趙 潔，晉小軍*，張紅軍

(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，甘肅蘭州 730070，2.甘肅泰康制藥有限責(zé)任公司，甘肅武威 730020)

黃瑞香(Daphne giraldii Nitsche)瑞香科，瑞香屬植物。別名打結(jié)花、結(jié)香。分布于陜西、甘肅、四川、青海等省。黃瑞香以根皮和莖皮入藥，稱祖師麻，味辛、苦，性溫，有小毒，具有祛風(fēng)除濕、止痛散瘀的功效，主治風(fēng)濕痹痛、四肢麻木、頭痛和跌打損傷等癥。本文擬對黃瑞香的研究進(jìn)展做以綜述，并根據(jù)我們的研究進(jìn)行評價，為黃瑞香研究深入提供借鑒。

1 化學(xué)成分

從黃瑞香根皮和莖皮中分離出的化合物主要有香豆素類、黃酮類、木質(zhì)素類、萜類及其他類化合物。其中香豆素類被認(rèn)為黃瑞香有效成分的主要物質(zhì)。

1.1 香豆素類

從黃瑞香中分離出19種香豆素類成分，瑞香素被認(rèn)為是黃瑞香有效成分［1］。而其中的7－羥基香豆素有鎮(zhèn)痛作用;7－羥基－8－甲氧基香豆素和7，8－二甲氧基香豆素有抗炎和鎮(zhèn)靜催眠效果［15］。

19種香豆素類分別為:7－羥基－8－甲氧基香豆素、瑞香素(祖師麻甲素)、瑞香苷(祖師麻乙素)、7－甲氧基－8－羥基香豆素［2］、7，8－二甲氧基香豆素［14］、傘形花內(nèi)酯－7－O－β－D－葡萄糖苷、瑞香素－8－O－β－D－葡萄糖苷、雙白瑞香素［1］、4－甲基－7－羥基香豆素、5－羥基－7－甲氧基香豆素－8－O－β－D－葡萄糖苷、雙白瑞香素7－O－β－D－葡萄糖苷、Rutarensin、以C8'－C8方式連接的有結(jié)香苷C、黃瑞香苷A、以C5'－O－C8方式連接的有黃瑞香苷B和Daphgilin、以C6'－C8方式連接的有daphjamilin、以C3'－C8方式連接的有［6－O－β－D－芹菜糖－7－羥基－3－(7－甲氧基－2－羰基－2H－1－苯并吡喃－8)－2H－1－苯并吡喃－2酮和6－O－β－D－鼠李糖－7－羥基－3－(7－甲氧基－2－羰基－2H－1－苯并吡喃－8)－2H－1－苯并吡喃－2 酮［2］］。

1.2 黃酮類

現(xiàn)在從黃瑞香根莖中分離的黃酮類主要有9種，分別為芫花素、芫花素－5－O－β－D－葡萄糖苷、3'，4'－二羥基－7－甲氧基黃酮－5－O－β－D－葡萄糖苷、4'，5－二羥基－3'，7－甲氧基黃酮、5，4'－二羥基黃烷－3－醇－7－O－β－D－葡萄糖、sakuranin、3'，7－二甲氧基－木犀草素－5－O－β－D－葡萄糖苷、7－甲氧基－木犀草素－5－O－β－D－葡萄糖苷。

1.3 木質(zhì)素類

主要的木質(zhì)素類有(－)－松脂酚、(+)－丁香樹脂酚、(+)－里立脂素B二甲醚、(+)－丁香樹脂酚雙葡萄糖苷、羅漢松脂醇和WoonenosideⅪ［3］。

1.4 萜類化合物

萜類化合物有二萜類化合物和三萜類化合物，分別為:瑞香毒素［16］、12－羥基瑞香毒素、黃瑞香甲素、黃瑞香乙素、黃瑞香丙素、芫花素［2］、β－谷甾醇，胡蘿卜苷、齊墩果酸和白樺酸［13］。

