摘要: 【目的】為了快速有效地利用基因工程的方法獲得柑橘無核新種質(zhì)，【方法】以我國特色多核柑橘優(yōu)良品種錦橙實(shí)生苗上胚軸切段為外植體，采用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)法進(jìn)行能導(dǎo)致種子敗育基因CG1-400-RNase的轉(zhuǎn)化；為快速有效地篩選出轉(zhuǎn)化子，在實(shí)生苗上胚軸切段轉(zhuǎn)化再生過程中，根據(jù)不同發(fā)育階段的組織或器官對抗生素的敏感程度不同采用不同的選擇壓。【結(jié)果】結(jié)果表明，在抗性芽再生過程中卡那霉素質(zhì)量濃度設(shè)定為50 mg·L-1，獲得的362個抗性芽轉(zhuǎn)入卡那霉素質(zhì)量濃度為100 mg·L-1的伸長培養(yǎng)基中進(jìn)行伸長培養(yǎng)后，進(jìn)行早期PCR檢測，獲得28個陽性芽；經(jīng)過不定芽誘導(dǎo)生根或試管嫁接，獲得22株完整植株?！窘Y(jié)論】再生植株經(jīng)PCR和Southern雜交檢測，獲得2株目的基因以單拷貝的形式插入錦橙基因組的轉(zhuǎn)基因植株，為最終獲得具有無核性狀且可穩(wěn)定遺傳的柑橘新種質(zhì)奠定了基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞: 柑橘； 根癌農(nóng)桿菌； CG1-400-RNase基因