朱雨秋，郭圣榮

(1.上海交通大學(xué)藥學(xué)院 ，上海 200240；2.上海愛(ài)的發(fā)制藥有限公司，上海 201702)

非洛地平緩釋片的研制及其體外釋放研究

朱雨秋1,2，郭圣榮1

(1.上海交通大學(xué)藥學(xué)院 ，上海 200240；2.上海愛(ài)的發(fā)制藥有限公司，上海 201702)

目的研制非洛地平緩釋片，評(píng)價(jià)其與原研制劑的體外釋放度相似性。方法采用骨架片技術(shù)，通過(guò)研究骨架材料種類、粘度、用量，稀釋劑及制備工藝對(duì)釋放的影響，研制非洛地平緩釋片，通過(guò)相似因子法研究其與原研制劑在體外4種不同pH條件下的釋放度的差異。結(jié)果以HPMC為骨架材料，工藝采用濕法制粒法，乙醇溶液濃度為80%，制粒時(shí)間為40s，壓片硬度在50～70N時(shí)，所得的非洛地平緩釋片的釋放度與原研制劑最接近。4種不同pH條件下的釋放度的相似因子均大于50。結(jié)論研制的非洛地平緩釋片，其體外釋放與原研制劑相似。

非洛地平;緩釋片;HPMC;釋放度;相似因子法

非洛地平是第二代二氫吡啶類鈣拮抗劑，通過(guò)抑制小動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞外鈣的內(nèi)流和降低外周血管阻力用于治療高血壓；對(duì)心肌收縮力和心臟傳導(dǎo)無(wú)直接作用，故不會(huì)引起體位性低血壓[1]。

口服給藥后，非洛地平幾乎全部吸收且具有肝臟首過(guò)效應(yīng)，其相對(duì)生物利用度為20%。在給藥后2.5～5 h內(nèi)可達(dá)平均峰濃度[2]。以前應(yīng)用的是需日服2次的普通片劑，目前以緩釋制劑為主。該藥物的緩釋制劑是瑞士阿斯利康(AstraZeneca)制藥有限公司首先開(kāi)發(fā)的，于1996年6月上市，商品名為波依定(plendilTM)。這是一個(gè)一日服用一次的緩釋片制劑，劑量規(guī)格分別為2.5、5、10 mg。以2.5 mg每日1次作為開(kāi)始治療劑量，必要時(shí)劑量進(jìn)一步增加。非洛地平緩釋制劑半衰期為25 h，服藥后血藥濃度上升緩慢、緩和，形成一平坦的非洛地平血漿濃度-時(shí)間曲線，作用持續(xù)24 h，不僅大大減少了因血壓降低反射性血管擴(kuò)張引起的鈣拮抗劑常見(jiàn)的不良反應(yīng)，如心率加快、潮紅、頭痛，而且起效平穩(wěn)，口服吸收好，生物利用度高，不受個(gè)體差異、給藥劑量的影響，每天僅服用一次，提高了病人的順應(yīng)性[3]。

有研究表明，不同廠家的非洛地平緩釋片在體外釋放度、療效、持續(xù)時(shí)間和不良反應(yīng)的感受上有區(qū)別[4,5]，而波依定的單劑量費(fèi)用明顯高于國(guó)產(chǎn)非洛地平緩釋片。本研究以波依定為對(duì)照制劑研制5 mg非洛地平緩釋片，通過(guò)相似因子法研究?jī)烧咴隗w外4種不同pH條件下的釋放度有無(wú)差異，從而獲得仿制波依定的最佳處方工藝。

1 處方工藝研究

1.1實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備

1.1.1實(shí)驗(yàn)材料 非洛地平原料(北京協(xié)和藥廠)；非洛地平對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)100717-200501，)；非洛地平緩釋片(波依定?5 mg，阿斯利康制藥有限公司)；羥丙基甲基纖維素(日本信越化學(xué)有限公司)；微晶纖維素(日本旭化成)；乳糖(上海光明乳業(yè)有限公司)；黃原膠(山東阜豐有限公司)；海藻酸鈉(ISP國(guó)際特品公司)；Compritol 888 ATO(法國(guó)佳法賽)；硬脂酸鎂(淮南山河藥用輔料公司)。

1.1.2設(shè)備與儀器 快速攪拌制粒機(jī)(KJZ-10)、搖擺式顆粒機(jī)(YK-60)、壓片機(jī)(ZP-17)，均為上海天河制藥機(jī)械廠生產(chǎn)；片劑硬度儀(YPD-200，上海黃海機(jī)械廠)；三維運(yùn)動(dòng)混合機(jī)(HD15，無(wú)錫榮偉制藥機(jī)械廠)；紫外分光光度計(jì)(UV2401PC，日本島津)；溶出儀(ZRS-8G，天津大學(xué)無(wú)線電廠)。

