王潤梅，岳志勁，張永芳

（1.山西大同大學(xué)農(nóng)學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，山西大同037009；2.山西大同大學(xué)化學(xué)與化工學(xué)院，山西大同037009）

北芪菇化學(xué)成分的初步研究

王潤梅1，岳志勁2，張永芳1

（1.山西大同大學(xué)農(nóng)學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，山西大同037009；2.山西大同大學(xué)化學(xué)與化工學(xué)院，山西大同037009）

采用試管預(yù)試法和圓形濾紙層析法對北芪菇的化學(xué)成分進(jìn)行檢測，結(jié)果表明北芪菇中含有氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、多糖、生物堿、黃酮及其苷類、酚性成分、植物甾醇、三萜成分、揮發(fā)油成分。

北芪菇；化學(xué)成分；試管預(yù)試法；圓形濾紙層析法

北芪菇是根據(jù)山西省渾源縣74 km2富硒地區(qū)的地理資源優(yōu)勢，將側(cè)耳屬平菇用北岳恒山正宗黃芪（又稱“正北芪”）和多種中草藥及農(nóng)作物副產(chǎn)品做培養(yǎng)料，經(jīng)科學(xué)配方和特殊工藝培育而成的新型菌類產(chǎn)品。它具有補(bǔ)氣固表、脫毒排膿、保護(hù)肝臟，有強(qiáng)身健體、滋潤皮膚、催生母乳的功能[1-4]，特別是對在當(dāng)今世界上稱為“第二癌癥”的牛皮癬（銀屑?。┚哂猩衿娴寞熜5]。它是一種藥食同源的功能型產(chǎn)品，已由山西省渾源縣恒山北芪菇專業(yè)合作社注冊了“恒王府”、“北芪菇”、“渾源”3個商標(biāo)。為了促進(jìn)對北芪菇的應(yīng)用，我們采用試管預(yù)試法和圓形濾紙層析法對其化學(xué)成分進(jìn)行系了統(tǒng)研究。

1 材料與試劑

1.1 材料

北芪菇購于山西省渾源縣恒山北芪菇專業(yè)合作社，晾干后粉碎。

1.2 試劑

甲醇，95％乙醇，乙醚，氯仿，茚三酮，濃鹽酸，α-萘酚，鎂粉，碘，乙酸酐，對硝基苯胺，硅鎢酸，冰醋酸，濃硫酸，無水硫酸鈉，氫氧化鈉，氨水，碘化鉀，次硝酸鉍，30％過氧化鈉，硫酸銅晶體，酒石酸鉀鈉晶體，氯化鋁，醋酸鉛。

以上試劑均為分析純，實驗用水均為二次蒸餾水。

2 實驗方法

2.1 供試樣品的制備

水提取液：將北芪菇研磨后，過10目篩，制成北芪菇粉末。稱取粉末5.0 g，加水100.0mL，于室溫浸泡過夜，過濾取濾液20.0 mL，作為冷水提取液，余下的殘渣及浸液于60℃水浴回流1 h，立即過濾，為熱水提取液。

甲醇提取液：稱取北芪菇粉末5.0 g，加甲醇50.0mL，后于60℃水浴回流10min，趁熱過濾；再次加入50.0mL甲醇，在水浴上回流10 min，趁熱過濾，將2次濾液合并，作為甲醇提取液。

酸性乙醇提取液：稱取北芪菇粉末5.0 g，加0.5％的鹽酸乙醇溶液70 mL后，于60℃水浴中回流10min，趁熱過濾，作為酸性乙醇提取液。

乙醇提取液：稱取北芪菇粉末5.0 g，加入95％乙醇50.0mL，于60℃水浴中回流20min，趁熱過濾，濾液經(jīng)減壓濃縮至5mL，作為乙醇提取液。

乙醚提取液：稱取北芪菇粉末5.0 g，加乙醚50mL，在60℃水浴中回流20min，上清液經(jīng)減壓濃縮至5 mL，作為乙醚提取液。

以上提取液均用活性炭去色素。

2.2 試管預(yù)試法

試管預(yù)試法[6-8]是利用北芪菇中各類成分溶解度的差異，首先用適當(dāng)?shù)娜軇┌讶芙舛认嘟某煞痔岢?，然后再選擇一些特異的顏色反應(yīng)或沉淀反應(yīng)等進(jìn)行檢測。

2.3 圓形濾紙層析法

圓形濾紙層析法[6-8]是用層析方法在圓形濾紙上將北芪菇不同的提取液點樣、展開，待溶劑充分揮發(fā)后，分別將不同的顯色劑噴于濾紙上。根據(jù)產(chǎn)生的熒光或出現(xiàn)的斑點、顏色，從而得出樣品的成分。

