鐘亞娟 程艷香 程 靜

(武漢大學(xué)人民醫(yī)院東院婦科，湖北省武漢市 430200，電子郵箱：417143420@qq.com)

宮頸癌在全球婦女最常見的惡性腫瘤中位列第二位[1]。據(jù)估計，全世界每年有接近493 000例患者被新診斷為宮頸癌，其中有274 000例死于宮頸癌[2]，我國宮頸癌的患病率和病死率約占全世界的1/3。湖北五峰土家族自治縣地處鄂西南山區(qū)，是宮頸癌的高發(fā)地區(qū)，但高發(fā)原因至今尚不明確。而人乳頭狀瘤病毒(human papilloma virus，HPV)感染是宮頸癌發(fā)生的一個重要因素[3]。因此，了解該地區(qū)的HPV感染情況對宮頸癌的防治顯得尤為重要。本研究通過對湖北省五峰土家族自治縣女性HPV感染的流行病學(xué)現(xiàn)況進(jìn)行調(diào)查，以期為宮頸癌的防治提供參考。

1 資料與方法

1.1 研究對象 于2013年7～9月，選取參加五峰土家族自治縣宮頸癌篩查的1 000名已婚婦女為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：有性生活史、目前未懷孕、無宮頸手術(shù)史及盆腔放射治療史、無子宮切除術(shù)史、1年內(nèi)未做過宮頸檢查者。排除標(biāo)準(zhǔn)：處于經(jīng)期者、檢查前3 d有陰道用藥者、24 h內(nèi)有性生活者、無宮頸婦女、半年內(nèi)做過液基薄層細(xì)胞檢測+HPV檢查者。年齡17～77(41.9±9.1)歲。所有研究對象均自愿參加本研究并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 問卷調(diào)查：由當(dāng)?shù)毓ぷ魅藛T舉行相關(guān)知識講座并提前一周通知婦女參加HPV篩查。采用自制調(diào)查表進(jìn)行一對一面對面調(diào)查；所有回收問卷均由2個調(diào)查員核對，嚴(yán)格把關(guān)，并對錯填和漏填進(jìn)行進(jìn)一步核對直至無差錯。內(nèi)容包括個人基本信息(年齡、文化程度、人均月收入、吸煙情況)，病史情況(避孕方法、孕產(chǎn)史、是否絕經(jīng)等)。調(diào)查員均為經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)的、碩士以上學(xué)歷的、以宮頸疾病為研究方向的婦科醫(yī)生。共發(fā)放問卷1 000份，回收1 000份，回收有效率100%。

1.2.2 樣本采集與測定

1.2.2.1 婦科檢查：由婦科醫(yī)生對所有受檢者進(jìn)行婦科檢查并采集樣本。用擴(kuò)陰器暴露宮頸后，將采集宮頸脫落細(xì)胞的宮頸刷置于宮頸鱗柱交界處，順時針旋轉(zhuǎn)5周，然后放入保存液中，2周內(nèi)送檢，并詳細(xì)記錄婦檢情況。

1.2.2.2 HPV-DNA檢測：采用Hybri-Max法檢測HPV6、HPV11、HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59、HPV68等15種HPV基因型；其中，HPV6、HPV11為低危型，其余為高危型。實驗步驟：(1)采用德國QIAGEN公司的QIA Mini試劑盒(生產(chǎn)批號：S20040031)分離宮頸脫落細(xì)胞的DNA；(2)采用美國MBI公司生產(chǎn)的PE9600 PCR擴(kuò)增儀進(jìn)行擴(kuò)增；(3)擴(kuò)增后采用醫(yī)用核酸分子快速雜交儀(型號：M275534)及配套試劑盒(北京仕基辰源公司，生產(chǎn)批號：S20060014)導(dǎo)流雜交；以HPV-DNA≥1.0 pg/L代表HPV陽性，并根據(jù)芯片上HPV基因型分布的相應(yīng)位點判斷為何種基因型。任意一種HPV亞型陽性即視為HPV感染，兩種或兩種以上HPV亞型陽性即視為HPV復(fù)合感染；高危型HPV陽性或高危型和低危型HPV同時陽性者均視為高危型HPV感染，僅低危型HPV陽性者視為低危型HPV感染。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以例數(shù)和百分比表示，組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 HPV感染情況 1 000名研究對象中，感染HPV 166例，HPV感染率為16.6%，其中高危型HPV、低危型HPV及HPV復(fù)合感染的感染率分別為15.9%(159/1 000)、0.7%(7/1 000)和3.10%(31/1 000)。

2.2 HPV感染的亞型分布 單一HPV亞型感染中，感染率前三位的亞型是HPV16、HPV52、HPV58。31例HPV復(fù)合感染者中，二重感染24例(以HPV16及HPV52為主)，三重感染5例，四重感染2例；其中僅3例合并感染1種低危型HPV，其他28例均感染了至少一種高危型HPV。見表1及表2。