1.2體外測(cè)定方法

1.2.1檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 精密稱取非洛地平對(duì)照品約10 mg于50 ml容量瓶中，加乙醇適量，超聲使之溶解，稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 ml至50 ml容量瓶中，以1%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖液(pH 6.5)稀釋至刻度，搖勻得20 μg/ml的儲(chǔ)備液。再精密量取5 ml上述儲(chǔ)備液至10 ml容量瓶中，用1%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖液(pH 6.5)稀釋至刻度，搖勻得10 μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，以1%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖液(pH 6.5)為空白，進(jìn)行紫外掃描。發(fā)現(xiàn)非洛地平在363、239、202 nm處有最大吸收，而非洛地平緩釋片轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-152)-2005Z與美國(guó)藥典(USP29版)中非洛地平緩釋片均選擇362 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)，故我們選擇362 nm作為體外釋放的測(cè)定波長(zhǎng)。

1.2.2儀器裝置 根據(jù)非洛地平緩釋片轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-152)-2005Z和美國(guó)藥典(USP29版)，釋放均采用溶出測(cè)定第2法。

1.2.3溫度控制 根據(jù)中國(guó)藥典2005版緩控釋制劑指導(dǎo)原則，模擬體溫應(yīng)控制在(37±0.5)℃。

1.2.4轉(zhuǎn)速選擇 在非洛地平緩釋片轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-152)-2005Z中，選用了200 r/min為溶出轉(zhuǎn)速；而在美國(guó)藥典(USP29版)中，轉(zhuǎn)速為50 r/min。體外釋放方法是模擬人體內(nèi)的消化道條件，溶出裝置轉(zhuǎn)速應(yīng)正確反映胃腸道蠕動(dòng)速率。如果采用板漿法，一般以50～100轉(zhuǎn)為適宜，200 r/min過(guò)快，且長(zhǎng)時(shí)間此轉(zhuǎn)速也易損壞溶出裝置。故參照美國(guó)藥典(USP29版)選用50 r/min。

1.2.5取樣時(shí)間點(diǎn) 根據(jù)中國(guó)藥典2005版緩控釋制劑指導(dǎo)原則，體外釋放速率試驗(yàn)應(yīng)能反映出受試制劑時(shí)藥速率的變化特征，且能滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)處理的需要，釋藥全過(guò)程的時(shí)間不應(yīng)低于給藥的間隔時(shí)間，且累計(jì)釋放率要求達(dá)到90%以上。緩釋制劑從釋藥曲線圖中至少選出3個(gè)取樣時(shí)間點(diǎn)，第1點(diǎn)為開(kāi)始0.5～2 h的取樣時(shí)間點(diǎn)，用于考察藥物是否有突釋，第2點(diǎn)為中間的取樣時(shí)間點(diǎn)，用于確定釋藥特性，最后的取樣時(shí)間點(diǎn)，用于考察釋藥是否基本完全。根據(jù)以上原則，我們參照美國(guó)藥典(USP29版)中非洛地平緩釋片的取樣時(shí)間點(diǎn)，又由于非洛地平緩釋片是一個(gè)一日服用一次的緩釋制劑，我們擬定了4個(gè)取樣時(shí)間點(diǎn)：2、6、10和24 h，釋放度分別定為10%～30%，42%～68%，75%～95%，≥90%。

1.2.6標(biāo)準(zhǔn)曲線 精密稱取非洛地平對(duì)照品約10 mg于50 ml容量瓶中，加乙醇適量，超聲使之溶解，稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 ml至50 ml容量瓶中，用1%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖液(pH 6.5)稀釋至刻度，搖勻得20 μg/ml的儲(chǔ)備液。再分別精密吸取上述儲(chǔ)備液1、3、5、7、10 ml于10 ml容量瓶中，用1%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖液(pH 6.5)稀釋至刻度，其濃度范圍為2～20 μg/ml，以1%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖液(pH 6.5)為空白，在362 nm處測(cè)定吸收值。以濃度C和吸收度A計(jì)算求得直線回歸方程為A=19.002 147C-0.000 443，r=0.999 941(n=5)，線性良好。

