人參果復(fù)方顆?？蛊谧饔玫难芯?/h1>
2012-04-13 12:31:00張鳳清付彥臣刁冬梅
中國釀造 2012年11期
張鳳清，付彥臣，刁冬梅
（1.長春工業(yè)大學(xué) 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，吉林 長春 130012；2.四平宏寶萊飲品股份有限公司，吉林 四平 136000）
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為疲勞是機(jī)體過用（超限）而引起的功能降低并出現(xiàn)不適的狀態(tài)，主要表現(xiàn)為疲勞困倦，可出現(xiàn)頭暈、健忘、睡眠質(zhì)量下降等伴隨癥狀[1]。疲勞的產(chǎn)生與能源物質(zhì)消耗、代謝產(chǎn)物堆積、內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定性失調(diào)、自由基影響等因素關(guān)系密切[2]。長期以來，尋找安全、有效、無毒副作用的有效藥物來延緩疲勞的發(fā)生和加速疲勞的消除一直是藥物研究的熱點(diǎn)之一，以中草藥為原料的保健食品在這一領(lǐng)域展示出廣闊的前景。
人參果為五加科植物人參（Panax ginsengC.A.Mey.）的成熟果實(shí)，人參果中富含人參皂苷，此外還含有多糖、生物堿、揮發(fā)油、氨基酸、無機(jī)鹽、胡蘿卜苷、β-谷甾醇等多種化學(xué)成分[3-4]。國內(nèi)外學(xué)者研究表明，人參果的藥理作用在許多方面與人參相似，但是在許多功能方面，人參果又具有人參無法比擬的獨(dú)特作用，其具有降低血糖、抗休克、保護(hù)心肌、保護(hù)腎功能、提高記憶力、增強(qiáng)免疫力、抗疲勞等多種保健作用[5-7]。此外，據(jù)文獻(xiàn)報道，紅景天[8-10]、靈芝[11-13]和枸杞子[14-16]中也含有豐富的活性成分，在緩解體力疲勞方面起著重要的作用。因此，本品利用人參果、紅景天、靈芝、枸杞子為原料，輔以白砂糖，采用現(xiàn)代制備工藝研制成“人參果復(fù)方顆粒”，該產(chǎn)品符合國家食品藥品監(jiān)督管理局保健食品原料使用規(guī)定，本文旨在研究人參果復(fù)方顆粒的抗疲勞作用。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 實(shí)驗(yàn)藥品
人參果復(fù)方顆粒（主要成分為人參果、紅景天、靈芝、枸杞子等），固體顆粒劑，鋁塑復(fù)合膜袋裝，外包裝為紙盒。由長春工業(yè)大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院研制，吉林紫鑫藥業(yè)股份有限公司加工。
1.1.2 實(shí)驗(yàn)動物
選用吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院動物實(shí)驗(yàn)中心提供的ICR清潔級雄性小鼠，體重18g～22g，生產(chǎn)許可證號：SCXK-（吉）2007-0003。小鼠基礎(chǔ)飼料由長春市億斯實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限責(zé)任公司提供，生產(chǎn)許可證號：SCXK-（吉）2010-0001。本清潔級動物室環(huán)境設(shè)施合格證號：吉動設(shè)字10-1005號，實(shí)驗(yàn)動物使用許可證號：SYXK（吉）2010-0011，清潔級。
1.1.3 劑量選擇
廠家推薦成人（體重以60kg計(jì)），每天攝入2次，每次1袋，5g/袋，即166.7mg/kg BW d，以廠家日推薦成人攝入量的1、10、30倍設(shè)置灌胃劑量，即166.7mg/kg BW d、1666.7mg/kg BW d、5000mg/kg BW d，分別取1667mg、16667mg、50000mg定型產(chǎn)品加蒸餾水至200mL，蒸餾水作陰性對照組，該樣品含糖量81.33%，因此以本試驗(yàn)相應(yīng)的高劑量組含糖量20.33%設(shè)糖對照組。各組小鼠灌胃量均為0.2mL/10g BW d，連續(xù)灌胃30d。
1.1.4 儀器與試劑
