卞玉群，李 超，譚 峰，樊巧玲

（南京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，江蘇南京210046）

骨質(zhì)疏松癥（osteoporosis，OP）是一種以骨量降低、骨組織微結(jié)構(gòu)破壞為特征，導(dǎo)致骨脆性增加及易于骨折的代謝性疾病。目前國內(nèi)外對(duì)骨質(zhì)疏松癥的研究已不斷深入，但尚缺乏理想的治療方法。據(jù)現(xiàn)有中醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)，雖未見“骨質(zhì)疏松癥”這一病名，但其臨床表現(xiàn)與“骨痹”、“骨痿”、“骨枯”及“腰背痛”等病證相符。中醫(yī)認(rèn)為腎藏精主骨生髓，腎氣盛則髓充骨強(qiáng)，腎氣虛則髓虛骨空，故腎與骨息息相關(guān)?，F(xiàn)代中醫(yī)藥治療骨質(zhì)疏松癥多從補(bǔ)腎入手，本文就近10年來補(bǔ)腎方藥在骨質(zhì)疏松癥實(shí)驗(yàn)研究方面的進(jìn)展作一述評(píng)。

1 骨質(zhì)疏松癥的造模方法

骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生與多因素相關(guān)，其中主要包括內(nèi)分泌、遺傳及免疫等。研究者通過模擬這些因素建立骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型，進(jìn)而尋求最優(yōu)的治療方法。雖然各類模型與人類骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生發(fā)展有一定差別，但對(duì)其機(jī)理的探索及方藥的研究皆有深遠(yuǎn)影響。

1.1 摘除性腺所致的骨質(zhì)疏松癥模型

絕經(jīng)后的骨質(zhì)疏松癥是目前防治骨質(zhì)疏松的重點(diǎn)，故此類模型的建立已被公認(rèn)和采納。此方法一般選取3～10個(gè)月的雌性大鼠，麻醉后將其卵巢切除，使其雌激素水平降低，從而造成骨吸收大于骨形成，使其骨量丟失［1］。此類模型與絕經(jīng)期婦女的骨質(zhì)疏松相似，但臨床上絕經(jīng)后婦女仍然存在一定的內(nèi)分泌功能，故此法與實(shí)際情況存在一定差異。另外，手術(shù)對(duì)動(dòng)物本身而言亦為一種創(chuàng)傷，故易造成負(fù)氮平衡、應(yīng)激反應(yīng)等不良影響，有礙相關(guān)指標(biāo)的客觀反應(yīng)［2］。同樣，雄激素缺乏亦是男性骨質(zhì)疏松癥的重要危險(xiǎn)因素。雄激素對(duì)骨代謝的調(diào)節(jié)主要是通過骨內(nèi)的雄激素受體來實(shí)現(xiàn)的［3］，故摘除睪丸大鼠模型可為男性骨質(zhì)疏松癥的研究提供思路與方法。

1.2 藥物所致的骨質(zhì)疏松癥模型

長期服用某些藥物會(huì)引起繼發(fā)性骨質(zhì)疏松，故可以此來復(fù)制骨質(zhì)疏松癥模型。如可取3～10個(gè)月的大鼠，肌內(nèi)注射地塞米松可抑制腸鈣吸收，致繼發(fā)性甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)，從而出現(xiàn)骨形成減少，骨吸收增強(qiáng)。此造模方法主要用于糖皮質(zhì)激素引起繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的研究，與人類原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生機(jī)理存在本質(zhì)的差別。又如取雌性或雄性大鼠，用維甲酸灌胃，使得骨吸收大于骨形成。此模型雖與人類原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的病因不盡相同，但在骨反應(yīng)及組織形態(tài)學(xué)上與人類缺乏雌激素的表現(xiàn)相似［4］，且操作較簡便，周期短，成功率高。

1.3 其他骨質(zhì)疏松癥模型

老齡鼠處于中年后期，趨向于“天癸竭”的階段，故可作為老年性骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型。另外，可通過控制鈣、蛋白等攝入復(fù)制缺鈣所引起的營養(yǎng)性骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型，主要用于探討飲食不調(diào)之骨質(zhì)疏松癥發(fā)病機(jī)理；亦可通過限制動(dòng)物的活動(dòng)等，以減少骨骼應(yīng)力刺激來復(fù)制廢用性大鼠骨質(zhì)疏松模型；還可通過切除甲狀旁腺來研究各種疾病所導(dǎo)致的腸鈣吸收低下、雌激素等分泌不足而引起的骨吸收增強(qiáng)病理機(jī)制［5］，但此法手術(shù)難度較大?，F(xiàn)在亦有采用基因敲除來制作骨質(zhì)疏松癥的動(dòng)物模型，敲除的基因主要是α，β-雌激素受體或芳香酶［6］。

