呂偉德 周丹 朱巖，3

（1杭州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，杭州 310018；2桂林理工大學(xué)化學(xué)與生物工程學(xué)院，廣西桂林 541004；3浙江大學(xué)化學(xué)系，杭州 310028）

離子色譜法測定復(fù)方卡托普利片中卡托普利和氫氯噻嗪的含量

呂偉德1周丹2朱巖2，3

（1杭州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，杭州 310018；2桂林理工大學(xué)化學(xué)與生物工程學(xué)院，廣西桂林 541004；3浙江大學(xué)化學(xué)系，杭州 310028）

建立離子色譜法測定復(fù)方卡托普利片中卡托普利和氫氯噻嗪含量的方法。在色譜柱為IonPac SCS1（4mm×250mm），保護柱為IonPac SCG1（4mm×50mm），淋洗液為甲烷磺酸（4mmol／L）＋乙腈（26%），流速1.0mL／min，柱溫35℃，進樣量7μL，紫外檢測波長215nm的條件下，測定結(jié)果表明，卡托普利和氫氯噻嗪在0.5～25μg／mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r分別為0.9997、0.9999，回收率分別為98.11%、94.24%。方法操作簡單，靈敏度高、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可用于復(fù)方卡托普利片的質(zhì)量控制。

離子色譜法；復(fù)方卡托普利片；卡托普利；氫氯噻嗪

1 前言

復(fù)方卡托普利片是一種常用的抗高血壓藥物，由卡托普利和氫氯噻嗪兩種有效成分組成。中國藥典對該藥中兩種有效成分含量的測定采用的是高效液相紫外分光光度法［1］。國內(nèi)大多數(shù)報道都是采用反相高效液相色譜法，以甲醇－水－緩沖溶液、甲醇－四氫呋喃－水為流動相檢測卡托普利和氫氯噻嗪的含量［2－4］。近年來，隨著離子色譜技術(shù)的發(fā)展，離子色譜在藥物分析中應(yīng)用越來越廣泛，特別是在藥物及合成中間體的分析、復(fù)雜組分中的某一組分鑒定、藥物離子的價態(tài)及形態(tài)分析等方面都起了很大的作用［5］。建立了一種離子色譜檢測復(fù)方卡托普利片中卡托普利和氫氯噻嗪含量的新方法，方法簡單、準(zhǔn)確、分析時間更短、檢出限更低。目前尚未見文獻報道。

2 實驗部分

2.1 儀器及試劑

ICS－2100型離子色譜儀（美國戴安）、VWD紫外檢測器（美國戴安）、KQ－100DE型數(shù)控超聲儀、Millipore simplicity超純水機。

對照品卡托普利和氫氯噻嗪均由中國藥品生物制品檢定所提供；復(fù)方卡托普利片為市售藥。

甲烷磺酸（分析純），乙腈（色譜純），實驗用水為高純水（電阻率≥18.2MΩ·cm）。

2.2 色譜條件

色譜柱為IonPac SCS1（4mm×250mm），保護柱為IonPacSCG1（4mm×50mm），淋洗液為甲烷磺酸（4mmol／L）＋乙腈（26%），流速1.0mL／min，柱溫35℃，進樣量7μL，紫外檢測波長215nm。按上述條件獲得的混合對照品（A）和樣品（B）的色譜圖見圖1。

圖1 對照品A和樣品B色譜圖Figure 1.IC chromatograms of chemical reference substances（A）and sample（B）.

2.3 溶液的制備

對照品儲備溶液（1 000mg／L）：分別準(zhǔn)確稱取0.010g（精確至0.0001g）干燥至恒重的卡托普利和氫氯噻嗪對照品，置于10mL容量瓶中，5mL乙腈超聲溶解并用超純水稀釋至刻度，搖勻，置于4℃冰箱內(nèi)保存；

供試品溶液：取復(fù)方卡托普利片10片，研成粉末，稱取粉末適量（約相當(dāng)于卡托普利10mg，氫氯噻嗪6mg），置于100mL容量瓶中，加10mL乙腈溶解，超聲15min提取，冷卻至室溫，超純水定容至刻度，搖勻，取1mL置50mL容量瓶中，超純水定容至刻度，搖勻。

2.4 測定方法

對照品和供試品經(jīng)過0.45μm有機濾膜過濾后進樣，進樣量7μL。

3 結(jié)果與討論

3.1 線性關(guān)系

準(zhǔn)確量取對照品儲備液配成濃度分別為0.5、1、2、5、25μg／mL，按上述色譜條件測定峰面積，以峰面積為縱坐標(biāo)（Y），濃度為橫坐標(biāo)（X）作標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程為：

卡托普利：Y＝0.2713X－0.0428，r＝0.9997；

氫氯噻嗪：Y＝1.2883X－0.0584，r＝0.9999；實驗表明：卡托普利和氫氯噻嗪在0.5～25μg／mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

