鄧桂秀，姜燕琴，宋鵬飛，於 虹

〔江蘇省·中國科學(xué)院植物研究所(南京中山植物園)，江蘇 南京 210014〕

在藍(lán)漿果的離體培養(yǎng)中，氮素作為培養(yǎng)基的主要成分之一，其配比對增殖具有一定的影響。趙爽［9］認(rèn)為：將WPM培養(yǎng)基中n(－N)∶n(－N)調(diào)整為5∶5和7∶3，叢生枝葉片的葉綠素含量、可溶性蛋白質(zhì)含量和可溶性糖含量較高。因而，作者以適宜于藍(lán)漿果培養(yǎng)的改良WPM(MWPM)為基本培養(yǎng)基［9－14］，在總氮濃度不變的前提下，比較了不同的－N和－N比例對南方高叢藍(lán)漿果品種‘南月’(‘Southmoon’)優(yōu)選系A(chǔ)47、A119和A167叢生枝增殖和生長的影響，為其快繁提供技術(shù)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

供試材料為擴(kuò)繁若干代的南方高叢藍(lán)漿果品種‘南月’優(yōu)選系A(chǔ)47、A119和A167的無菌組培苗。

1.2 方法

實驗共設(shè)置7個處理組：T1、T2、T3、T4、T5、T6和T7，以MWPM為基本培養(yǎng)基［15］，其中T1的n(NH4+－N)∶n(－N)=4∶10，以此為對照(CK)，在總氮濃度(494.18 mmol·L－1)不變的情況下，將MWPM培養(yǎng)基中n(－N)∶n(－N)分別設(shè)置為5∶10 (T2)、6∶10(T3)、7∶10(T4)、8∶10(T5)、9∶10(T6)和10∶10(T7)；培養(yǎng)基中均含20 g·L－1蔗糖、7 g·L－1瓊脂和2 mg·L－1ZT，pH 5.0［16］。每瓶接種無菌枝5個，每處理3瓶，重復(fù)3次。置于溫度(25±2)℃、光照度1 800～2 000 lx、光照時間16 h·d－1的培養(yǎng)室內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。

接種5周后，參照文獻(xiàn)［16］的方法統(tǒng)計每個無菌枝的總增殖倍數(shù)和有效增殖倍數(shù)，并測量和計算每瓶叢生枝的鮮質(zhì)量、干質(zhì)量、含水量、總長度和單株的平均長度；參照文獻(xiàn)［17］的方法測定葉片的葉綠素含量。各指標(biāo)的測定結(jié)果均為3次重復(fù)的平均值。

1.3 數(shù)據(jù)整理和統(tǒng)計分析

采用Excel 2003軟件對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行基本整理，采用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析和Duncan’s多重比較。

2 結(jié)果和分析

2.1 銨態(tài)氮(NH4+－N)與硝態(tài)氮(－N)比例對叢生枝增殖倍數(shù)的影響

表1 銨態(tài)氮( －N )與硝態(tài)氮( 1－N )比例對南方高叢藍(lán)漿果品種‘南月’優(yōu)選系叢生枝增殖的影響1）T able1 Table 1 Effect of proportion of ammonium nitrogen ( -N) tonitrate nitrogen (-N) on clumpy shoot proliferation of superior strains of southern highbush blueberry ( Vaccinium corymbosumhybrids) cultivar‘Southmoon’1)

表1 銨態(tài)氮( －N )與硝態(tài)氮( 1－N )比例對南方高叢藍(lán)漿果品種‘南月’優(yōu)選系叢生枝增殖的影響1）T able1 Table 1 Effect of proportion of ammonium nitrogen ( -N) tonitrate nitrogen (-N) on clumpy shoot proliferation of superior strains of southern highbush blueberry ( Vaccinium corymbosumhybrids) cultivar‘Southmoon’1)

1)同列中不同的小寫字母表示差異顯著(P＜0.05)Different small letters in the same column indicate the significant difference(P＜0.05).2)T1(CK)：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=4∶10；T2：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=5∶10；T3：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=6∶10；T4： n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=7∶10；T5：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)= 8∶10；T6：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=9∶10；T7：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=10∶10.