2 補(bǔ)腎方藥治療骨質(zhì)疏松癥的藥效機(jī)理研究

2.1 單味藥研究

許多傳統(tǒng)的補(bǔ)腎中藥對(duì)于防治骨質(zhì)疏松癥都有良好的臨床療效，實(shí)驗(yàn)研究亦屢見不鮮，如淫羊藿、骨碎補(bǔ)、杜仲、補(bǔ)骨脂等補(bǔ)腎中藥在防止骨質(zhì)疏松癥的藥理研究方面皆有較多相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。

2.1.1 淫羊霍 藥性辛甘溫，歸肝腎經(jīng)，為補(bǔ)腎壯陽要藥。體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，淫羊藿苷可以抑制成骨細(xì)胞凋亡，促進(jìn)骨形成，減少骨吸收［7］。淫羊霍苷能顯著提高去勢(shì)模型大鼠腰椎骨密度和骨小梁的骨密度，改善骨質(zhì)疏松癥的病理形態(tài)學(xué)改變［8］。

2.1.2 骨碎補(bǔ) 藥性苦溫，歸肝腎經(jīng)，具有補(bǔ)腎強(qiáng)骨、活血續(xù)傷的作用。骨碎補(bǔ)與雌激素的作用類似，可抑制絕經(jīng)后高轉(zhuǎn)換型，增加骨小梁骨量和連接性［9］。骨碎補(bǔ)總黃酮能夠上調(diào)骨髓微環(huán)境中Smad1、Smad5 mRNA的表達(dá)水平，此可能為其促進(jìn)骨形成、修復(fù)骨損傷作用的機(jī)制之一［10］。

2.1.3 杜仲 藥性甘溫，為補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨的要藥。杜仲干預(yù)去卵巢大鼠，可使其血清AKP明顯升高，脛骨抗彎曲力加強(qiáng)，從而促進(jìn)骨形成且能較好地維持骨生物力學(xué)［11］。采用杜仲葉醇治療去卵巢大鼠，可使其骨密度、血清雌二醇含量顯著升高［12］。

2.1.4 補(bǔ)骨脂 藥性苦辛溫，歸脾腎經(jīng)，具有補(bǔ)腎壯陽的作用。補(bǔ)骨脂水煎劑可使去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠的骨密度、骨鈣素等顯著升高［13］。補(bǔ)骨脂水提液可抑制骨吸收，促進(jìn)骨形成的增加，利于脂質(zhì)代謝［14］。

2.1.5 續(xù)斷 藥性苦辛，微溫，補(bǔ)益肝腎、強(qiáng)筋健骨。續(xù)斷提取液能夠改善去卵巢大鼠的骨形態(tài)學(xué)，使骨量及骨結(jié)構(gòu)明顯改善，降低骨高轉(zhuǎn)換率［15］。中、高劑量的續(xù)斷能促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖，增加骨鈣素和Ⅰ型前膠原mRNA的表達(dá)［16］。

2.1.6 牛膝 藥性苦甘酸平，歸肝腎經(jīng)。懷牛膝水煎液能顯著增加骨質(zhì)疏松大鼠的骨礦質(zhì)，增加有機(jī)質(zhì)的含量，提高骨密度［17］。牛膝總皂苷能夠改善維甲酸致骨質(zhì)疏松大鼠的一般情況，顯著增加其體重和骨密度，改善骨質(zhì)疏松大鼠的骨代謝［18-19］。

2.1.7 鹿茸 藥性甘咸溫，補(bǔ)腎陽、益精血、強(qiáng)筋骨。高劑量的鹿茸能顯著提高去卵巢大鼠的骨密度、骨礦含量及BGP，顯著增加骨小梁寬度及骨小梁面積百分比［20］。鹿茸總多肽能明顯改善維A酸所致骨重建的負(fù)平衡狀態(tài)，促使骨Ca含量、骨重系數(shù)及骨量增加，從而使骨組織顯微結(jié)構(gòu)趨于正常［21］。

2.1.8 山茱萸 酸澀微溫，補(bǔ)益肝腎，收斂固澀。通過電子計(jì)算機(jī)圖像分析，山茱萸水提液可影響骨皮質(zhì)厚度、骨細(xì)胞數(shù)目等，能明顯改善SAM-P/6小鼠的骨質(zhì)疏松狀況［22］。山茱萸總苷可以增加去勢(shì)大鼠的骨密度，提高雌二醇的水平［23］。