日本東芝TBA-120FR型全自動生化分析儀，SBA-40C型生物傳感分析儀，血乳酸測試酶膜，尿素測定試劑盒，肝糖原試劑盒，游泳箱（50cm×50cm×40cm），電子天平，722分光光度計(jì)，鉛皮，秒表等。
1.2 方法
1.2.1 人參果復(fù)方顆粒的制備
人參果復(fù)方顆粒的生產(chǎn)工藝：
1.2.2 負(fù)重游泳試驗(yàn)
末次給予受試物30min后，置小鼠在游泳箱中游泳，水深約30cm，水溫（25±1）℃，鼠尾根部負(fù)荷5%體重的鉛皮。記錄小鼠自游泳開始至死亡時間，作為小鼠游泳時間（min）。
1.2.3 血清尿素測定
末次給予受試物30min，在溫度為（30±0.5）℃的水中游泳90min，休息60min摘眼球采血，取血清，進(jìn)行尿素含量測定。
1.2.4 肝糖原測定
末次給予受試物30min處死小鼠取肝臟，經(jīng)生理鹽水漂洗后用濾紙吸干，精確稱取肝臟75mg，每管加入225μL試劑盒提供的堿溶液，用簿膜封住管口，扎一透氣孔，沸水浴20min，冷卻后加入7.2mL蒸餾水，充分混勻，按試劑說明書操作加入顯色劑，沸水浴5min，用722分光光度計(jì)在波長620nm處進(jìn)行比色測定，按說明書提供的公式換算肝糖原。
1.2.5 血乳酸測定
末次給予受試物30min后采血20μL，再在溫度為（30±0.5）℃的水中不負(fù)重游泳10min，分別于游泳后立即（游泳后0min）和游泳后休息20min各采血20μL，采用山東省科學(xué)院生物研究所生產(chǎn)的生物傳感分析儀測定以上3個時間點(diǎn)的血乳酸值。以3個時間點(diǎn)血乳酸曲線下面積（計(jì)算公式見后）判斷結(jié)果。
1.2.6 統(tǒng)計(jì)分析
數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件中單因素方差分析進(jìn)行均值比較，方差齊時，各組間兩兩比較用LSD法；方差不齊時，各組間兩兩比較采用Tamhane法。
2 結(jié)果與分析
2.1 人參果復(fù)方顆粒對小鼠負(fù)重游泳時間及小鼠增重的影響
表1 人參果復(fù)方顆粒對小鼠負(fù)重游泳時間及小鼠增重的影響Table 1 Effect of complex ginseng fruit granule on swimming time and body weight of mice
由表1可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的人參果復(fù)方顆粒30d，各實(shí)驗(yàn)組小鼠增重與糖對照組比較無顯著性差異（p>0.05），高劑量組游泳時間長于糖對照組，且差異有顯著性（p<0.05），說明人參果復(fù)方顆粒能延長小鼠負(fù)重游泳時間而對小鼠增重?zé)o影響。
2.2 人參果復(fù)方顆粒對小鼠血清尿素及小鼠增重的影響
由表2可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的人參果復(fù)方顆粒30d，各實(shí)驗(yàn)組小鼠增重與糖對照組比較無顯著性差異（p>0.05），高、中劑量組小鼠游泳后血清尿素低于糖對照組，且與糖對照組比較有顯著性差異（p<0.01，p<0.05），說明人參果復(fù)方顆粒具有抑制小鼠游泳后血清尿素升高的作用而對小鼠增重?zé)o影響。
2.3 人參果復(fù)方顆粒對小鼠肝糖原含量及小鼠增重的影響
表2 人參果復(fù)方顆粒對小鼠游泳后血清尿素及小鼠增重的影響Table 2 Effect of complex ginseng fruit granule on content of blood urea nitrogen and body weight of mice
表3 人參果復(fù)方顆粒對小鼠肝糖原含量及小鼠增重的影響Table 3 Effect of complex ginseng fruit granule on the content of liver glycogen and body weight of mice
由表3可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的人參果復(fù)方顆粒30d，各實(shí)驗(yàn)組小鼠增重與糖對照組比較無顯著性差異（p>0.05），僅高劑量組肝糖原儲備高于糖對照組且差異具有顯著性（p<0.05），表明人參果復(fù)方顆粒能增加肝糖原儲備但對小鼠增重未見影響。