3 結(jié)果與分析

3.1 試管預(yù)試結(jié)果

3.1.1 氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)的檢測

取冷水提取液1.0mL，加入2滴10％的NaOH溶液，搖勻，滴入濃度為0.5％的CuSO4溶液，邊加邊搖，試液為紫紅色，預(yù)試結(jié)果說明多肽或蛋白質(zhì)存在于樣品中；取1.0mL冷水提取液，加入2～3滴濃度為0.2％茚三酮溶液，搖勻，在沸水中加熱5 min，試液呈現(xiàn)藍(lán)紫色，結(jié)果顯示樣品中含有氨基酸、多肽或蛋白質(zhì)。

3.1.2 有機(jī)酸的檢測

將1滴冷水提取液滴于pH試紙上，測得PH＜7，說明樣品含有有機(jī)酸成分。

3.1.3 糖、多糖及其苷類的檢測

取熱水提取液1.0mL，加入新配制的堿性酒石酸銅試劑5滴，在沸水中加熱5 min后，出現(xiàn)了棕紅色氧化亞銅沉淀，說明樣品中含有還原糖等；取1.0 mL熱水提取液，加入3滴5％的α-萘酚乙醇溶液，搖勻，沿試管壁緩慢加入0.5mL濃硫酸，在試液和硫酸的交界面處，很快地形成紫紅色環(huán)，結(jié)果說明樣品中含有苷類、糖類或多糖；取5.0mL熱水提取液，在沸水浴上蒸發(fā)至1.0mL，加入95％的乙醇溶液2.0mL，待沉淀出現(xiàn)后，過濾，再用無水乙醇少許洗滌，然后用2.0mL的水溶解沉淀，加入5滴新配制的堿性酒石酸銅試劑，在沸水浴中加熱5min，有棕紅色氧化亞銅沉淀出現(xiàn)，說明樣品含有多糖。

3.1.4 酚性成分檢測

新配制的重氮化試劑，試液呈現(xiàn)紅色，說明樣品含有酚性成分。

3.1.5 生物堿的檢測

取酸性乙醇提取液10.0 mL，滴加5％的氫氧化銨溶液若干直到溶液為中性，在沸水浴中蒸干，加5％的硫酸溶液3.0 mL溶解其殘渣，將殘渣過濾，將所得濾液1.0mL，加1～2滴硅鎢酸試劑，生成灰白色沉淀；取1.0 mL濾液，加1～2滴碘化鉍鉀試劑，生成橘紅色沉淀；取1.0mL濾液，加1～2滴碘化汞鉀試劑，生成淺黃色沉淀。這說明樣品中含有生物堿。

3.1.6 黃酮及其苷類的檢測

取甲醇提取液1.0mL，加入濃鹽酸5滴和少量鎂粉，在沸水浴中加熱3 min，呈現(xiàn)紅色反應(yīng)；取1.0mL甲醇提取液，在沸水浴上蒸干，加入硼酸的飽和丙酮溶液1.0 mL及10％的枸櫞酸丙酮溶液1.0mL，蒸干，將殘渣在紫外燈下照射，發(fā)現(xiàn)有強(qiáng)烈的熒光，說明樣品含有黃酮或苷類物質(zhì)。

3.1.7 植物甾醇、萜類成分的檢測

取甲醇提取液1.0mL，于水浴上蒸干，用1.0mL冰醋酸溶解殘渣，加入1.0 mL的醋酸酐-濃硫酸（19∶1）混合試劑，混勻，發(fā)現(xiàn)試液顏色由黃色逐漸變?yōu)槟G色；取1.0 mL乙醚提取液，于水浴上蒸干，用1.0 mL的氯仿溶解殘渣，沿試管壁緩緩加入濃硫酸1.0 mL，發(fā)現(xiàn)氯仿層有紅色反應(yīng)，在紫外燈下觀察，發(fā)現(xiàn)硫酸層有綠色熒光出現(xiàn)，說明樣品中含有植物甾醇、萜類成分。

3.1.8 揮發(fā)油的檢測

取乙醇提取液1.0mL，滴于玻璃表面皿上，于室溫下?lián)]發(fā)，出現(xiàn)油狀物殘渣并散發(fā)出香味，隨后加熱，發(fā)現(xiàn)油狀物減少，說明樣品中含有揮發(fā)油。

