摘要： 【目的】為了探明類caspase蛋白酶參與植物PCD的機(jī)制，【方法】以八棱海棠（Malus robusta Rehd.）實(shí)生苗為試驗(yàn)材料，對植株進(jìn)行輕度干旱脅迫，檢測葉片PCD的發(fā)生，并應(yīng)用RT-PCR技術(shù)克隆類caspase基因。【結(jié)果】結(jié)果表明，輕度干旱脅迫后3周的葉片出現(xiàn)細(xì)胞染色質(zhì)凝聚、胞質(zhì)皺縮、細(xì)胞核變形等細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)特征。提取葉片DNA，觀察到DNA呈現(xiàn)明顯的“DNA Ladder”，表現(xiàn)出典型的細(xì)胞程序性死亡的生化特征。在此基礎(chǔ)上提取葉片RNA，采用RT-PCR獲得長度為555 bp的類caspase基因片段?！窘Y(jié)論】經(jīng)同源性分析該片段與其他果樹的同源序列相似性超過80%，提示該區(qū)段為保守序列。比對蘋果基因組，八棱海棠基因組中存在半胱氨酸蛋白酶基因，該基因?yàn)閱慰截?，并且存?個(gè)同源基因，這為揭示干旱脅迫下八棱海棠調(diào)控PCD的機(jī)理及環(huán)境適應(yīng)的分子機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：八棱海棠； 干旱脅迫； 細(xì)胞程序性死亡； 類caspase