1.5 其他類化合物

其他類化合物主要有:咖啡酸正十八碳、十八碳酸單甘油脂［14］、對羥基苯甲酸、2，4，6－ 三羥基苯甲酸乙脂、oleadaphnal、乙基－β－D－吡喃葡萄糖苷、芥子醛葡萄糖苷、紫丁香苷、芥子醇1，3＇－葡萄糖苷、丁香苷、1－(4－羥基－3，5－二甲氧基)－1，2－丙二酮、4－羥基－3，5－二甲氧基苯甲醛和α－D吡喃果糖［2］。

2 劑型研究

黃瑞香的根皮和莖皮稱為祖師麻，祖師麻的藥劑類型有3種，分別為黃瑞香注射液、祖師麻膏藥、祖師麻片。

2.1 黃瑞香注射液

黃瑞香注射液以瑞香科植物黃瑞香的根皮和莖皮用蒸餾法制成滅菌水溶液，為鎮(zhèn)痛劑，主要用于外傷疼痛、頭痛、牙痛、腹痛、風(fēng)濕疼痛等急性疼痛及各種慢性疼痛。尹海平對黃瑞香注射液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)利用薄層色譜法進(jìn)行研究分析。薄層色譜法中，確定氯仿為提取溶媒，用黃瑞香標(biāo)準(zhǔn)藥材配置對照溶液，在紫外光燈(365 nm)下檢視，供試品與對照品溶液在相同的位置上應(yīng)顯相同的藍(lán)色斑點［4］。張慧在黃瑞香注射劑制劑工藝的HPLC指紋圖譜的研究中提出注射液制備過程中pH的調(diào)節(jié)對注射液穩(wěn)定性有顯著影響。祖師麻甲素為祖師麻的主要有效成分，屬于香豆素類化合物，其內(nèi)酯環(huán)在堿性條件下易水解開環(huán)，但如果在堿性條件下長時間加熱，再經(jīng)酸化也不再發(fā)生內(nèi)酯環(huán)閉環(huán)反應(yīng)。而原工藝制備中，一次蒸餾液在二次蒸餾之前pH調(diào)至堿性后長時間加熱，促使工藝中祖師麻甲素的含量較低［5］。

2.2 祖師麻片

祖師麻片原收于《部頒標(biāo)準(zhǔn)》WS3－159(Z－53)－94(Z)，現(xiàn)已收載入《中國藥典》2010 版［6－7］，是由祖師麻浸膏粉經(jīng)加工制成的片劑，祛風(fēng)除濕，活血止痛，用于治療風(fēng)濕痹癥、關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。郗素娥等對祖師麻的穩(wěn)定性運用恒溫加速法進(jìn)行研究，結(jié)果表明祖師麻甲素隨溫度升高進(jìn)行降解，且有效期縮短，因此祖師麻片應(yīng)密閉、避光、放置在陰涼處貯藏［8］。

2.3 祖師麻膏藥

祖師麻膏藥為傳統(tǒng)的攤于布上的黑膏藥。具祛風(fēng)除濕、活血止痛的功能，用于風(fēng)寒濕痹、瘀血痹阻經(jīng)脈。癥見:肢體關(guān)節(jié)腫痛、畏寒肢冷，局部腫脹有硬結(jié)或瘀斑。經(jīng)蘭州醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院、甘肅省武威市中醫(yī)院等三家醫(yī)院623例臨床療效驗證。結(jié)果表明:祖師麻膏藥對祛風(fēng)除濕、活血止痛作用確切。對風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性 關(guān)節(jié)炎、中醫(yī)痹病寒濕阻絡(luò)癥、淤血阻絡(luò)癥療效較好，尤其對濕寒阻絡(luò)、淤血阻絡(luò)引起的肢體關(guān)節(jié)冷痛、沉重痛、關(guān)節(jié)發(fā)涼、腫脹、肌肉關(guān)節(jié)劇痛療效顯著。

3 組織培養(yǎng)