3.1.9 鞣質(zhì)、蒽醌、強(qiáng)心苷、皂甙、氰苷的檢測

均為陰性，樣品不含有上述幾類化合物。

3.2 圓形濾紙層析實驗結(jié)果

取圓形濾紙一張（Ф12.5 cm，新華牌），濾紙中心處打一小孔，備插入濾紙芯之用。在距中心1 cm處，分別將乙醇提取液、乙醚提取液用毛細(xì)管點樣，樣點的直徑以2mm左右為宜。一張濾紙可同時點上9個樣品。然后在濾紙的中心小孔插入一小條濾紙紙芯，移到盛放展開溶劑（V95％乙醇∶V氯仿＝2∶8）的直徑為12 cm的培養(yǎng)皿中，使濾紙芯浸在溶劑中，蓋上和濾紙同樣直徑的培養(yǎng)皿，進(jìn)行層析，當(dāng)溶劑的前沿達(dá)到濾紙邊緣1 cm處時，立即取出，用吹風(fēng)機(jī)吹干，將濾紙沿虛線剪開，各噴上不同的顯色劑，觀察濾紙上出現(xiàn)的斑點顏色或產(chǎn)生的熒光，確定樣品所含的成分。

3.2.1 乙醇提取液點樣

噴碘化鉍鉀試劑（醋酸液），出現(xiàn)棕紅色斑點，說明含有生物堿；噴等量混合的2％鐵氰化鉀水溶液與2％的三氯化鐵乙醇溶液，有藍(lán)紫色斑點出現(xiàn)，表明含有酚性成分；噴體積比為1∶3∶4的0.1％甲基紅乙醇溶液、0.1％甲基橙水溶液與0.1％石蕊水溶液，出現(xiàn)黃紅色斑點，說明含有有機(jī)酸；噴新配制的5％的磷鉬酸乙醇溶液，于120℃烘箱中烘5 min，發(fā)現(xiàn)有藍(lán)色斑點出現(xiàn)，說明含有甾醇及萜類化合物；先在紫外燈下觀察發(fā)現(xiàn)有黃色熒光斑點出現(xiàn)，再噴1％的三氯化鋁試劑后，發(fā)現(xiàn)熒

光顯著加強(qiáng)，說明含有黃酮及苷類化合物；噴其余顯色劑，均無特殊現(xiàn)象發(fā)生。

3.2.2 乙醚提取液點樣

噴碘化鉍鉀試劑（醋酸液），出現(xiàn)棕紅色斑點，說明含有生物堿；噴新配制的5％磷鉬酸乙醇溶液，于120℃烘5 min，出現(xiàn)藍(lán)色斑點，說明含有甾醇及萜類化合物；于紫外燈下觀察發(fā)現(xiàn)有黃色熒光，噴0.2％的茚三酮丙酮溶液，于8O℃烘箱中烘10 min，有藍(lán)紫色斑點出現(xiàn)，說明含有氨基酸；噴1％的三氯化鋁試劑后發(fā)現(xiàn)熒光顯著加強(qiáng)，表明含有黃酮及苷類化合物；噴其余顯色劑，均無特殊現(xiàn)象發(fā)生。

綜上所述，試管預(yù)試法和圓形濾紙層析法對北芪菇化學(xué)成分進(jìn)行的系統(tǒng)研究表明，北芪菇中含有氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、多糖及其苷類、生物堿、黃酮及其苷類、酚性成分、植物甾醇、三萜成分、揮發(fā)油成分。另外，通過其它實驗檢測到北芪菇內(nèi)還含有微量元素硒。由于其具有獨特的功效，所以對其化學(xué)成分有待進(jìn)一步系統(tǒng)分析和研究。

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〔責(zé)任編輯 楊德兵〕

Chem ical Constituents in BeiqiMushroom s

WANG Run-mei1，YUE Zhi-jing2，ZHANG Yong-fang1
（1.School of Agronomy and Life Sciences；2.School of Chemistry and Chemical Engineering，Shanxi Datong University，Datong Shanxi，037009）

In this paper chemical constituents of Beiqimushroomswere analysed by pre-test tubemethod and round filter paper method.It was found that the Beiqimushroom contained amino acids，peptides，proteins，organic acids，polysaccharides，alkaloids，flavonoids，phenolic compoundsplant sterols，three terpene composition，volatile oil.

Beiqimushrooms；constituents；test tubemethod；round filter papermethod

S567.3+9

A

1674-0874（2012）04-0032-02

2012-02-05

王潤梅（1963-），女，山西大同人，碩士，教授，研究方向：生化與分子生物學(xué)。