2.2 復(fù)方研究

腎中精氣的盛衰決定著骨的強(qiáng)弱，《醫(yī)經(jīng)精義》云：“腎藏精，精生髓，髓養(yǎng)骨，故骨者，腎之合也”，所以補(bǔ)腎復(fù)方對(duì)于骨質(zhì)疏松癥的研究更有臨床價(jià)值。仙靈骨葆膠囊（淫羊藿、補(bǔ)骨脂、地黃等）可以明顯改善骨質(zhì)疏松大鼠骨形態(tài)計(jì)量學(xué)指標(biāo)，增加去勢(shì)大鼠骨形成，降低骨吸收，抑制高轉(zhuǎn)換的趨勢(shì)［24-25］。密骨片（淫羊霍、杜仲、懷牛膝等）具有抑制骨吸收，促進(jìn)骨形成的雙重作用［26-27］。健骨顆粒（淫羊藿、山茱萸、煅狗骨等）能調(diào)節(jié)去卵巢骨質(zhì)疏松模型大鼠垂體-腎上腺軸的病理變化和功能狀態(tài)，抑制骨吸收，降低Ⅰ型膠原纖維的分解，提高成骨細(xì)胞 ER-α、ER-β 的表達(dá)［28-30］。補(bǔ)腎方（淫羊藿、補(bǔ)骨脂、黃芪等）可明顯改善去卵巢大鼠骨密度，降低TRACP-5b水平，提高BGP含量及雌激素水平，從而抑制骨的吸收，促進(jìn)骨的形成［31］。補(bǔ)腎益骨方（淫羊藿、骨碎補(bǔ)、補(bǔ)骨脂等），研究報(bào)道從分子細(xì)胞水平證實(shí)了該方對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥具有較好的防治作用［32］。左歸丸可降低骨質(zhì)疏松大鼠血清PTH水平，增加E2水平，其含藥血清可直接抑制RANKL的分泌，亦可促進(jìn)成骨細(xì)胞分泌OPG，使破骨細(xì)胞活性降低，從而達(dá)到治療骨質(zhì)疏松的目的［33-34］。

骨質(zhì)疏松癥涉及多臟腑的病變，有學(xué)者認(rèn)為其病機(jī)以腎虛為主，肝失疏泄為關(guān)鍵，脾虛為輔，血瘀是促進(jìn)因素［35］。故研究者常在補(bǔ)腎方的基礎(chǔ)上配伍疏肝、健脾、活血藥以加強(qiáng)治療效果。補(bǔ)腎活血方（熟地、牛膝、三七等）可刺激體外成骨細(xì)胞增殖，提高堿性磷酸酶活性及礦化結(jié)節(jié)形成的數(shù)量［36］。補(bǔ)腎健脾活血方（骨碎補(bǔ)、補(bǔ)骨脂、丹參等）可顯著提高骨質(zhì)疏松大鼠骨密度、骨強(qiáng)度，增加E2、BGP、IGF-1的含量，降低血清IL-6含量及尿DPD［37-40］。補(bǔ)腎健脾活血方（補(bǔ)骨脂、淫羊藿、丹參等）能使成骨細(xì)胞端粒長度延長，使端粒酶活性上升，從而提高成骨細(xì)胞的增殖和分化能力，促進(jìn)骨質(zhì)形成［41］。

3 結(jié)語

綜上所述，目前運(yùn)用較多的骨質(zhì)疏松癥動(dòng)物模型主要有去性腺致骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型、藥物致骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型、營養(yǎng)性骨質(zhì)疏松模型及甲狀旁腺切除致骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型等。通過藥理研究發(fā)現(xiàn)，諸多單味補(bǔ)腎中藥如淫羊藿、補(bǔ)骨脂、骨碎補(bǔ)等，在防治骨質(zhì)疏松癥時(shí)效果較佳。復(fù)方配伍后，其協(xié)同作用增強(qiáng)。補(bǔ)腎方藥治療骨質(zhì)疏松癥的機(jī)理主要包括對(duì)骨細(xì)胞的影響、體內(nèi)微循環(huán)與微量元素的調(diào)節(jié)、鈣系統(tǒng)的調(diào)節(jié)及類雌激素樣作用等諸多方面。隨著研究的不斷深入，從分子、基因水平上探索骨質(zhì)疏松癥作用機(jī)制是未來研究的熱點(diǎn)與難點(diǎn)，結(jié)合中醫(yī)學(xué)辨證論治可能有益于研究的突破。隨著老齡化社會(huì)的到來，人們對(duì)于骨質(zhì)疏松癥的重視程度越來越高，而補(bǔ)腎方藥通過其對(duì)機(jī)體全方位、多環(huán)節(jié)、多靶點(diǎn)的整體調(diào)節(jié)，使其具有廣闊的發(fā)展前景。

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