喬波,徐輝,任利敏,張清真,鄭盼盼,苗志國

（河南科技學院,河南新鄉(xiāng)453003）

殼聚糖是甲殼素的衍生物,又稱為河溶性甲殼素,是甲殼素脫乙?；蟮漠a(chǎn)物,廣泛存在于甲殼類動物,尤其在蝦、蟹等節(jié)肢動物的外殼中.殼聚糖具有良好的組織相容性和無毒副作用等優(yōu)點,可作為新型的綠色飼料添加劑而使用,目前已經(jīng)被廣泛應用于飼料工業(yè)和醫(yī)藥行業(yè)等領域[1-2].有研究結果表明,殼聚糖可以促進動物的生長性能、提高生產(chǎn)成績[3-4].殼聚糖及其衍生物具有多種功能,主要包括：降低血脂水平、調(diào)節(jié)機體脂類代謝、抗菌（病毒）、增強動物免疫能力等[5-8].動物免疫機能的有效調(diào)節(jié)可以通過非特異性免疫和特異性免疫兩方面的功能來實現(xiàn),有研究表明殼聚糖對動物特異性免疫和非特異性免疫均有顯著增強功能[9].殼聚糖的純天然、高效無污染特性為其作為新型飼料添加劑提供了重要依據(jù)而受到廣泛關注.殼聚糖對揚州白鵝免疫機能的影響方面尚未見到相關報道,故此,本試驗探討了不同殼聚糖添加量對揚州生長白鵝免疫機能的影響,并有效篩選殼聚糖微粒在生長鵝上的適宜添加量,以期為鵝的科學養(yǎng)殖提供依據(jù).

1 材料與方法

1.1 動物與日糧

試驗選擇120只28日齡健康的揚州白鵝,按照性別各半,體重相近的原則分為4組（設對照組和0.10%,0.20%和0.30%的殼聚糖微粒添加組）,每組30只鵝,飼養(yǎng)試驗持續(xù)28 d.對照組飼喂基礎日糧.試驗所用殼聚糖購于上海藍季科技發(fā)展有限公司.試驗用生長鵝基礎日糧按照NRC（1994）營養(yǎng)標準配制,其日糧組成和日糧的營養(yǎng)水平見表1.

表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)水平Tab.1 Composition and nutrition levels of basal diets

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗用揚州白鵝采用分欄飼養(yǎng),常規(guī)免疫,自由采食和飲水,飼養(yǎng)試驗進行為期28 d.

1.3 樣品采集

分別于42、56日齡時,早上8：00于每個組中隨機選取6只鵝,進行翅靜脈采血10 mL,在4℃條件下3000 r/min離心10 min用于制備鵝血清,之后于-20℃冷凍保存以備分析用.血清中IgG、IgM和IgA水平均采用免疫比濁法（Immunoturbidimetry,ITM）,用全自動生化儀測定.IL-1、IL-2和TNF-α含量用放射免疫分析法測定（北京北方技術生物研究所）.

1.4 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析

本試驗數(shù)據(jù)以試驗處理為單位,用SAS 8.0統(tǒng)計軟件的ANOVA程序進行方差分析,并使用LSD法進行各組間的多重比較[10].試驗結果以平均值±標準差來表示.

2 結果與分析

2.1 殼聚糖對揚州白鵝血清IgG、IgM和IgA濃度的影響

殼聚糖對揚州白鵝血清IgG、IgM和IgA濃度的影響結果見表2.

表2 殼聚糖對揚州白鵝血清IgG、IgM和IgA濃度的影響Tab.2 Effects ofchitosan on serumIgG,IgMand IgAlevels in Yangzhou white geese

由表2可知,42日齡時,與對照組相比,添加殼聚糖微粒0.10%、0.20%組揚州白鵝血清中IgG濃度分別升高19.96%（P＜0.05）和31.07%（P＜0.05）；IgM濃度分別升高了13.71%（P＜0.05）和18.94%（P＜0.05）；IgA濃度分別升高了29.59%（P＜0.05）和43.39%（P＜0.05）,但0.30%組與對照組間無顯著性差異（P＞0.05）.56日齡時,殼聚糖微粒0.10%、0.20%添加組揚州白鵝血清中IgG濃度與對照組相比,分別升高24.07%（P＜0.05）和36.40%（P＜0.05）,IgM濃度分別升高了22.26%（P＜0.05）和26.03%（P＜0.05）；IgA濃度分別升高了23.37%（P＜0.05）和40.38%（P＜0.05）,但0.30%組與對照組間無顯著性差異（P＞0.05）.

2.2 殼聚糖對揚州白鵝血清IL-1、IL-2和TNF-α含量的影響

殼聚糖對揚州白鵝血清IL-1、IL-2和TNF-α含量的影響見表3.

表3 殼聚糖對揚州白鵝血清IL-1、IL-2和TNF-α含量的影響Tab.3 Effects of chitosan on serumI L-1,IL-2 and TNF-α levels in Yangzhou white geese

由表3可知,在42日齡和56日齡時與對照組相比殼聚糖微粒添加組（0.10%、0.20%和0.30%）揚州白鵝血清中IL-1、IL-2和TNF-α濃度均有所升高,但無顯著性差異（P＞0.05）.

3 討論

有研究表明,殼聚糖增強動物的機體免疫功能主要通過增強細胞免疫和體液免疫的作用而實現(xiàn)的[11-12].應自忠在小鼠上的影響結果表明,殼聚糖可以間接激活B細胞而提高血液中IgG、IgM、IgA、IgE和IgD濃度[13].苗志國等在豁眼鵝上的研究結果表明,殼聚糖可以顯著提高鵝血清中IgG、IgM、IgA濃度水平,但對血清IL-1、IL-2和TNF-α濃度則無顯著性影響[14].本試驗結果發(fā)現(xiàn),添加殼聚糖微?？梢燥@著提高揚州白鵝血清中IgG、IgM和IgA濃度水平,此結果與以往學者在肉仔雞上的研究結果基本相似[14-15].此外,殼聚糖可以提高NK細胞活力,進而誘導血清中IL-1和IL-2的產(chǎn)生.血液中的IL-1在機體免疫反應中具有促進IL-2分泌和LAK細胞產(chǎn)生的功能,并激活NK細胞和誘導腫瘤殺滅功能的產(chǎn)生.TNF-α具有顯著的抗腫瘤和調(diào)節(jié)多種動物機體免疫和炎癥反應細胞功能.試驗研究結果發(fā)現(xiàn),日糧中添加殼聚糖微粒具有提高揚州白鵝（生長階段）血清中IL-1、IL-2和TNF-α水平的趨勢,此結果與小鼠和仔豬上的研究結論基本一致[16].表明殼聚糖可以通過調(diào)節(jié)生長鵝血清免疫細胞因子IgG、IgM、IgA、IL-1、IL-2和TNF-α濃度而發(fā)揮其免疫調(diào)節(jié)作用.

4 結論

殼聚糖微粒（0.10%和0.20%添加量）可以顯著提高揚州白鵝（生長階段）血清中IgG、IgM、IgA濃度水平,但對血清IL-1、IL-2和TNF-α濃度則無顯著性影響.

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