表1 單一HPV亞型感染的分布情況

表2 166例HPV感染陽性婦女中復(fù)合感染情況

2.3 影響HPV感染的相關(guān)因素 不同年齡、文化程度、避孕方法、懷孕次數(shù)、吸煙情況及絕經(jīng)情況婦女的HPV感染率比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)。不同人均月收入、分娩次數(shù)、人工流產(chǎn)次數(shù)婦女的HPV感染率比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。見表3。

表3 不同特征婦女HPV感染情況比較[n(%)]

續(xù)表3

注：a包括結(jié)扎、已絕經(jīng)婦女；b指陰道分娩者(n=953)，其中HPV感染126例。

3 討 論

湖北五峰土家族自治縣位于湖北省西南山區(qū)，交通不發(fā)達(dá)，經(jīng)濟(jì)條件落后。本課題組在傳統(tǒng)宮頸癌篩查的基礎(chǔ)上開展HPV檢測工作，該篩查方案具有高度的敏感度和特異度[4]，可為該地區(qū)提供可靠的HPV感染數(shù)據(jù)，并可明確高危人群。既往研究顯示，山西省婦女HPV感染率為14.8%[5]，西藏自治區(qū)為9.19%[6]，既往關(guān)于婦女高危型HPV感染的研究報道顯示，北京地區(qū)婦女高危型HPV感染率為9.89%[7]，深圳市華僑城為14.0%[8]，英國南威爾士地區(qū)為9.3%[9]，瑞典婦女為6.8%[10]，高危型HPV感染率為15.9%；而本研究中，湖北省五峰土家族自治縣婦女HPV感染率為16.6%，均高于上述地區(qū)。各研究報告的HPV感染率結(jié)果差異較大，可能與病毒檢測方法的差異及研究設(shè)計差異有關(guān)[11]。

本研究結(jié)果顯示，HPV16在五峰土家族自治區(qū)婦女中最為常見，其次為HPV52及HPV58，而HPV18較少見，與亞洲地區(qū)婦女HPV感染亞型相符[12]。魏穎穎等[13]對湖南地區(qū)患有宮頸重度鱗狀上內(nèi)瘤病變和宮頸癌的69例婦女進(jìn)行HPV檢測發(fā)現(xiàn)，HPV亞型中HPV16、HPV52及HPV58最常見，與本研究結(jié)果相似。

本研究中，65～75歲年齡段婦女HPV感染率最高(30.77%)，且HPV感染率有隨年齡增長而升高的趨勢，這與山西省宮頸癌篩查結(jié)果相似[5]。然而，有文獻(xiàn)報道，年輕婦女HPV感染率明顯高于年老者，HPV感染的高峰年齡在18～30歲[11]，與本研究結(jié)果不同，這可能與篩選對象所在區(qū)域、生活習(xí)慣、篩查方式、年齡分段不同有關(guān)。

盡管口服避孕藥可以增加宮頸癌的患病風(fēng)險[14]，但其是否影響HPV感染還存在很大爭議。本研究結(jié)果顯示，未避孕的婦女HPV感染率最高(21.09%)，口服避孕藥的婦女HPV感染率最低(9.36%)，但不同避孕方式婦女的HPV感染率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。這可能與所選對象的經(jīng)濟(jì)狀況、使用避孕藥時間長短、生活習(xí)慣等有關(guān)，有待進(jìn)一步研究。有研究顯示吸煙會增加HPV的感染風(fēng)險[6，15-16]，但本研究未發(fā)現(xiàn)吸煙與HPV感染有關(guān)，這可能與本研究對象吸煙人數(shù)少、篩查時間短等有關(guān)。

HPV感染是由多種因素引起的。本次研究結(jié)果顯示，人均月收入、分娩及人工流產(chǎn)次數(shù)可能為影響HPV感染的因素(P<0.05)。人均月收入低者，可能存在勞動強度大、工作環(huán)境及衛(wèi)生差，故容易感染HPV。分娩及人工流產(chǎn)次數(shù)越多，婦女感染HPV的可能性越大，可能是由于分娩及人工流產(chǎn)對宮頸造成創(chuàng)傷，創(chuàng)傷次數(shù)越多，感染HPV的可能性越大。

本研究首次對該地區(qū)婦女進(jìn)行HPV分型檢測，有利于對該地區(qū)疾病類型進(jìn)行判斷，確定治療方案及隨訪。目前國際上的疫苗主要針對HPV16及HPV18型，根據(jù)本研究結(jié)果，我們認(rèn)為有必要進(jìn)一步研究針對HPV52及HPV58型的疫苗。本研究得出的影響HPV感染的因素與其他研究不盡相同，可能與本次篩查僅對當(dāng)?shù)貗D女進(jìn)行短期的HPV檢測，未將性伴侶數(shù)量納入調(diào)查方案中有關(guān)，還可能與不同研究的設(shè)計方案，研究對象的種族、生活習(xí)慣、地域等有關(guān)，因此本研究結(jié)論還有待進(jìn)一步的追蹤調(diào)查證實。