2.4 人參果復(fù)方顆粒對小鼠血乳酸值及小鼠體重的影響
表4 給予人參果復(fù)方顆粒小鼠游泳前、后及休息20min 三個時間點(diǎn)血乳酸值Table 4 Change of the contents of blood lactic acid after overfeeding complex ginseng fruit granule
由表5可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的人參果復(fù)方顆粒30d，各實(shí)驗(yàn)組小鼠增重與糖對照組比較無顯著性差異（p>0.05），各劑量組小鼠游泳后3個時間點(diǎn)血乳酸曲線下面積雖有所降低，但與糖對照組比較無顯著性差異（p>0.05），說明人參果復(fù)方顆粒對抑制游泳時血乳酸的產(chǎn)生及小鼠增重均無影響。
表5 人參果復(fù)方顆粒對小鼠三個時間點(diǎn)血乳酸曲線下面積及小鼠增重的影響Table 5 Effect of complex ginseng fruit granule on the area of blood lactic acid under the curve in three time points and body weight of mice
3 結(jié)論
經(jīng)口給予小鼠人參果復(fù)方顆粒166.7、1666.7、5000mg/kg BW d，連續(xù)灌胃30d，與糖對照組比較5000mg/kg BW d劑量組能延長小鼠負(fù)重游泳時間，減少小鼠游泳時血清尿素的產(chǎn)生，增加肝糖原儲備；1666.7mg/kg BW d劑量組能減少小鼠游泳時血清尿素的產(chǎn)生，與糖性對照組比較有顯著性差異（p<0.05），各劑量組對小鼠體重及血乳酸的產(chǎn)生均未見影響。由此判定人參果復(fù)方顆粒具有緩解體力疲勞功能。
[1]王 瑋，金吉中，郜葉紅，等.抗運(yùn)動性疲勞單味中藥研究概述[J].中藥材，2007，27（2）：138-142.
[2]黃林章，黃寶康，秦路平，等.中藥抗疲勞作用機(jī)制的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代藥物與臨床，2010，25（3）：161-165.
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張鳳清，付彥臣，刁冬梅
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現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為疲勞是機(jī)體過用（超限）而引起的功能降低并出現(xiàn)不適的狀態(tài)，主要表現(xiàn)為疲勞困倦，可出現(xiàn)頭暈、健忘、睡眠質(zhì)量下降等伴隨癥狀[1]。疲勞的產(chǎn)生與能源物質(zhì)消耗、代謝產(chǎn)物堆積、內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定性失調(diào)、自由基影響等因素關(guān)系密切[2]。長期以來，尋找安全、有效、無毒副作用的有效藥物來延緩疲勞的發(fā)生和加速疲勞的消除一直是藥物研究的熱點(diǎn)之一，以中草藥為原料的保健食品在這一領(lǐng)域展示出廣闊的前景。
人參果為五加科植物人參（Panax ginsengC.A.Mey.）的成熟果實(shí)，人參果中富含人參皂苷，此外還含有多糖、生物堿、揮發(fā)油、氨基酸、無機(jī)鹽、胡蘿卜苷、β-谷甾醇等多種化學(xué)成分[3-4]。國內(nèi)外學(xué)者研究表明，人參果的藥理作用在許多方面與人參相似，但是在許多功能方面，人參果又具有人參無法比擬的獨(dú)特作用，其具有降低血糖、抗休克、保護(hù)心肌、保護(hù)腎功能、提高記憶力、增強(qiáng)免疫力、抗疲勞等多種保健作用[5-7]。此外，據(jù)文獻(xiàn)報道，紅景天[8-10]、靈芝[11-13]和枸杞子[14-16]中也含有豐富的活性成分，在緩解體力疲勞方面起著重要的作用。因此，本品利用人參果、紅景天、靈芝、枸杞子為原料，輔以白砂糖，采用現(xiàn)代制備工藝研制成“人參果復(fù)方顆粒”，該產(chǎn)品符合國家食品藥品監(jiān)督管理局保健食品原料使用規(guī)定，本文旨在研究人參果復(fù)方顆粒的抗疲勞作用。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 實(shí)驗(yàn)藥品
