摘要:利用細(xì)胞色素c與Nafion,通過(guò)自組裝方式,構(gòu)建了納米簇模擬過(guò)氧化物酶;利用電子透射顯微鏡、圓二色譜儀、紫外可見(jiàn)光分光光度儀及電化學(xué)工作站等設(shè)備測(cè)量模擬酶結(jié)構(gòu)變化、酶促動(dòng)力學(xué)參數(shù)以及電化學(xué)特性;在50 mmol/L Na2HPO4-NaH2PO4緩沖溶液(pH 10.0)中,測(cè)得模擬酶米氏常數(shù)Km、催化速率及催化效率分別為2.5 μmol/L、0.069 s-1、0.028±0.005 (μmol/L)-1s-1,其催化效率為天然辣根過(guò)氧化物酶的39%±5%,該模擬酶具有很好的穩(wěn)定性和活性,能夠替代辣根過(guò)氧化物酶。該模擬酶可以固定在功能化多壁納米管與納米金復(fù)合材料修飾玻碳電極上,在50 mmol/L Na2HPO4-NaH2PO4緩沖溶液(pH 7.0)中測(cè)得模擬酶與電極之間電子遷移速度常數(shù)ks為0.65 s-1。利用循環(huán)伏安法測(cè)量模擬酶催化濃度為0.02~10 nmol/L的H2O2,其陰極峰電流隨H2O2濃度增加而增大,并且得出模擬酶催化H2O2檢出限為0.05 nmol/L,電化學(xué)表觀米氏常數(shù)Kmapp為2.3×10-10 mol/L。
關(guān)鍵詞:自組裝;納米簇;模擬酶;光譜學(xué);電化學(xué)