3.2 精密度實驗

取濃度為2μg／mL的對照品溶液連續(xù)進樣5次，記錄色譜圖，測得卡托普利、氫氯噻嗪峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）分別為1.03%和0.86%，方法的穩(wěn)定性符合技術(shù)要求。

3.3 穩(wěn)定性實驗

按上述色譜條件在0、1、2、3、6、8、12、18、24h測定，測得卡托普利和氫氯噻嗪含量的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）值分別為2.53%、2.12%，結(jié)果表明：供試品溶液在配制24h內(nèi)穩(wěn)定。

3.4 加標(biāo)回收率實驗

采取加標(biāo)回收實驗法，按供試品配制方法在其中加入適量對照品配制成低、中、高3個不同的濃度點，以外標(biāo)法計算回收率，結(jié)果見表1，卡托普利和氫氯噻嗪的平均回收率分別為98.11%、94.24%，說明方法有較好的準(zhǔn)確度。

表1 復(fù)方卡托普利片的回收率（n＝3）Table 1 The methodological recovery of the compound captopril tablets

3.5 樣品測定

按照2.3制備樣品溶液，在2.2色譜條件下測定，由峰面積值根據(jù)線性回歸方程計算含量（見表2），測量結(jié)果符合中國藥典中此藥物有效成分含量的要求，所測藥品合格。

表2 復(fù)方卡托普利片含量測定結(jié)果（n＝5）Table 2 The determination results of the compound captopril tablets ／%

4 結(jié)語

卡托普利和氫氯噻嗪都是有機胺類化合物，基于其在酸性條件下以有機陽離子的形式存在，可以采用陽離子交換柱分離檢測。首次采用離子色譜法測定了復(fù)方卡托普利片中卡托普利和氫氯噻嗪的含量，方法簡單，快速，結(jié)果準(zhǔn)確。若血漿或尿液經(jīng)過合適的前處理后，也可用離子色譜法進行藥物代謝動力學(xué)的研究，有利于進一步控制并提高藥品質(zhì)量。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：578.

［2］鄔方寧，劉樹春.HPLC法測定復(fù)方卡托普利片的含量［J］.天津藥學(xué)，1997，9（2）：64－66.

［3］胡海廷，陳權(quán)，劉建華.HPLC法測定復(fù)方卡托普利片中兩種成分的含量［J］.洛陽師范學(xué)院學(xué)報，2009，28（5）：64－66.

［4］Ivanovic D，Medenica M，Malenovic A，et al.Validation of the RP－HPLC method for analysis of hydrochloro－thiazide and captopril in tablets［J］.PRACTITIONER’S REPORT，2004（9）：76－81.

［5］張培敏，周淡春，朱巖.離子色譜在制藥分析中的新進展［J］.藥物分析雜志，2007，27（1）：151－155.

Determination of Contents of Captopril and Hydrochlorothiazide in Compound Captopril Tablets by Ion Chromatography

LV Weide1，ZHOU Dan2，ZHU Yan2，3
（1.HangzhouVocationalandTechnicalCollege，Hangzhou310018，China；2.CollegeofChemistryandBiologyEngineering，GuilinUniversityofTechnology，Guilin，Guangxi541004，China；3.DepartmentofChemistry，ZhejiangUniversity，Hangzhou310028，China）

An analytical method for quantitative determination of captopril and hydrochlorothiazide in compound captopril tablets by ion chromatography（IC）was established.The method was performed on IonPac SCS1（4mm×250mm）chromatographic column and IonPac SCG1（4mm×50mm）guard column.The chromatographic conditions were：the mixture of 4mmol／Lmethanesulfonic acid solution and 26%acetonitrile was used as the mobile phase；the flow rate was 1mL／min，the column temperature was 35℃；the injection volume was 7μL，and the detection wavelength was 215nm.The results showed that the calibration curves of captopril and hydrochlorothiazide had good linearity in the range of 0.5～25μg／mLwith the correlation coefficient of 0.9997and 0.9999，respectively.The average recovery for captopril and hydrochlorothiazide was 98.11%and 94.24%，respectively.The method was proved to be simple，sensitive，accurate，and reliable for evaluating the quality of compound captopril tablets.

ion chromatography；compound captopril tablets；captopril；hydrochloro－thiazide

呂偉德，男，副教授，主要從事植物栽培及生物理化分析研究。E－mail：lwd2007＠163.com

O657.7＋5；TH833

A

2095－1035（2012）03－0073－03

10.3969／j.issn.2095－1035.2012.03.023

2012－07－06

2012－07－31

浙江省自然科學(xué)基金一般項目（Y2110945）；浙江省科技項目分析測試項目（2011C37065）。