處理2) Treatment2)總增殖倍數(shù)Total proliferation times A47 A119 A167有效增殖倍數(shù)Effective proliferation times A47 A119 A167 T1(CK)3.71c 4.31abc 3.33abc 2.80bc 3.66ab 1.83ab T2 6.00ab 4.62ab 3.80a 4.77ab 3.82a 1.43b T3 4.00bc 3.40cd 2.69c 3.42bc 3.09b 1.74b T4 7.83a 4.83a 3.50ab 5.50a 3.30ab 1.73b T5 2.63c 3.93bc 2.77bc 1.77c 3.27ab 1.80ab T6 4.17bc 2.75d 3.38abc 3.10bc 2.45c 2.28a T7 4.42bc 3.78bc 3.47ab 3.22bc 3.42ab 1.87ab

2.2 銨態(tài)氮(－N)與硝態(tài)氮(－N)比例對叢生枝質(zhì)量和含水量的影響

相關(guān)性分析結(jié)果表明：叢生枝的鮮質(zhì)量和干質(zhì)量與總增殖倍數(shù)、有效增殖倍數(shù)均呈極顯著正相關(guān)(P＜0.01)，相關(guān)系數(shù)分別為0.653和0.558、0.454和0.432。表明叢生枝的質(zhì)量大，總增殖倍數(shù)及有效增殖倍數(shù)也相應(yīng)較高。

表2 銨態(tài)氮(－N)與硝態(tài)氮(－N)比例對南方高叢藍(lán)漿果品種‘南月’優(yōu)選系叢生枝質(zhì)量和含水量的影響1)Table 2 Effect of proportion of ammonium nitrogen(-N)to nitrate nitrogen(-N)on weight and water content of clumpy shoot of superior strains of southern highbush blueberry(Vaccinium corymbosum hybrids)cultivar‘Southmoon’1)

表2 銨態(tài)氮(－N)與硝態(tài)氮(－N)比例對南方高叢藍(lán)漿果品種‘南月’優(yōu)選系叢生枝質(zhì)量和含水量的影響1)Table 2 Effect of proportion of ammonium nitrogen(-N)to nitrate nitrogen(-N)on weight and water content of clumpy shoot of superior strains of southern highbush blueberry(Vaccinium corymbosum hybrids)cultivar‘Southmoon’1)

處理2) Treatment2)鮮質(zhì)量/g Fresh weight A47 A119 A167干質(zhì)量/g Dry weight A47 A119 A167含水量/％ Water content A47 A119 A167 T1(CK）0.081c 0.120a 0.085ab 0.019bc 0.023a 0.020a 75.38a 81.24a 76.02cd T2 0.122ab 0.124a 0.080ab 0.023ab 0.023a 0.017b 80.61a 80.85a 78.95abc T3 0.102bc 0.124a 0.082ab 0.021bc 0.025a 0.020a 77.99a 79.36a 75.81d T4 0.140a 0.121a 0.075b 0.028a 0.025a 0.016c 79.86a 79.50a 77.96abcd T5 0.078c 0.101b 0.066b 0.017c 0.021b 0.016c 78.73a 78.97a 76.42bcd T6 0.089c 0.125a 0.088ab 0.019bc 0.025a 0.018ab 77.80a 79.74a 79.03ab T7 0.090c 0.111b 0.090a 0.019bc 0.022b 0.018a b 78.71a 79.56a 79.64a 1)同列中不同的小寫字母表示差異顯著(P＜0.05)Different small letters in the same column indicate the significant difference(P＜0.05).2)T1(CK)：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=4∶10；T2：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=5∶10；T3：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=6∶10；T4：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=7∶10；T5：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=8∶10；T6：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=9∶10；T7：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=10∶10.

相關(guān)性分析結(jié)果表明：叢生枝的含水量與總增殖倍數(shù)呈極顯著正相關(guān)(P＜0.01)，相關(guān)系數(shù)為0.467；叢生枝的含水量與有效增殖倍數(shù)呈顯著正相關(guān)。表明叢生枝的含水量高，總增殖倍數(shù)及有效增殖倍數(shù)也相對較高。

2.3 銨態(tài)氮(－N)與硝態(tài)氮(－N)比例對叢生枝長度的影響

表3 銨態(tài)氮(－N)與硝態(tài)氮(－N)比例對南方高叢藍(lán)漿果品種‘南月’優(yōu)選系叢生枝長度的影響1)Table 3 Effect of proportion of ammonium nitrogen(-N)to nitrate nitrogen(-N)on clumpy shoot length of superior strains of southern highbush blueberry(Vaccinium corymbosum hybrids) cultivar‘Southmoon’1)

表3 銨態(tài)氮(－N)與硝態(tài)氮(－N)比例對南方高叢藍(lán)漿果品種‘南月’優(yōu)選系叢生枝長度的影響1)Table 3 Effect of proportion of ammonium nitrogen(-N)to nitrate nitrogen(-N)on clumpy shoot length of superior strains of southern highbush blueberry(Vaccinium corymbosum hybrids) cultivar‘Southmoon’1)

