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        枇杷果實(shí)總RNA的提取及八氫番茄紅素合成酶基因(PSY)片段的克隆

        2012-04-29 00:00:00張玲林順權(quán)楊向暉
        果樹學(xué)報(bào) 2012年4期

        摘要: 【目的】為從枇杷果實(shí)中提取高質(zhì)量的RNA,【方法】以枇杷果實(shí)為材料,對(duì)6種總RNA提取方法進(jìn)行分析和比較?!窘Y(jié)果】結(jié)果表明,在裂解前先用70%丙酮和80%乙醇分別對(duì)枇杷果皮和果肉進(jìn)行預(yù)處理,再結(jié)合CTAB-LiCl法,得到的總RNA質(zhì)量較好,OD260/OD280在1.8~2.2,OD260/OD230超過(guò)2.0,得率分別為幼果果皮56.78 μg·g-1,幼果果肉40.62 μg·g-1,成熟果果皮40.86 μg·g-1,成熟果果肉9.24 μg·g-1;并根據(jù)其他植物的八氫番茄紅素合成酶基因(PSY)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物,用以上方法提取的RNA為模板進(jìn)行RT-PCR,得到453 bp的基因片段,其推導(dǎo)的氨基酸序列與其他植物的同源性高達(dá)95%,推測(cè)該片段為PSY基因?!窘Y(jié)論】先用70%丙酮和80%乙醇分別對(duì)枇杷果皮和果肉進(jìn)行預(yù)處理,再結(jié)合CTAB-LiCl法,得到的RNA質(zhì)量好,可用于后續(xù)的分子生物學(xué)研究。

        關(guān)鍵詞: 枇杷果實(shí); 總RNA提取; PSY基因

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