摘要：踝蛋白的磷酸化修飾，特別是腫瘤等病理?xiàng)l件下的踝蛋白磷酸化狀態(tài)，與腫瘤的發(fā)病、轉(zhuǎn)移機(jī)理密切相關(guān)。本研究采用鹽析、離子交換層析和電泳分離并純化了人大腸癌組織中的踝蛋白（Talin），經(jīng)胰酶水解獲得其肽段混合物，進(jìn)一步分別利用固定化Fe³⁺親和層析和TiO₂親和層析在酸性條件下對(duì)其中磷酸化修飾肽段進(jìn)行吸附，并以1%氨水進(jìn)行洗脫。在Michrom Magic C₁₈色譜柱上， 以A： 99%水+1%乙腈+0.1%甲酸和B： 99%乙腈+1%水+0.1%甲酸兩種流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫分離，采用ESI質(zhì)譜進(jìn)行依賴(lài)數(shù)據(jù)的二級(jí)子離子掃描。結(jié)果顯示，固定化Fe³⁺富集到8個(gè)磷酸化肽段而TiO₂富集到9個(gè)磷酸化肽段。本研究提供了一種快速、準(zhǔn)確地鑒定從人大腸癌組織中分離表征踝蛋白的方法。

關(guān)鍵詞：質(zhì)譜；踝蛋白；大腸癌；磷酸化修飾