人參果復(fù)方顆粒（主要成分為人參果、紅景天、靈芝、枸杞子等），固體顆粒劑，鋁塑復(fù)合膜袋裝，外包裝為紙盒。由長春工業(yè)大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院研制，吉林紫鑫藥業(yè)股份有限公司加工。
1.1.2 實(shí)驗(yàn)動物
選用吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院動物實(shí)驗(yàn)中心提供的ICR清潔級雄性小鼠，體重18g～22g，生產(chǎn)許可證號：SCXK-（吉）2007-0003。小鼠基礎(chǔ)飼料由長春市億斯實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限責(zé)任公司提供，生產(chǎn)許可證號：SCXK-（吉）2010-0001。本清潔級動物室環(huán)境設(shè)施合格證號：吉動設(shè)字10-1005號，實(shí)驗(yàn)動物使用許可證號：SYXK（吉）2010-0011，清潔級。
1.1.3 劑量選擇
廠家推薦成人（體重以60kg計(jì)），每天攝入2次，每次1袋，5g/袋，即166.7mg/kg BW d，以廠家日推薦成人攝入量的1、10、30倍設(shè)置灌胃劑量，即166.7mg/kg BW d、1666.7mg/kg BW d、5000mg/kg BW d，分別取1667mg、16667mg、50000mg定型產(chǎn)品加蒸餾水至200mL，蒸餾水作陰性對照組，該樣品含糖量81.33%，因此以本試驗(yàn)相應(yīng)的高劑量組含糖量20.33%設(shè)糖對照組。各組小鼠灌胃量均為0.2mL/10g BW d，連續(xù)灌胃30d。
1.1.4 儀器與試劑
日本東芝TBA-120FR型全自動生化分析儀，SBA-40C型生物傳感分析儀，血乳酸測試酶膜，尿素測定試劑盒，肝糖原試劑盒，游泳箱（50cm×50cm×40cm），電子天平，722分光光度計(jì)，鉛皮，秒表等。
1.2 方法
1.2.1 人參果復(fù)方顆粒的制備
人參果復(fù)方顆粒的生產(chǎn)工藝：
1.2.2 負(fù)重游泳試驗(yàn)
末次給予受試物30min后，置小鼠在游泳箱中游泳，水深約30cm，水溫（25±1）℃，鼠尾根部負(fù)荷5%體重的鉛皮。記錄小鼠自游泳開始至死亡時間，作為小鼠游泳時間（min）。
1.2.3 血清尿素測定
末次給予受試物30min，在溫度為（30±0.5）℃的水中游泳90min，休息60min摘眼球采血，取血清，進(jìn)行尿素含量測定。
1.2.4 肝糖原測定
末次給予受試物30min處死小鼠取肝臟，經(jīng)生理鹽水漂洗后用濾紙吸干，精確稱取肝臟75mg，每管加入225μL試劑盒提供的堿溶液，用簿膜封住管口，扎一透氣孔，沸水浴20min，冷卻后加入7.2mL蒸餾水，充分混勻，按試劑說明書操作加入顯色劑，沸水浴5min，用722分光光度計(jì)在波長620nm處進(jìn)行比色測定，按說明書提供的公式換算肝糖原。
1.2.5 血乳酸測定
末次給予受試物30min后采血20μL，再在溫度為（30±0.5）℃的水中不負(fù)重游泳10min，分別于游泳后立即（游泳后0min）和游泳后休息20min各采血20μL，采用山東省科學(xué)院生物研究所生產(chǎn)的生物傳感分析儀測定以上3個時間點(diǎn)的血乳酸值。以3個時間點(diǎn)血乳酸曲線下面積（計(jì)算公式見后）判斷結(jié)果。
1.2.6 統(tǒng)計(jì)分析
數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件中單因素方差分析進(jìn)行均值比較，方差齊時，各組間兩兩比較用LSD法；方差不齊時，各組間兩兩比較采用Tamhane法。
2 結(jié)果與分析
2.1 人參果復(fù)方顆粒對小鼠負(fù)重游泳時間及小鼠增重的影響
