季慶亮

(哈藥集團(tuán)中藥二廠，黑龍江 哈爾濱 150078)

中藥丹參為唇形科鼠尾草屬植物丹參的干燥根及根莖，是常用的活血化瘀中藥。丹參活性成分主要分為脂溶性成分和水溶性成分兩類(lèi)。國(guó)內(nèi)外對(duì)丹參及其同屬植物的脂溶性成分進(jìn)行了大量研究，然而中醫(yī)傳統(tǒng)用藥方法是用水煎劑，即丹參的水溶性部位。所以研究丹參水溶性成分更有意義?，F(xiàn)就目前高效液相色譜法分析丹參水溶性成分方面的研究作一綜述。

1 丹參素的HPLC測(cè)定

如注射用丹參（凍干）中丹參素鈉的測(cè)定，就是以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以二甲基甲酰胺-甲醇-水-冰醋酸（4：4：90：2）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為281nm。代彩芹等報(bào)道，用反相HPLC法，以甲醇-0.4%醋酸(5:95)作流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)281 nm。結(jié)果樣品平均加樣回收率為99.71%，RSD為0.96%。王杰民等采用以甲醇和0.25%醋酸溶液分別為流動(dòng)相A和B的梯度洗脫技術(shù)，YWGC18H37色譜柱，對(duì)羥基苯甲酸為內(nèi)標(biāo)，280nm波長(zhǎng)處檢測(cè)。結(jié)果線性關(guān)系良好，丹參素的回收率為104.0%±1.7%。李正國(guó)等以水-甲醇-冰醋酸（94：4：0.6）為流動(dòng)相，用 C18-ODS柱測(cè)定丹紅注射液中丹參素的含量，檢測(cè)波長(zhǎng)278nm,外標(biāo)法定量分析,結(jié)果樣品平均加樣回收率為100.90%,RSD為1.41%。余練康等以甲醇-0.2mol/L的醋酸銨(12:88)為流動(dòng)相(硫酸調(diào)節(jié)PH2.2)，測(cè)定樂(lè)脈顆粒中丹參素的含量。

2 原兒茶醛的HPLC測(cè)定

向大雄等采用YWG-C18反相柱，甲醇-乙腈-冰乙酸-水（15：5：1：84）為流動(dòng)相測(cè)定了不同丹參制劑中原兒茶醛的含量。王凌等以甲醇-水(15:85)為流動(dòng)相(磷酸調(diào)節(jié)PH2.45)，檢測(cè)波長(zhǎng)281nm,用C18-ODS柱測(cè)定原兒茶醛含量。

3 丹酚酸B的HPLC測(cè)定

在2005版藥典中丹參藥材中丹酚酸B的測(cè)定是以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-甲酸-水（30：10：1：59）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為286nm。測(cè)定丹酚酸B含量。王鳳美等采用色譜柱Alltima C18，以乙腈-0.5%冰醋酸水溶液為流動(dòng)相,進(jìn)行梯度洗脫，流速1ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)290nm。程顯隆等利用ODSC18柱,采用甲醇-乙腈-36%乙酸-水（33：12：1：55）為流動(dòng)相。游勇基等采用甲醇-5%冰醋酸進(jìn)行梯度洗脫。曹楓等采用甲醇-水（用甲酸調(diào)PH至2.5）作流動(dòng)相，體積比為83：117，測(cè)定丹參三七配伍水煎液中丹酚酸B的含量。

4 多種組分的HPLC測(cè)定

張文婷等以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，用甲醇-0.5%醋酸溶液(20:80)為流動(dòng)相,檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm，測(cè)定丹參水溶性制劑中丹參素和原兒茶醛含量，兩成分分離良好。王志平等以甲醇-冰醋酸-水（5：1：95）為流動(dòng)相,檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm，檢測(cè)了丹參提取液的樹(shù)脂吸附及醇沉工藝前后丹參素和原兒茶醛含量的變化，丹參素和原兒茶醛的保留時(shí)間分別為5min和8min，與其他峰分開(kāi)。

測(cè)定丹參提取物中丹參素、原兒茶醛和丹酚酸B的含量，張文生等采用Alltima C18柱，乙腈和冰醋酸-水（1：25）為流動(dòng)相，進(jìn)行梯度洗脫，結(jié)果是三種成分均出現(xiàn)較好的峰。李向軍等則采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，用乙腈-1%冰乙酸 (21:79)為流動(dòng)相,檢測(cè)波長(zhǎng)為281nm。金樟照等采用甲醇（A）-0.5%冰醋酸水溶液（B）為流動(dòng)相，進(jìn)行程序梯度洗脫：0-60min A體積分?jǐn)?shù)由10%線性改變至60%，60-80min A體積分?jǐn)?shù)由60%線性改變至100%，檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm。

游勇基等采用HypersilC18柱,以甲醇（A）-5%冰醋酸（B）為流動(dòng)相，進(jìn)行梯度洗脫：在0-5min,B體積分?jǐn)?shù)為90%,5-10 minB體積分?jǐn)?shù)由90%線性改變至65%，10-20min維持B體積分?jǐn)?shù)為65%，檢測(cè)波長(zhǎng)為281nm,對(duì)羥基苯甲酸作為內(nèi)標(biāo)物，同時(shí)測(cè)定了丹參注射劑中的丹參素、原兒茶酸、原兒茶醛和丹酚酸B四種水溶性成分的含量，分離效果好。

黃煉棟采用RP-HPLC法測(cè)定丹參培養(yǎng)物中水溶性酚酸類(lèi)化合物迷迭香酸和紫草酸B的含量。在Nova pak C18色譜柱上，以甲醇-乙腈-水（37：1：62），甲酸調(diào) PH 至 2.67 為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm,可使兩組分完全分離。

綜上所述，本文介紹了目前高效液相色譜法分析丹參水溶性成分方面的研究進(jìn)展。丹參水溶性成分在丹參的作用中占重要地位，在采用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)方法的基礎(chǔ)上，隨著對(duì)丹參活性成分及其藥理作用等方面研究的深入，我們有理由相信，丹參這味傳統(tǒng)而古老的中藥必將具有更廣闊的應(yīng)用前景。