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        羊肚菌菌絲體、菌核培養(yǎng)的試驗(yàn)

        2012-01-25 21:42:00王偉偉
        中國(guó)林副特產(chǎn) 2012年5期
        關(guān)鍵詞:菌核麥粒羊肚

        王偉偉

        (甘肅省小隴山林業(yè)實(shí)驗(yàn)局觀音林場(chǎng),甘肅 天水 741038)

        羊肚菌(Morchella esculenta)是一種珍貴的食用和藥用真菌,子實(shí)體味鮮美,營(yíng)養(yǎng)豐富,含有19種氨基酸和多種維生素,所含有的營(yíng)養(yǎng)成分是其它種類的食用菌所不及的。其性平,味甘寒無(wú)毒,具有益腸胃、化痰理氣之功效。隨著人們生活水平的日益提高,對(duì)營(yíng)養(yǎng)均衡的追求不斷加強(qiáng),羊肚菌越來(lái)越受人們的喜愛(ài),所以人工栽培技術(shù)的提高也就顯得更加迫切了。因而尋找羊肚菌菌絲的最適培養(yǎng)材料,探索和分析羊肚菌的腐生性,對(duì)于羊肚菌的人工栽培無(wú)疑是必須的。Volk and Leonand認(rèn)為羊肚菌菌絲的營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)及菌核的形成、生長(zhǎng)是其生活史的重要階段。本試驗(yàn)初步觀察了三種野生羊肚菌在不同培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)、菌核產(chǎn)生的特征。

        1 材料與方法

        1.1 菌絲培養(yǎng)

        菌種:粗腿羊肚菌(Morchella crassipes),羊肚菌(M.esculenta),尖頂羊肚菌(M.conica)。取新鮮子實(shí)體,表面用0.1%升汞消毒,挑取菌柄頂端內(nèi)部組織,放入PDA斜面。另在PDA三角瓶中懸掛子實(shí)層,收集于囊孢子,萌發(fā)后移置PDA斜面,15~25℃室溫培養(yǎng),長(zhǎng)滿后備用。培養(yǎng)基:①PDA培養(yǎng)基。②豆芽汁培養(yǎng)基,黃豆芽100g煮汁,蔗糖50g,瓊脂20g,水1000mL。③葡萄糖硝酸鈉培養(yǎng)基,葡萄糖30g,硝酸鈉1.5g,硫酸鎂0.5g,磷酸氫二鉀1.0g,硫酸亞鐵0.01g,瓊脂20g,水1000mL。④完全培養(yǎng)基,蛋白胨2g,葡萄糖20g,磷酸二氫鉀0.46g,磷酸二氫鉀lg,硫酸鎂0.5 g,瓊 脂20g,水1000mL。⑤PDA 綜 合 培 養(yǎng) 基,PDAl000mL,尿素1g,三氯化鐵0.1g。⑥土壤浸液培養(yǎng)基,葡萄糖10g,磷酸二氫鉀1g,硫酸鎂1g,尿素1g,石膏l(xiāng)g,瓊脂20g,野生羊肚菌生長(zhǎng)處的土壤浸液1000mL。以上各種培養(yǎng)基經(jīng)1.2kg/cm230min滅菌后制成斜面種后置于15~25℃室溫培養(yǎng)。

        1.2 菌核培養(yǎng)

        菌種:粗腿羊肚菌(M.crassipes)。培養(yǎng)基:①麥粒;②麥粒,蔗糖1%,碳酸鈣1%;③棉子殼;④棉子殼,蔗糖1%,碳酸鈣l%;⑤棉子殼,混合泥漿,碳酸鈣1%,蔗糖l%;⑥麥粒復(fù)合培養(yǎng)基,麥粒浸漲煮熟,按一定比例加入蛋白胨、酵母膏、酪蛋白、微量元素液及混合泥漿(砂、土、腐殖質(zhì)、蒸餾水混合,使pH6.0~6.5,含水60%~65%)。方法:用1000mL廣口瓶作栽培容器,先將培養(yǎng)基拌勻裝入瓶?jī)?nèi)再將混合泥漿裝入,留適當(dāng)空間,用牛皮紙和聚丙烯膜封口,于1.5kg/cm2下滅菌2h,冷卻后接斜面種,室溫5~15℃、弱光下培養(yǎng),試驗(yàn)均設(shè)三個(gè)重復(fù)。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 菌絲生長(zhǎng)特征

