陳樹兵，諶江華，徐銀君，楊 亮，裘亞鈞，黃紹棠，俞雪鈞，彭錦峰

(1.浙江省寧波出入境檢驗(yàn)檢疫局，浙江 寧波 315012;2.寧波市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江 寧波 315000)

小松菜，是十字花科、蕓苔屬白菜亞種普通白菜的一個(gè)變種。原產(chǎn)中國，19世紀(jì)70年代傳入日本，20世紀(jì)90年代由日本客商引入推薦栽培和加工，由于種植時(shí)用種量少、成本低、生長期短、省工、產(chǎn)量高、效益可靠，葉色嫩綠，味美質(zhì)佳，產(chǎn)品大量出口日本，近年來已成為寧波地區(qū)出口日本的主要?jiǎng)?chuàng)匯蔬菜品種。

寧波地區(qū)很多出口小松菜種植基地在防治小松菜生長過程中經(jīng)常出現(xiàn)的霜霉病及主要的害蟲菜青蟲、蚜蟲等病蟲草害時(shí)，經(jīng)常使用苯醚甲環(huán)唑、氟蟲脲等農(nóng)藥。苯醚甲環(huán)唑是三唑類殺菌劑中安全性比較高的，廣泛應(yīng)用于果樹、蔬菜等作物，有效防治黑星病，黑痘病、白腐病、斑點(diǎn)落葉病、白粉病、褐斑病、銹病、條銹病、赤霉病等。氟蟲脲屬苯甲酰脲類殺蟲劑，是幾丁質(zhì)合成抑制劑，其殺蟲活性、殺蟲譜和作用速度均具特色，并有很好的葉面滯留性.尤其對未成熟階段的螨和害蟲有高的活性。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試作物小松菜，供試農(nóng)藥為10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑 (瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司)，5%氟蟲脲乳油 (德國巴斯夫公司)。苯醚甲環(huán)唑、氟蟲脲標(biāo)準(zhǔn)品均購自 Sigma公司 (純度大于99%)。

儀器有 Agilent 6890-5975型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，配備EI源;Thermofisher TSQ AM型液相色譜-串聯(lián)四級桿質(zhì)譜聯(lián)用儀，配備ESI源;Buchi R-215型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀;Mettler Toledo PL2002型天平;6 mL Envi Carb-NH2固相萃取柱。

試劑有乙腈，甲苯，正己烷，甲醇均為色譜純，去離子水，無水硫酸鈉為分析純 (使用前于550℃烘烤5 h，冷卻后保持干燥)。

1.2 處理設(shè)計(jì)

選擇寧波嘉誼食品公司的橫街基地進(jìn)行試驗(yàn)。選擇土地平整肥沃，土質(zhì)均一，各處理區(qū)種植品種、播種期、移栽期、種植密度、中耕除草、水肥及管理措施一致、試驗(yàn)前1周內(nèi)未噴過農(nóng)藥、菜苗長勢整齊的田塊進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)方法參照文獻(xiàn)［2］，設(shè)置空白對照處理 (清水處理)，每處理重復(fù)3次，面積為30 m2，小區(qū)間設(shè)0.5 m寬保護(hù)行。

1.3 取樣及樣品前處理

試驗(yàn)時(shí)，每個(gè)藥劑以藥劑登記時(shí)推薦濃度的2倍為試驗(yàn)濃度，采用葉面均勻噴霧的方法施藥，以噴施清水為對照。

試驗(yàn)的取樣根據(jù)國家殘留試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定進(jìn)行，時(shí)間為:藥前基數(shù)，藥后2 h，1 d，3 d，7 d，10 d，14 d，17 d。取樣采用5點(diǎn)取樣法，小松菜1 kg(不少于12個(gè)個(gè)體)，制樣待測。

1.3.1 苯醚甲環(huán)唑樣品

稱取小松菜樣品10.0 g，置于50 mL離心管中，加入20 mL乙腈，勻漿提取2 min后加5 g無水硫酸鈉，渦旋振蕩1 min后，于3 000 r·min-1離心5 min，取10 mL上層提取液，于40℃水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至約1 mL待凈化。