處理2) Treatment2)總長度/cm Total length A47 A119 A167平均長度/cm Average length A47 A119 A167 T1(CK)28.14cd 35.69b 22.27ab 1.54b 1.66c 1.31bc T2 42.11b 38.24ab 22.20ab 1.43b 1.72c 1.16c T3 37.71bc 33.34b 20.06ab 1.88a 2.01ab 1.50a T4 53.10a 42.62a 21.92ab 1.62ab 2.11ab 1.29bc T5 20.36d 43.28a 19.50b 1.68ab 2.31a 1.41ab T6 35.43bc 32.86b 23.31a 1.68ab 2.43a 1.39ab T7 31.84c 33.81b 22.07ab 1.47b 1.79bc 1.28bc 1)同列中不同的小寫字母表示差異顯著(P＜0.05)Different small letters in the same column indicate the significant difference(P＜0.05).2)T1(CK)：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=4∶10；T2：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=5∶10；T3：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=6∶10；T4： n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=7∶10；T5：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)= 8∶10；T6：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=9∶10；T7：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=10∶10.

相關(guān)性分析結(jié)果表明：南方高叢藍(lán)漿果優(yōu)選系叢生枝的總長度與總增殖倍數(shù)、有效增殖倍數(shù)、鮮質(zhì)量、干質(zhì)量、含水量的相關(guān)性均達(dá)到極顯著水平(P＜0.01)，相關(guān)系數(shù)均在0.7以上；叢生枝的平均長度與總增殖倍數(shù)和總長度的相關(guān)性也達(dá)到極顯著水平，相關(guān)系數(shù)分別為－0.342和0.471。形成這一結(jié)果的原因為：叢生枝的總長度與其他指標(biāo)一樣，反映了叢生枝整體生長狀況，因此彼此間變化趨勢相一致；而平均長度顯示的是單株叢生枝的平均長度，在總長度相近的情況下，當(dāng)總增殖倍數(shù)高時，叢生枝的平均長度減小。

2.4 銨態(tài)氮(－N)與硝態(tài)氮(－N)比例對叢生枝葉片葉綠素含量的影響

表4 銨態(tài)氮(－N)與硝態(tài)氮(－N)比例1對南方高叢藍(lán)漿果品種‘南月’優(yōu)選系叢生枝葉片葉綠素含量的影響)T ni at b ra le te 4 nitEro fgf ee cnt ( of prop -oNr t) ion on of ch almo r m op ohnyi u ll m co nni tt re on gt einn ( clumpy -N s ) ho to ot leaf of superior strains of southern highbush blueberry(Vaccinium corymbosum hybrids)cultivar‘Southmoon’1)

表4 銨態(tài)氮(－N)與硝態(tài)氮(－N)比例1對南方高叢藍(lán)漿果品種‘南月’優(yōu)選系叢生枝葉片葉綠素含量的影響)T ni at b ra le te 4 nitEro fgf ee cnt ( of prop -oNr t) ion on of ch almo r m op ohnyi u ll m co nni tt re on gt einn ( clumpy -N s ) ho to ot leaf of superior strains of southern highbush blueberry(Vaccinium corymbosum hybrids)cultivar‘Southmoon’1)

處理2) Treatment2)葉綠素a含量/mg·g－1 Chl a content A47 A119 A167葉綠素b含量/mg·g－1 Chl b content A47 A119 A167 T1(CK)1.38bc 1.31ab 1.16b 0.93bc 0.88b 0.82b T2 1.55ab 1.28b 1.14b 1.03ab 0.76c 0.61d T3 1.25cd 1.33a 1.32b 0.82c 0.93a 0.76c T4 1.59ab 1.33a 1.71a 1.04ab 0.91a 1.05a T5 1.07d 1.05c 0.81c 0.75d 0.70c 0.51d T6 1.70a 1.35a 1.13b 1.13a 0.96a 0.92ab T7 1.41abc 1.30ab 0.81c 0.91bc 0.84b 0.63d 1)同列中不同的小寫字母表示差異顯著(P＜0.05)Different small letters in the same column indicate the significant difference(P＜0.05).2)T1(CK)：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=4∶10；T2：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=5∶10；T3：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=6∶10；T4： n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=7∶10；T5：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)= 8∶10；T6：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=9∶10；T7：n(NH4+－N)∶n(NO3－－N)=10∶10.

