黨 偉,李 丹,李曉磊
(1.吉林農(nóng)業(yè)大學 食品科學與工程學院,長春 130118;2.長春大學 生物科學技術學院,長春 130022)
反相高效液相色譜法分析輔酶Q10
黨 偉1,李 丹2,李曉磊2
(1.吉林農(nóng)業(yè)大學 食品科學與工程學院,長春 130118;2.長春大學 生物科學技術學院,長春 130022)
本實驗應用色譜技術,建立了輔酶Q10的檢測方法。采用反相高效液相色譜法,以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相,以無水乙醇-甲醇(1:1)為流動相;柱溫35℃,檢測波長275nm。結果表明:輔酶Q10的含量為6mg/g。
輔酶Q10;反相高效液相色譜法;檢測
輔酶Q10是一種脂溶性抗氧化劑,是人類生命不可缺少的重要元素之一,它既能激活人體細胞和細胞能量的營養(yǎng),還能保持膜質(zhì)流動性,增強人體非特異性免疫功能[1,2]。醫(yī)學上廣泛用于心血管系統(tǒng)疾病、病毒性肝炎、抗衰老等[3]。近年來,國內(nèi)外廣泛將其用于營養(yǎng)保健品及食品添加劑。本文參照中華人民共和國藥典(2005年版)[4]“輔酶Q10膠囊”規(guī)定的方法檢測,用高效液相色譜法(HPLC)法檢測輔酶Q10。
島津LA-20AD高效液相色譜儀;
CoQ10對照品,Sigma公司;輔酶Q10膠囊,購于長春歐亞集團有限公司;無水乙醇為色譜純。
紫外檢測器,檢測波長275nm;C18色譜柱,Waters Nova-Pak C18(粒徑μm,150mm*3.9mm,沃特世公司,美國馬薩諸塞州米爾福德);流動相,甲醇-無水乙醇(1:1);流速0.8mL/min;柱溫35℃;進樣體積20μL。
精密稱取100mg輔酶Q10標準品,加無水乙醇適量溶解,冷卻后,定容至100mL棕色容量瓶中,在避光條件下于冰箱中冷凍保存。
避光操作。精密稱取1.5g(約相當于輔酶Q1020mg),加無水乙醇適量,置50℃水浴中振搖溶解,放冷后,移至100mL棕色容量瓶中,加無水乙醇至刻度,搖勻,在3000r/min下離心5min,去上清液,經(jīng)0.45μm孔徑的微孔濾膜(聚四氟乙烯,豐源過濾設備有限公司,浙江省海寧市)過濾后,所得濾液用于反相高效液相色譜分析。
采用外標法定量。
標準品輔酶Q10經(jīng)C18色譜柱分離得到色譜圖見圖1。圖1的結果表明:標準品輔酶Q10的保留時間為 23.75min,峰面積為 5676042.5。
圖1 標準品輔酶Q10高效液相色譜圖標準品輔酶Q10:23.75min
輔酶Q10膠囊經(jīng)C18色譜柱分離得到色譜圖見圖2。圖2的結果表明:輔酶Q10膠囊的保留時間為23.761 min,峰面積為514662.4。按峰面積外標法計算其含量。
圖2 輔酶Q10膠囊高效液相色譜圖輔酶Q10膠囊:23.761min
采用國標法處理輔酶Q10膠囊樣品,再利用反相高效液相色譜法可以準確分析計算輔酶Q10膠囊的輔酶Q10含量為6mg/g。
此種方法操作簡單,定量精確,檢出限高,適用于輔酶Q10膠囊中微量輔酶Q10的檢測。
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[3] 張繼忠,遲莉麗,沈亞領.輔酶Q10的生產(chǎn)及在醫(yī)學領域中的應用[J].上海應用技術學院學報,2004,4(4):10-12.
[4] 中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.衛(wèi)生部藥品標準、抗生素生化藥品注釋[S].1989.94-98.
Analysis of Coenzyme Q10 byReversed-Phase High-Performance Liquid Chromatography
DANG Wei1,LI Dan2,LI Xiao-lei2
(1.College of Food Science and Engineering,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China;2.Bio-Scientific and Technical College,Changchun University,Changchun 130022,China)
This experiment establishes a method for detecting coenzyme Q10 by using chromatographic technique.The best chromatographic conditions are stationary phase C18 column,mobile phase alcohol-methanol(1:1)with column temperature 35℃ and detection wavelength 275 nm.The results show that the content of coenzyme Q10 is 6mg/g.
coenzyme Q10;RP-HPLC;detection
TS218
A
1009-3907(2011)12-0086-02
2011-09-28
黨偉(1985-),女,吉林雙遼人,碩士研究生,主要從事食品生物技術的研究。李丹(1972-),男,內(nèi)蒙古赤峰人,教授,博士,主要從事食品科學方面研究。
責任編輯:鐘 聲