        初分離的菌絲體為白色或灰白色,稀疏,緊貼培養(yǎng)基。5天左右顏色逐漸變深,其中4、6號(hào)培養(yǎng)基上的為淺黃褐色,3號(hào)培養(yǎng)基為黃褐色,5號(hào)培養(yǎng)基灰褐色,并產(chǎn)生大量水珠,1、2號(hào)培養(yǎng)基為紅褐色。7天左右可見(jiàn)管底散生1~3mm大小的菌核。6號(hào)培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)旺盛,可作為培養(yǎng)羊肚菌菌絲較好的培養(yǎng)基,1、2、4號(hào)培養(yǎng)基次之,3、5號(hào)培養(yǎng)基長(zhǎng)勢(shì)較差。

        羊肚菌菌絲有絲狀、絨毛狀和顆粒狀三種形態(tài)。生長(zhǎng)前端多為絲狀匍匐菌絲,后逐漸為絨毛狀的氣生菌絲,繼續(xù)培養(yǎng)則出現(xiàn)顆粒狀。鏡檢顆粒狀菌絲為高度扭曲的變態(tài)菌絲,這可能是菌絲對(duì)營(yíng)養(yǎng)衰竭或不良外界條件的應(yīng)變形態(tài)。

        三種羊肚菌中,以粗腿羊肚菌生長(zhǎng)較好,速度快,旺盛;其它兩種長(zhǎng)勢(shì)稍弱。在兩種分離方式中,以子實(shí)體分離物生長(zhǎng)較好,孢子分離物生長(zhǎng)較弱。三種羊肚菌均可產(chǎn)生菌核,菌核為淺黃褐至棕褐色;在菌絲滿管后,于管底散生,后逐漸聚集。不同的培養(yǎng)基菌核形成表現(xiàn)各異,以子實(shí)體分離物在6號(hào)培養(yǎng)基上產(chǎn)生菌核量多且個(gè)體較大,l、3、4、5號(hào)培養(yǎng)基上產(chǎn)生數(shù)量較少,2號(hào)培養(yǎng)基不產(chǎn)生菌核。孢子分離物則較復(fù)雜,尖頂羊肚菌在2號(hào)培養(yǎng)基上不產(chǎn)生菌核,粗腿羊肚菌僅在1、6號(hào)培養(yǎng)基上產(chǎn)生,而羊肚菌在2、6號(hào)培養(yǎng)基上不產(chǎn)生菌核。

        2.2 菌核培養(yǎng)特征

        不同培養(yǎng)基對(duì)菌絲生長(zhǎng)及菌核產(chǎn)生有明顯影響。1號(hào)培養(yǎng)基上無(wú)菌核形成;2號(hào)培養(yǎng)基菌核較小黃色,散生于瓶壁;3號(hào)培養(yǎng)基有個(gè)別褐紅菌核;4號(hào)培養(yǎng)基菌核褐紅,散生于培養(yǎng)基表面;5號(hào)培養(yǎng)基在土層有較大褐紅菌核,且有大量白色絨毛狀菌絲球;6號(hào)培養(yǎng)基在土層有大量成片菌核,黃褐色。

        從總體上來(lái)看,在6號(hào)培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)濃密、旺盛、潔白外,其余5種培養(yǎng)基上的菌絲生長(zhǎng)均稀疏。蔗糖、氯化鈣對(duì)菌核形成有促進(jìn)作用(2、4號(hào)培養(yǎng)基);而只有在加土的5、6號(hào)培養(yǎng)基中才能在土層的瓶壁上產(chǎn)生較大的菌核,說(shuō)明土壤的團(tuán)粒結(jié)構(gòu)及貧脊條件對(duì)產(chǎn)生大量菌核是必需的。

        3 討論

        3.1 在羊肚菌菌絲體培養(yǎng)中,以含野生羊肚菌生長(zhǎng)土壤浸出液6號(hào)培養(yǎng)基表現(xiàn)最好,因此進(jìn)一步研究這些土壤中的營(yíng)養(yǎng)成分對(duì)羊肚菌生長(zhǎng)的作用有一定意義。

        3.2 不同培養(yǎng)基或分離方式對(duì)菌核的產(chǎn)生影響不同,供試的三種羊肚菌均可產(chǎn)生菌核,這一點(diǎn)與T.N.Kaul報(bào)道的不一致。

        3.3 羊肚菌是食用菌中可產(chǎn)生菌核的少數(shù)種之一。Volk and Leonand對(duì)羊肚菌的生活史研究指出,菌核是羊肚菌子實(shí)體產(chǎn)生的重要階段,因此研究菌核形成與發(fā)育的生理生化特性,是進(jìn)行人工栽培的關(guān)鍵因素之一。

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