表1 人參果復(fù)方顆粒對小鼠負(fù)重游泳時間及小鼠增重的影響Table 1 Effect of complex ginseng fruit granule on swimming time and body weight of mice
由表1可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的人參果復(fù)方顆粒30d，各實(shí)驗(yàn)組小鼠增重與糖對照組比較無顯著性差異（p>0.05），高劑量組游泳時間長于糖對照組，且差異有顯著性（p<0.05），說明人參果復(fù)方顆粒能延長小鼠負(fù)重游泳時間而對小鼠增重?zé)o影響。
2.2 人參果復(fù)方顆粒對小鼠血清尿素及小鼠增重的影響
由表2可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的人參果復(fù)方顆粒30d，各實(shí)驗(yàn)組小鼠增重與糖對照組比較無顯著性差異（p>0.05），高、中劑量組小鼠游泳后血清尿素低于糖對照組，且與糖對照組比較有顯著性差異（p<0.01，p<0.05），說明人參果復(fù)方顆粒具有抑制小鼠游泳后血清尿素升高的作用而對小鼠增重?zé)o影響。
2.3 人參果復(fù)方顆粒對小鼠肝糖原含量及小鼠增重的影響
表2 人參果復(fù)方顆粒對小鼠游泳后血清尿素及小鼠增重的影響Table 2 Effect of complex ginseng fruit granule on content of blood urea nitrogen and body weight of mice
表3 人參果復(fù)方顆粒對小鼠肝糖原含量及小鼠增重的影響Table 3 Effect of complex ginseng fruit granule on the content of liver glycogen and body weight of mice
由表3可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的人參果復(fù)方顆粒30d，各實(shí)驗(yàn)組小鼠增重與糖對照組比較無顯著性差異（p>0.05），僅高劑量組肝糖原儲備高于糖對照組且差異具有顯著性（p<0.05），表明人參果復(fù)方顆粒能增加肝糖原儲備但對小鼠增重未見影響。
2.4 人參果復(fù)方顆粒對小鼠血乳酸值及小鼠體重的影響
表4 給予人參果復(fù)方顆粒小鼠游泳前、后及休息20min 三個時間點(diǎn)血乳酸值Table 4 Change of the contents of blood lactic acid after overfeeding complex ginseng fruit granule
由表5可見，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的人參果復(fù)方顆粒30d，各實(shí)驗(yàn)組小鼠增重與糖對照組比較無顯著性差異（p>0.05），各劑量組小鼠游泳后3個時間點(diǎn)血乳酸曲線下面積雖有所降低，但與糖對照組比較無顯著性差異（p>0.05），說明人參果復(fù)方顆粒對抑制游泳時血乳酸的產(chǎn)生及小鼠增重均無影響。
表5 人參果復(fù)方顆粒對小鼠三個時間點(diǎn)血乳酸曲線下面積及小鼠增重的影響Table 5 Effect of complex ginseng fruit granule on the area of blood lactic acid under the curve in three time points and body weight of mice
3 結(jié)論
經(jīng)口給予小鼠人參果復(fù)方顆粒166.7、1666.7、5000mg/kg BW d，連續(xù)灌胃30d，與糖對照組比較5000mg/kg BW d劑量組能延長小鼠負(fù)重游泳時間，減少小鼠游泳時血清尿素的產(chǎn)生，增加肝糖原儲備；1666.7mg/kg BW d劑量組能減少小鼠游泳時血清尿素的產(chǎn)生，與糖性對照組比較有顯著性差異（p<0.05），各劑量組對小鼠體重及血乳酸的產(chǎn)生均未見影響。由此判定人參果復(fù)方顆粒具有緩解體力疲勞功能。
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