祖師麻為黃瑞香的根皮和莖皮，需要大量的采挖野生資源，由于黃瑞香生長地海拔高，生長緩慢，繁殖能力差，這給黃瑞香資源的可持續(xù)利用帶來了很大的威脅。因此，人們開始探索黃瑞香人工栽培技術(shù)，對黃瑞香進(jìn)行組織培養(yǎng)研究就是其中的一個熱點，20世紀(jì)80年代后，瑞香科的組織培養(yǎng)研究已經(jīng)開始，主要以莖尖、嫩葉、嫩莖作為外植體，以MS培養(yǎng)基加不同激素進(jìn)行組織培養(yǎng)。李銀等在黃瑞香愈傷組織培養(yǎng)及其二次代謝產(chǎn)物的研究中用黃瑞香的嫩葉和莖作為外植體進(jìn)行暗室培養(yǎng)，得出最佳培養(yǎng)條件為:MS8+1 mg/L 2，4－二氯苯氧乙酸 +0.1 mg/L激動素 +3%蔗糖 +0.9%瓊脂粉 +0.4%硝酸鉀;pH 5.8;培養(yǎng)溫度:(25±1)℃愈傷組織黃白色［9］。龐曉斌等在黃瑞香的組織培養(yǎng)和快速繁殖研究中，以黃瑞香幼嫩莖尖為外植體，采用植物組織培養(yǎng)和生物統(tǒng)計的方法研究黃瑞香的組織培養(yǎng)和快速繁殖技術(shù)。確定黃瑞香莖尖誘導(dǎo)愈傷組織的最佳培養(yǎng)培養(yǎng)基為 WPM+IBA 0.1 mg/L+KT 0.1 mg/L，莖尖誘導(dǎo)芽的適宜培養(yǎng)基為WPM+IBA 0.2 mg/L+6－BA 3 mg/L，幼芽形成根的適宜培養(yǎng)基為 1/2MS+IBA 3.0mg/L［10］。我們對黃瑞香組織培養(yǎng)也進(jìn)行了研究，研究初期我們采用了不加激素的4種培養(yǎng)基——WPM、MS、B5、GS誘導(dǎo)外植體萌動，發(fā)現(xiàn)MS培養(yǎng)基的萌動效果最好，但萌動比例偏低，僅能達(dá)到10% ～30%;在此基礎(chǔ)上，通過激素配比的正交試驗，選擇了10種含有不同激素及濃度的MS萌動培養(yǎng)基。經(jīng)實驗發(fā)現(xiàn)，在MS+0.5 mg/L BAP+0.05 mg/L NAA;MS+1.0 mg/L BAP+0.1 mg/L NAA;1/2MS+1.0 mg/L BAP+0.05 mg/L NAA 培養(yǎng)基中枝條的萌動效果佳，低激素水平下萌動枝生長較快，萌動芽數(shù)量多，而高激素水平下，盡管萌動芽也較多，但后期生長緩慢且易褐化死亡。該研究為黃瑞香組織培養(yǎng)和快速繁殖提供依據(jù)。

4 扦插育苗

黃瑞香目前處于野生狀態(tài)，而藥材的大量采挖造成自然生長壞境的破壞和野生黃瑞香生長面積的減少。扦插也是有效的繁殖手段，經(jīng)濟(jì)簡便，生產(chǎn)上廣泛使用［12］。呂鴻光等在黃瑞香扦插育苗的試驗中得出。插穗為15 cm長，扦插時間為5月中旬。用100 mg/kg濃度的GGR6號生根劑浸泡插穗6 h扦插，苗木生根率最高達(dá)81.3%，苗木當(dāng)年生長量也最高，平均苗高達(dá)13.93 cm，苗木整齊［11］。因生產(chǎn)對黃瑞香大量的需求，而扦插育苗在生產(chǎn)上廣泛使用，我們對黃瑞香進(jìn)行扦插試驗。發(fā)現(xiàn)處于海拔2530 m左右的黃瑞香，在5月中旬由頂芽形成葉片多數(shù)已展開，且已過盛花期，不適宜進(jìn)行扦插。所以應(yīng)在新生頂芽葉片展開以前進(jìn)行扦插。黃瑞香從頂芽展開葉片開始，葉片生長速度加快，枝條易枯萎，故而扦插時應(yīng)該進(jìn)行摘頂。這樣才能保證枝條不過快枯萎，保證存活、生根。另外扦插成活率低，不足5%，與呂鴻光研究得出的結(jié)論有較大的差異。