1.2.7釋放度方法的確定 按照中國(guó)藥典2005版釋放度測(cè)定法第一法，采用溶出度測(cè)定法第二法的裝置，以1%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖液(pH 6.5)500 ml為介質(zhì)，轉(zhuǎn)速50 r/min，依法操作，在2、6、10和24 h分別取溶液5 ml濾過(guò)并即時(shí)在操作容器中補(bǔ)充相同溶液5 ml，取續(xù)濾液，照紫外-可見(jiàn)分光光度法，在362 nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度；另精密稱取非洛地平對(duì)照品適量，用上述介質(zhì)溶解并定量稀釋成每1 ml含10 μg的溶液，同法測(cè)定。分別計(jì)算出每片在不同時(shí)間的釋放量。

1.3處方工藝篩選

1.3.1評(píng)價(jià)依據(jù) 按照確定的釋放度方法檢測(cè)被篩選處方的釋放度來(lái)進(jìn)行處方工藝的研究。另外，日本藥品醫(yī)療安全局出版的《仿制藥生物等效性試驗(yàn)指導(dǎo)》中指出[6]，對(duì)于口服制劑，溶出特性能給出關(guān)于等效性的重要信息，所以在仿制藥的研發(fā)過(guò)程中，需研究與原研制劑的溶出比較。指導(dǎo)要求，與原研制劑的溶出曲線對(duì)比需進(jìn)行4條不同的pH條件，口服緩釋制劑的4個(gè)pH通常為1.2、3.0～5.0、6.8～7.5與水。在非洛地平的處方研究中，我們選擇pH 1.2、4.5、6.8和水進(jìn)行與原研的溶出比較。溶出數(shù)據(jù)使用相似因子法f2來(lái)評(píng)價(jià)其差異程度。

式中：

Ti-取樣點(diǎn)時(shí)試驗(yàn)制劑的釋放度；

Ri-取樣點(diǎn)時(shí)參比制劑的釋放度；

n-取樣點(diǎn)的個(gè)數(shù)。

對(duì)于口服緩釋制劑，在測(cè)定時(shí)間內(nèi)，如果參比制劑的釋放≥85%，那么f2≥40被認(rèn)為相似，溶出曲線無(wú)顯著差異；如果參比制劑的釋放在50%～85%之間，那么f2≥50被認(rèn)為相似，溶出曲線無(wú)顯著差異；如果參比制劑的釋放<50%，那么f2≥55被認(rèn)為相似，溶出曲線無(wú)顯著差異。

1.3.2處方對(duì)釋放度的影響

1.3.2.1不同骨架材料對(duì)片芯釋放度的影響 固定稀釋劑微晶纖維素處方量64 mg，乳糖處方量5 mg，分別以羥丙基甲基纖維素 4KM，海藻酸鈉，黃原膠，Compritol 888 ATO為骨架材料，制備非洛地平緩釋片，考察其釋放度，結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1 不同骨架材料的釋放曲線

從釋放結(jié)果中可以看出，以羥丙基甲基纖維素為骨架材料制備的緩釋片中藥物的釋放符合零級(jí)過(guò)程；以黃原膠為骨架材料，其藥物釋放緩慢；而海藻酸鈉與Compritol 888 ATO對(duì)藥物釋放的控制能力較差。因此，我們選擇羥丙基甲基纖維素作為非洛地平緩釋片的骨架材料。

1.3.2.2不同型號(hào)的羥丙基甲基纖維素對(duì)片芯釋放度的影響 固定稀釋劑微晶纖維素、乳糖和骨架材料羥丙基甲基纖維素的處方量分別為64、5、25 mg，分別考察羥丙基甲基纖維素的不同型號(hào)K4M, K15M與K100M對(duì)釋放的影響，結(jié)果見(jiàn)圖2。

圖2 不同型號(hào)羥丙基甲基纖維素的釋放曲線

釋放結(jié)果顯現(xiàn)，隨著羥丙基甲基纖維素的粘度增加，非洛地平的釋放速率減慢，當(dāng)選用K4M時(shí)，釋藥速度最為合適，各時(shí)間點(diǎn)的釋放度符合制定的標(biāo)準(zhǔn)。因此，選用羥丙基甲基纖維素K4M 為非洛地平緩釋片的骨架材料。

1.3.2.3不同用量的羥丙基甲基纖維素K4M對(duì)釋放的影響 以羥丙基甲基纖維素K4M為骨架材料，分別考察其處方量為15、20、25 mg時(shí)的藥物釋放度，結(jié)果顯示用量25 mg最為合適，見(jiàn)圖3。

