照品儲備液適量，置10 mL量瓶中，用石油醚(60～90℃)稀釋至刻度，即得。各對照品濃度見表3。

表3 混合對照品溶液中各對照品濃度

供試品溶液:取各藥材，于60℃干燥4 h，粉碎成細粉，取約8 g，精密稱定，置100 mL具塞錐形瓶中，加水20 mL浸泡過夜，加丙酮40 mL，稱定，超聲處理30 min，放冷，用丙酮補足減失的質量，再加氯化鈉約6 g及二氯甲烷30 mL，稱定，超聲處理15 min，用二氯甲烷補足減失的質量，靜置使分層，將有機相迅速移入裝有適量無水硫酸鈉的100 mL具塞錐形瓶中，放置4 h。精密量取35 mL，于40℃水浴減壓濃縮至近干，加少量石油醚(60～90℃)，如前反復操作至二氯甲烷及丙酮除凈，用石油醚(60～90℃)溶解并轉移至10 mL具塞刻度離心管中，加石油醚(60～90℃)至5 mL。小心加入硫酸 1 mL，振搖 1 min，離心(3000 r/分)10 min。精密量取上清液2 mL置具刻度的濃縮瓶中，連接旋轉蒸發(fā)器，40℃下將溶液濃縮至適量、精密稀釋至1 mL，即得。

2.2.3 測定法

分別精密吸取供試品溶液和與之相對應濃度的混合對照品溶液各1 μL，測定，按外標法計算供試品中9種農藥殘留量。結果見表4。

3 討論

中藥材中鉛、砷、汞含量過高，會對人體健康造成危害[2]，因此我國在2001年制定的《藥用植物及制劑進出口綠色行業(yè)標準》中限定中藥中 Pb≤5 mg/kg，As≤2 mg/kg，Hg≤0.2 mg/kg。從試驗結果可以看出，產地為磐安的伸筋草中鉛、砷、汞和鋁的含量均低于其他產地，產地對重金屬含量有影響，同在廣西但海拔高度不同的3批樣品中重復金屬含量無明顯差異，說明海拔高度可能影響不大。5批伸筋草中藥材中鉛不超過百萬分之五，砷不超過百萬分之二，汞不超過千萬分之五，均符合國家藥材標準。另外，在重金屬監(jiān)測時重點關注了鋁離子含量，因為伸筋草是鋁礦的標志植物，在伸筋草各批藥材中發(fā)現(xiàn)鋁含量都較高，在0.46%～1.05%之間，鋁離子具有神經毒性[3]，它可影響神經遞質系統(tǒng)，促進不溶性β淀粉樣蛋白的形成和聚集，與老年癡呆及一些退行性疾病相關。藥理試驗中，一般采用口服三氯化鋁溶液誘導建立小鼠老年癡呆模型，劑量為10 mg/kg，連續(xù)給藥45 d。世界衛(wèi)生組織研究表明，人體每千克體重對外允許攝入的鋁不能超過1 mg，伸筋草藥材中0.46% ～1.05%的含鋁量不能忽視;另有資料報道[4]，伸筋草提取液預防性治療給藥對大鼠實驗性矽肺有較好療效，伸筋草中的鋁含量值特別是“有機鋁”的含量值與其抗矽作用密切相關，因此建議在臨床應用中應注意鋁元素的影響[5]。

表4 伸筋草藥材中農藥殘留量測定結果(mg/kg)

國家《藥用植物及制劑進出口綠色行業(yè)標準》中限定BHC≤0.10 mg/kg，DDT≤0.10 mg/kg，PCNB 在《中國藥典一部》(2005年版)黃芪項下規(guī)定小于0.10 mg/kg。由測定結果看，5批伸筋草藥材中PCNB均未檢出，BHC和DDT的含量均符合標準，產地及海拔高度對其影響均不顯著。

[1]鄒桂欣，尤獻民，王光函.HPLC法測定伸筋草中α－玉柏堿含量[J].中藥材，2010，33(6):934 －936.

[2]李廣誠，楊 聘，董克禮.兩種不同老年癡呆模型鼠學習記憶能力和探索行為的比較[J].中國行為醫(yī)學科學，2008，17(2):109－110.

[3]佟 慧，孫 灝.鋁神經毒性的線粒體機制[J].安徽衛(wèi)生職業(yè)技術學院學報，2006，5(2):66 －67.

[4]吳 婷.中藥中有害物質污染狀況及檢測研究[D].江蘇:南京中醫(yī)藥大學，2006.

[5]馬志飛.神奇的找礦“向導”——指示植物[J].百科知識，2009(2):22－23.