2018年3月31日調(diào)查發(fā)現(xiàn)，小麥播后7 d 47% 異隆·丙·氯吡可濕性粉劑 3 000 g/hm2處理，小麥的株高、莖蘗數(shù)均顯著高于空白對照，而與人工除草相比無顯著差異(表5)；在小麥3葉1心時(shí)，47%異隆·丙·氯吡可濕性粉劑與3%甲基二磺隆油懸浮劑或15%炔草酯可濕性粉劑混用，小麥的株高、莖蘗數(shù)均顯著高于空白對照，與人工除草相比無顯著差異(表5)。

在Envi Carb-NH2柱上加入約2 cm高無水硫酸鈉，用4 mL乙腈+甲苯 (3+1)預(yù)洗，當(dāng)液面到達(dá)無水硫酸鈉頂部時(shí)，迅速將樣品濃縮液轉(zhuǎn)移至柱上，再用2 mL乙腈+甲苯 (3+1)3次洗滌樣液瓶，并將洗滌液移入柱中。用25 mL乙腈 +甲苯(3+1)洗滌串聯(lián)柱，收集所有流出物與雞心瓶中，于40℃水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干。用1 mL正己烷定容后待氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用儀分析。

1.3.2 氟蟲脲樣品

稱取小松菜樣品10.0 g，置于50 mL離心管中，加入20 mL乙腈，勻漿提取2 min后加5 g無水硫酸鈉，渦旋振蕩1 min后，于3 000 r·min-1離心5 min。

在Envi Carb-NH2柱上加入約2 cm高無水硫酸鈉，用4 mL乙腈+甲苯 (3+1)預(yù)洗，當(dāng)液面到達(dá)無水硫酸鈉頂部時(shí)，迅速將1 mL樣品提取液轉(zhuǎn)移至柱上，再用2 mL乙腈+甲苯 (3+1)3次洗滌樣液瓶，并將洗滌液移入柱中。用25 mL乙腈+甲苯 (3+1)洗滌串聯(lián)柱，收集所有流出物與雞心瓶中，于40℃水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干。用1 mL甲醇+水 (1+1)定容后待液相色譜—串聯(lián)四級桿質(zhì)譜聯(lián)用儀分析。

1.4 儀器分析條件

1.4.1 氣相色譜-質(zhì)譜條件

色譜柱:HP-5MS(30 m×0.25 mm，0.25 μm);程序升溫;進(jìn)樣口溫度:250℃;進(jìn)樣量:1μL;不分流進(jìn)樣;接口溫度:280℃;監(jiān)測離子(m/z):323，325，265。

1.4.2 液相色譜-串聯(lián)四級桿質(zhì)譜條件

色譜柱:Atlantis Cl8， (100 mm×2.1 mm，3 μm);柱溫:30℃;進(jìn)樣量:10μL;流動(dòng)相:2 mmol·L-1乙酸銨、甲醇，梯度淋洗;掃描方式:正、負(fù)離子同時(shí)掃描;電噴霧電壓:2 500 V;鞘氣壓力:35 psi;輔助加熱氣壓力:6 psi;離子傳輸管溫度:350℃;噴霧溫度:400℃;監(jiān)測離子 (m/z):氟蟲脲311→141，311→158(負(fù)離子模式)。

2 結(jié)果與分析

2.1 分析方法的線性關(guān)系、檢出限、回收率及精密度

本試驗(yàn)樣品的前處理及儀器分析方法參考了GB/T 19648—2006水果和蔬菜中500種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定氣相色譜-質(zhì)譜法［3］及GB/T 20769—2008水果和蔬菜中405種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法［4］。用濃度為0，0.05，0.1，0.2，0.5 mg·L-1的苯醚甲環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)溶液按上述檢測條件進(jìn)樣測定，以峰面積對進(jìn)樣濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，相關(guān)系數(shù)為0.998;用濃度為0，0.02，0.05，0.1，0.2 mg·L-1氟蟲脲標(biāo)準(zhǔn)溶液按上述檢測條件進(jìn)樣測定，以峰面積對進(jìn)樣濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，相關(guān)系數(shù)分別為0.994。苯醚甲環(huán)唑、氟蟲脲的方法檢出限分別為0.010，0.005 mg·kg-1。