5 結(jié)語

黃瑞香主要含有香豆素類，黃酮類，木質(zhì)素類和萜類等化合物，其中瑞香素被公認(rèn)為黃瑞香的有效成分。化學(xué)成分的研究很多，大多數(shù)的研究主要是對黃瑞香成分的提取分離和鑒定;少數(shù)是對其成分的藥理的研究，以確定其中主要的藥效成分和分離技術(shù)對有效成分的影響。祖師麻的劑型主要有3種，而制劑學(xué)的研究以藥理研究為主，主要劑型也是傳統(tǒng)的黑膏藥，對藥劑學(xué)研究應(yīng)該進(jìn)行進(jìn)一步的研究。因祖師麻藥材為黃瑞香的根皮和莖皮，大量的采挖將使其不可持續(xù)。故進(jìn)行快速繁殖與人工栽培技術(shù)研究，對保護(hù)資源意義重大。在繁殖技術(shù)中，種子由于發(fā)育、成熟和休眠問題，目前出苗成活率在20%左右，且生長緩慢。通過組織培養(yǎng)，在現(xiàn)有的實驗室研究的基礎(chǔ)上，進(jìn)行煉苗移栽，建立人工繁殖栽培技術(shù)體系將是發(fā)展方向。扦插育苗是一種傳統(tǒng)的繁殖技術(shù)，但其經(jīng)濟(jì)簡便，在生產(chǎn)上有廣泛應(yīng)用的空間，應(yīng)在提高扦插成活率方面進(jìn)行深入的研究，目前已有的研究結(jié)果經(jīng)我們重復(fù)，還不可信。由于黃瑞香繁殖困難，對環(huán)境要求高，提高其繁殖成活率的研究將是黃瑞香人工馴化栽培領(lǐng)域的熱點。

［1］康阿龍，李偉，孫成榮，等.祖師麻的化學(xué)成分及制劑學(xué)研究進(jìn)展［J］.西北藥學(xué)雜志，2011，26(6):479－482.

［2］蘇娟.黃瑞香化學(xué)成分研究［D］.上海:第二軍醫(yī)大學(xué)，2007.

［3］劉文娟，王立波.祖師麻中的木質(zhì)素類成分［J］.中國藥物化學(xué)雜志，2010，20(4):303－306.

［4］尹海平，張中蘇.黃瑞香注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究［J］.中醫(yī)藥研究，1994(1):57－58

［5］張慧，王麗巖，李越峰.黃瑞香注射液制劑工藝HPLC指紋圖譜研究［J］.中醫(yī)藥信息，2011，28(4):46－48.

［6］國家藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn):第8冊［S］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社.1996:8.

［7］國家藥典委員會.中國藥典:一部.［S］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:971－972.

［8］郗素娥，洪艷榮，李以杰.祖師麻片穩(wěn)定性考察［J］.中藥新藥與臨床藥理，1995，6(1):57－58.

［9］李銀，王鳳林，李書慧等.黃瑞香愈傷組織培養(yǎng)及其二次代謝產(chǎn)物的研究［J］.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2008，31(3):199－200.

［10］龐曉斌，高雙成，謝欣梅.黃瑞香的組織培養(yǎng)和快速繁殖［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36(26):11226－11227，11229.

［11］呂鴻光，閆雙虎，劉成壽.黃瑞香扦插育苗試驗［J］.現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2008，3:21－22.

［12］郭巧生，郭玉海，梁宗鎖，等.藥用植物栽培學(xué)［M］.北京:高等教育出版社，2009:70－74.

［13］蘇娟，吳志軍，沈云亨，等.黃瑞香化學(xué)成分研究［J］.中草藥，2008，39(12):1781－1783.

［14］周光雄，王國平，楊永春，等.黃瑞香莖皮的化學(xué)成分研究［J］.中草藥，2007，38(3):327－329.

［15］李書慧.祖師麻化學(xué)成分及其原植物黃瑞香細(xì)胞培養(yǎng)研究［D］.沈陽:沈陽藥科大學(xué)，2005.

［16］周光雄，楊永春，石建攻.祖師麻化學(xué)活性成分研究［J］.中國中藥雜志，2006，31(7):555－556.