圖3 不同用量羥丙基甲基纖維素的釋放曲線

1.3.2.4稀釋劑對(duì)釋放的影響 在親水凝膠骨架片的制備過(guò)程中，常常需要加入一定量的稀釋劑借以調(diào)節(jié)釋藥速率和便于壓片[7]。固定骨架材料羥丙基甲基纖維素K4M處方量25 mg，在常用的幾個(gè)稀釋劑中，選用水不溶性的微晶纖維素和水溶性的乳糖，考察其單獨(dú)使用和聯(lián)合使用對(duì)釋放的影響。篩選了3個(gè)處方，分別為單獨(dú)使用微晶纖維素、乳糖69 mg，微晶纖維素64 mg加乳糖5 mg的聯(lián)合使用，結(jié)果當(dāng)微晶纖維素和乳糖聯(lián)合使用時(shí)，藥物釋放速率符合制定標(biāo)準(zhǔn)，見(jiàn)圖4。

圖4 不同稀釋劑的釋放曲線

同時(shí)在處方中加入1%的硬脂酸鎂作為潤(rùn)滑劑。

1.3.3制備工藝對(duì)釋放的影響

1.3.3.1粘合劑與潤(rùn)濕劑的影響 按處方量1萬(wàn)片投料，以5%PVP k30為粘合劑，濕法制粒時(shí)發(fā)現(xiàn)，物料黏度大，不宜成形也無(wú)法過(guò)篩，故采用適當(dāng)潤(rùn)濕劑制備軟材。我們分別以純水，70%和80%濃度的乙醇溶液400 g為潤(rùn)濕劑，高速攪拌切削40 s制粒制備非洛地平緩釋片，考察各自的釋放度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨著乙醇濃度的增加，釋放加快。具體結(jié)果見(jiàn)圖5。

圖5 不同濃度潤(rùn)濕劑的釋放曲線

70%濃度的乙醇液對(duì)非洛地平緩釋片的初期，即0～6 h的釋放有較大影響，釋放數(shù)值在制定標(biāo)準(zhǔn)的下限，因此采用80%乙醇液作為潤(rùn)濕劑制備軟材。

1.3.3.2潤(rùn)濕劑用量的影響 按處方量1萬(wàn)片投料，以80%乙醇液為潤(rùn)濕劑，分別加入200、400、600 g高速攪拌切削40 s制粒制備非洛地平緩釋片，考察潤(rùn)濕劑用量對(duì)釋放度的影響，在制備中發(fā)現(xiàn)乙醇液用量越多，制出的顆粒越硬，釋放也越慢，結(jié)果見(jiàn)圖6。

圖6 不同用量乙醇的釋放曲線

1.3.3.3壓力的影響 一般情況下，只要壓力能保證骨架片在整個(gè)釋藥過(guò)程中形狀完整，在一定范圍內(nèi)不會(huì)明顯影響釋藥速率。有研究表明[3]，當(dāng)壓力較小時(shí)，緩釋片骨架不夠牢固，前期釋藥速度明顯變快，而壓力增大到一定程度后，骨架變緊密，孔隙率明顯變小從而使累積釋藥量不符合質(zhì)量要求。所以我們需要考察壓力對(duì)非洛地平緩釋片釋放的影響。

按處方量1萬(wàn)片投料，加入400 g 80%乙醇液高速攪拌切削40 s制粒，加入潤(rùn)滑劑后壓片，調(diào)節(jié)壓片機(jī)壓力，分別壓制硬度為30、40、50、70 N的非洛地平緩釋片，測(cè)定各自的釋放度。結(jié)果發(fā)現(xiàn)當(dāng)緩釋片硬度小于30 N時(shí)，釋放度有較明顯的增快；當(dāng)硬度在40、50、70 N時(shí)，釋放曲線相似，無(wú)明顯變化?？紤]到片劑的硬度要求以及包衣步驟對(duì)片芯硬度的需要，所以在壓制該緩釋片時(shí)，片劑硬度控制在50 N左右。結(jié)果見(jiàn)圖7。

圖7 不同壓力的釋放曲線

1.4制備處方、工藝與四條pH釋放度比對(duì)

1.4.1非洛地平緩釋片制備處方

表1 非洛地平緩釋片處方組成與含量

1.4.2制備工藝

步驟1：將非洛地平原料，羥丙基甲基纖維素 K4M，微晶纖維素和乳糖分別過(guò)篩70目。

步驟2：稱取1萬(wàn)片處方量的非洛地平原料，羥丙基甲基纖維素 K4M，微晶纖維素和乳糖于快速攪拌制粒機(jī)中混合均勻，加入80%乙醇液400 g，高速攪拌切削40 s，過(guò)20目制粒。