苯醚甲環(huán)唑、氟蟲脲添加濃度為0.01，0.02，0.05 mg·kg-1時(shí)，添加回收率范圍為87.3% ～107.4%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于9.4%，說明本方法具有良好的精密度，符合農(nóng)藥殘留分析的要求。

2.2 苯醚甲環(huán)唑和氟蟲脲在小松菜中的消解動(dòng)態(tài)

苯醚甲環(huán)唑和氟蟲脲在小松菜中的降解計(jì)算采用一級動(dòng)力學(xué)方程 (Ct=C0e-kt)［5］，式中 Ct為處理t d后各農(nóng)藥在小松菜中的濃度，C0為起始濃度，k為一級動(dòng)力學(xué)方程降解常數(shù)，半衰期 (t0.5)=ln2/k。

施藥當(dāng)天苯醚甲環(huán)唑、氟蟲脲在小松菜上的原始沉積量為7.309，10.954 mg·kg-1。在寧波的自然條件下，苯醚甲環(huán)唑1 d后降解就達(dá)到50%以上，7 d降解率為92.9%;氟蟲脲1 d后降解率為39.6%，7 d降解率為84.2%。

對消解動(dòng)態(tài)數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸處理，消解動(dòng)態(tài)曲線符合一級動(dòng)力學(xué)方程，降解動(dòng)態(tài)見圖1，在本試驗(yàn)施藥量下苯醚甲環(huán)唑、氟蟲脲在小松菜上的殘留動(dòng)態(tài)方程及半衰期見表1，苯醚甲環(huán)唑和氟蟲脲在小松菜消解半衰期分別為2.41和2.42 d。日本《肯定列表》中規(guī)定了小松菜中苯醚甲環(huán)唑、氟蟲脲的限量分別為0.20，0.02 mg·kg-1，如果參照本試驗(yàn)采用的施藥濃度，根據(jù)本試驗(yàn)中得到的2種農(nóng)藥的動(dòng)力學(xué)方程，則可推算出苯醚甲環(huán)唑、氟蟲脲中在小松菜上的安全間隔期分別為9.43和21.45 d。

圖1 苯醚甲環(huán)唑、氟蟲脲在小松菜中的消解動(dòng)態(tài)

表1 苯醚甲環(huán)唑、氟蟲脲在小松菜中的消解動(dòng)力方程及半衰期

3 小結(jié)

苯醚甲環(huán)唑、氟蟲脲在小松菜上的消解符合一級動(dòng)力學(xué)方程，消解半衰期分別為2.41和2.42 d。如果參照本試驗(yàn)采用的施藥濃度，根據(jù)日本《肯定列表》中規(guī)定的小松菜中苯醚甲環(huán)唑、氟蟲脲的限量，2種農(nóng)藥在小松菜上的安全間隔期分別為9.43和21.45 d，說明在本試驗(yàn)的自然環(huán)境下這3種農(nóng)藥均為易消解農(nóng)藥，在環(huán)境中的殘留時(shí)間較短，使用后對生態(tài)環(huán)境的危害較小，為寧波地區(qū)出口小松菜種植過程中科學(xué)用藥及制定苯醚甲環(huán)唑、氟蟲脲在小松菜上的安全使用標(biāo)準(zhǔn)提供了科學(xué)的數(shù)據(jù)。

［1］ 孫彩霞，徐俊鋒，董國堃.中國24種出口蔬菜農(nóng)殘超標(biāo)研究 ［J］.中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2009，25(8):262-265.

［2］ 榮廷昭，李晚忱.田間試驗(yàn)與統(tǒng)計(jì)分析 ［M］.成都:四川大學(xué)出版社，2001.

［3］ GB/T 19648—2006水果蔬菜中500種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定 氣相色譜:質(zhì)譜法 ［S］.北京:中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，2006.

［4］ GB/T 20769—2008水果蔬菜中405中農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定 液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜法 ［S］.北京:中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，2008.

［5］ 向鋒.一級動(dòng)力學(xué)反應(yīng)方程參數(shù)估計(jì)中若干問題的討論［J］.農(nóng)村生態(tài)環(huán)境，1998，14(3):20-25.