3 討論和結(jié)論

張彥東等［1］認(rèn)為：在喜銨態(tài)氮(－N)的樹種體內(nèi)，能將硝態(tài)氮(－N)還原轉(zhuǎn)化為蛋白質(zhì)的硝酸還原酶活性較低，而能將游離－N轉(zhuǎn)化成谷氨酸的谷酰胺合成酶、谷氨酸合成酶及谷氨酸脫氫酶活性較高。相關(guān)研究結(jié)果表明［18］：矮叢藍(lán)漿果(V.angustifolium Aiton)體內(nèi)硝酸還原酶活性較低，限制了植株對－N的轉(zhuǎn)化吸收，從而使其表現(xiàn)出對－N的偏好。對高叢藍(lán)漿果的研究也得出了類似的結(jié)果［8－9］：當(dāng)－N與－N的比值較高時，高叢藍(lán)漿果品種‘藍(lán)豐’的延長枝凈生長量較大、植株長勢較好；在組培過程中則表現(xiàn)為叢生枝的凈生長量較大、葉綠素含量較高。

［1］張彥東，白尚斌.氮素形態(tài)對樹木養(yǎng)分吸收和生長的影響［J］.應(yīng)用生態(tài)學(xué)報，2003，14(11)：2044－2048.

［2］張彥東，范志強(qiáng)，王慶成，等.不同形態(tài)N素對水曲柳幼苗生長的影響［J］.應(yīng)用生態(tài)學(xué)報，2000，11(5)：665－667.

［3］Merhaut D J，Darnell R L.Ammonium and nitrate accumulation in containerized southern highbush blueberry plants［J］.HortScience，1995，30：1378－1381.

［4］Merhaut D J，Darnell R L.Ammonium and nitrate uptake in containerized southern highbush blueberries［J］.HortScience，1991，26：682－686.

［5］Merhaut D J，Darnell R L.Effects of nitrogen form on vegetative growth，photosynthesis，and effluent pH in‘Climax’ and‘Sharpblue’blueberries［J］.HortScience，1993，28：572－576.

［6］於 虹，王傳永，吳文龍.藍(lán)漿果栽培與采后處理技術(shù)［M］.北京：金盾出版社，2003：70.

［7］Rosen C J，Allan D L，Luby J J.Nitrogen form and solution pH influence growth and nutrition of two Vaccinium clones［J］.Journal of the American Society for Horticultural Science，1990，115：83－89.

［8］李亞東，趙 爽，張志東，等.不同氮素形態(tài)配比對越橘生長、產(chǎn)量及葉片元素含量的影響［J］.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2008，30 (4)：477－480.

［9］趙 爽.氮素形態(tài)及氮素配比對越橘生長發(fā)育影響的研究［D］.長春：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，2007：32－34.

［10］黃文江，劉慶忠，闞顯照.高灌藍(lán)莓離體繁殖的研究［J］.安徽師范大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2004，27(3)：314－317.

［11］張長青，李廣平，朱士農(nóng)，等.兔眼越橘莖段快繁高效技術(shù)研究［J］.果樹學(xué)報，2007，24(6)：837－840.

［12］段祖安，李建華，強(qiáng) 薇，等.越桔品種‘達(dá)柔’離體培養(yǎng)快繁技術(shù)體系的研究［J］.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2008，39(4)：506－510.

［13］劉慶忠，趙紅軍，鄭亞芹，等.高灌藍(lán)莓微體繁殖技術(shù)研究初報［J］.落葉果樹，2001(5)：1－3.

［14］姜燕琴，於 虹，陳靜波.不同基本培養(yǎng)基對南高叢越橘優(yōu)選系增殖的影響［J］.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2009，31(5)：532－537.

［15］Rowland L J，Ogden E L.Use of a cytokinin conjugate for efficient shoot regeneration from leaf sections of highbush blueberry［J］.HortScience，1992，27：1127－1129.

［16］鄧桂秀，於 虹，宋鵬飛，等.不同基本培養(yǎng)基對南方高叢藍(lán)漿果叢生枝增殖及生長的影響［J］.植物資源與環(huán)境學(xué)報，2011，20(1)：60－64.

［17］張志良，瞿偉菁.植物生理學(xué)實驗指導(dǎo)［M］.3版.北京：高等教育出版社，2004：67－70.

［18］Townsend L R，Blatt C R.Lowbush blueberry：evidence for the absence of a nitrate reducing system［J］.Plant and Soil，1966，25：456－460.