步驟3：50 ℃鼓風(fēng)干燥烘干。

步驟4：20目整粒，加入處方量的硬脂酸鎂混合均勻。

步驟5：6 mm淺圓弧形沖壓片，硬度控制在50～70 N。

1.4.3四條pH釋放度比對(duì) 按照日本藥品醫(yī)療安全局出版的《仿制藥生物等效性試驗(yàn)指導(dǎo)》，我們選擇pH 1.2、4.5、6.8和水進(jìn)行與原研波依定?的釋放比較，并使用相似因子法f2來(lái)評(píng)價(jià)其差異程度。結(jié)果4條曲線與波依定?的f2因子均大于50，體外釋放相似。具體見(jiàn)表2,3。

表2 非洛地平緩釋片與波依定水中釋放數(shù)據(jù)f2的比較

表3 非洛地平緩釋片與波依定在不同pH、時(shí)間點(diǎn)釋放數(shù)據(jù)及f2的比較

2 結(jié)論

我們通過(guò)體外釋放度試驗(yàn)比較了4種骨架材料，結(jié)果羥丙基甲基纖維素(HPMC)表現(xiàn)出良好的溶出特性曲線，這種親水性凝膠骨架材料應(yīng)用較廣，性質(zhì)穩(wěn)定，重現(xiàn)性良好；也比較了HPMC的3種不同黏度型號(hào)以及用量，3種不同稀釋劑的影響來(lái)確定最終的處方。處方組成為：非洛地平、HPMC K4M、微晶纖維素、乳糖和硬脂酸鎂。工藝采用濕法制粒法，對(duì)非洛地平及輔料進(jìn)行制粒、壓片。我們對(duì)工藝參數(shù)進(jìn)行了考察，最后確定當(dāng)乙醇溶液濃度為80%，用量為400 g，制粒時(shí)間為40 s，壓片硬度在50～70 N時(shí)，所得的非洛地平緩釋片的釋放度與原研制劑最接近。

按照日本藥品醫(yī)療安全局出版的《仿制藥生物等效性試驗(yàn)指導(dǎo)》，我們選擇pH 1.2、4.5、6.8和水進(jìn)行了與波依定?的釋放比較，并使用相似因子法f2來(lái)評(píng)價(jià)其差異程度。結(jié)果4條曲線與波依定?的f2因子均大于50，體外釋放相似。

[1] 陳新謙，金有豫，湯 光. 新編藥物學(xué)[M]. 第15版. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2003. 324～383.

[2] 杜麗娜. 非洛地平[J]. 臨床藥物治療雜志，2004，2(1)：46.

[3] 李紅梅. 非洛地平緩釋片治療原發(fā)性高血壓效果指數(shù)研究[J]. 中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志，2009，12(14)：55.

[4] 梁 竹，魏繼魯，張 華. 非洛地平緩釋片釋放度比較[J]. 中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志，2006，23(1)：41.

[5] 梁 竹，王寶德，于燕莉，等. 不同產(chǎn)品非洛地平緩釋片藥物動(dòng)力學(xué)比較[J]. 中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2005，10(5)：551.

[6] 仿制藥生物等效性試驗(yàn)指導(dǎo)[Z]. 日本藥品醫(yī)療安全局.2002：273.

[7] 顏耀東. 緩釋控釋制劑的設(shè)計(jì)與開(kāi)發(fā)[M]. 北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2006. 73.

2010-04-28

[修回日期] 2010-09-19

Studyofpreparationandreleaserateoffelodipinesustainedreleasetablet

ZHU Yu-qiu1,2, GUO Shen-rong1

(1.School of Pharmacy, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200240，China; 2.Shanghai Ethypharm Pharmaceutical Company Ltd., Shanghai 201702，China)

ObjectiveTo prepare felodipine sustained release tablet and evaluate the similitude of release rate with original preparation.MethodsMatrix technology was used. felodipine sustained release tablet was prepared through studying the influence of matrix material sorts, viscosity, quantity, fillers and process. The similitude of release rateof SR tablet were evaluated in 4 kinds of pH media with original preparation.ResultsThe release rate of felodipine sustained release tablet which was prepared by HPMC as matrix material ,applied by wet granulation with alcohol content of 80% and granulation time of 40 sec, was similar to original preparation with the hardness between 50～70 N. F2functions of release rate in 4 kinds of pH media were all exceed 50.ConclusionsRelease rate of felodipine sustained release tablet prepared was similar to original preparation.

felodipine; sustained release tablet; HPMC; release rate; f2function

朱雨秋(1976-)，女，碩士.Tel：(021)59898898,E-mail:zhu.yuqiu@ethypharm.com.cn.

R944.9

A

1006-0111(2011)02-0101-05