摘要: 【目的】為了驗(yàn)證SAP基因在葡萄抗病防御機(jī)制中的作用，【方法】在前期通過(guò)抑制消減雜交技術(shù)（SSH）獲得中國(guó)野生葡萄毛葡萄株系‘商-24’衰老相關(guān)蛋白（SAP）基因EST序列的基礎(chǔ)上，采用RT-PCR從毛葡萄‘商-24’中分離到SAP基因cDNA序列， 并通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR和半定量PCR分析了SAP基因的表達(dá)特異性?！窘Y(jié)果】序列分析表明該基因具有完整的的開(kāi)放閱讀框，序列長(zhǎng)度為819 bp，編碼272個(gè)氨基酸殘基，相對(duì)分子質(zhì)量為30.56 ku，等電點(diǎn)為8.78，將其命名為VqSAP。多重比較結(jié)果顯示VqSAP基因與油棕、玉米、萱草、擬南芥、水稻等植物SAP基因的同源性為65%～74%。實(shí)時(shí)定量結(jié)果表明，在白粉菌誘導(dǎo)初期，抗病的毛葡萄株系‘商-24’和感病的華東葡萄株系‘湖南-1’ VqSAP基因表達(dá)量均升高，這可能是因?yàn)樗鼌⑴c了病原菌誘導(dǎo)的細(xì)胞程序性死亡過(guò)程。水楊酸（SA）、茉莉酸甲酯（MeJA）、乙烯（Eth）處理表明衰老相關(guān)蛋白基因表達(dá)受激素分子調(diào)節(jié)，但在抗病和感病株系中基因的表達(dá)量有所差異。在嫩葉、嫩莖、花、果皮、卷須等不同葡萄組織中的表達(dá)表明VqSAP基因的表達(dá)具有空間差異性。 【結(jié)論】這些結(jié)果暗示著VqSAP的表達(dá)響應(yīng)病原菌侵染并受生物脅迫相關(guān)激素的調(diào)控，很有可能在葡萄防御病原菌侵染的機(jī)制中發(fā)揮重要作用。

關(guān)鍵詞: 毛葡萄； 衰老相關(guān)蛋白； VqSAP基因； 克隆； 表達(dá)分析