金藝淑，何 群，何永恒#，姜 宇，嚴(yán)建業(yè)，聶子文（1.沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院沈洲醫(yī)院，沈陽(yáng)市 11000；.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，長(zhǎng)沙市 41008）

正交試驗(yàn)優(yōu)選四妙君逸軟膏提取工藝Δ

金藝淑1＊，何 群2，何永恒2#，姜 宇2，嚴(yán)建業(yè)2，聶子文2（1.沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院沈洲醫(yī)院，沈陽(yáng)市 110002；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，長(zhǎng)沙市 410208）

目的：優(yōu)選四妙君逸軟膏的提取工藝。方法：以加水量、浸泡時(shí)間、提取時(shí)間為考察因素，以揮發(fā)油提取量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)篩選花椒、沒(méi)藥各自單提和二者混合提取的最佳工藝。結(jié)果：花椒單提的最佳工藝為加藥材5倍量的水，不浸泡，回流提取6 h；沒(méi)藥單提的最佳工藝為加藥材9倍量的水，不浸泡，回流提取8 h；花椒、沒(méi)藥混合提取最佳工藝為加藥材5倍量的水，浸泡60 min，回流提取6～8 h；單提得到的揮發(fā)油量多。結(jié)論：四妙君逸軟膏中花椒和沒(méi)藥的揮發(fā)油需分別單獨(dú)提取，才能獲得較高揮發(fā)油提取量；該單提工藝合理、科學(xué)、可行。

花椒；沒(méi)藥；揮發(fā)油；正交試驗(yàn)；水蒸氣蒸餾法

四妙君逸軟膏處方來(lái)源于湖南中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院著名中醫(yī)肛腸科專(zhuān)家何永恒教授創(chuàng)制的臨床經(jīng)驗(yàn)方，由花椒、沒(méi)藥等4味中藥材組成，具有行氣、活血、止痛、止血、生肌的作用，用于各種肛腸病術(shù)后鎮(zhèn)痛和創(chuàng)面換藥，促進(jìn)傷口愈合，療效顯著?，F(xiàn)代研究表明[1，2]，花椒、沒(méi)藥的有效成分為揮發(fā)油。揮發(fā)油提取方法有水蒸氣蒸餾法、溶劑提取法和超臨界萃取法等。目前，生產(chǎn)中常用水蒸氣蒸餾法提取藥材中的揮發(fā)油，原則上藥材盡可能混合提取，使生產(chǎn)方便。但本處方中花椒、沒(méi)藥藥材性質(zhì)不同，各自的最優(yōu)提取工藝參數(shù)不同，導(dǎo)致出油量不同，而出油量的高低影響療效，工藝設(shè)計(jì)應(yīng)首先考慮出油量，故本文以揮發(fā)油提取量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)篩選單提與混提的最優(yōu)工藝參數(shù)。

1 儀器與試藥

AR5120型電子天平（島津國(guó)際貿(mào)易上海有限公司）；SK3300H型超聲波清洗器（上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司）；揮發(fā)油提取器（湖南長(zhǎng)沙益名實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）。

花椒飲片、沒(méi)藥超微粉末（湖南省三湘中藥飲片有限公司，批號(hào)分別為090602-11、2009050893）；其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 花椒、沒(méi)藥揮發(fā)油提取方法

取花椒50 g、沒(méi)藥超微粉末25 g，花椒粉碎成最粗粉，分別按表1中各條件加入適量水在室溫下不浸泡或浸泡一定時(shí)間，單獨(dú)或二者混合后用揮發(fā)油提取器連續(xù)回流提取數(shù)小時(shí)，測(cè)量揮發(fā)油的提取量。

2.2 花椒、沒(méi)藥揮發(fā)油提取工藝研究

2.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[1～4]，以對(duì)揮發(fā)油提取工藝影響較大的加水量（A）、浸泡時(shí)間（B）、提取時(shí)間（C）為考察因素，每個(gè)因素取3個(gè)水平，用L9（34）正交表安排試驗(yàn)。因素水平見(jiàn)表1。

2.2.2 單獨(dú)提取花椒中揮發(fā)油的工藝研究 按“2.1”項(xiàng)下方法，照“2.2.1”項(xiàng)下條件單獨(dú)取花椒進(jìn)行提取，以冷卻后的揮發(fā)油體積為評(píng)價(jià)指標(biāo)，優(yōu)選工藝。單提花椒的正交試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2；花椒單提工藝的方差分析結(jié)果見(jiàn)表3。

表1 因素水平Tab 1 Factors and levels

表2 單提花椒的正交試驗(yàn)結(jié)果（n＝3）Tab 2 Results of orthogonal test of the extraction of Zanthoxyli Pericarpium（n＝3）

表3 花椒單提工藝的方差分析結(jié)果Tab 3 Results of variance analysis of the extraction of Zanthoxyli Pericarpium

由表2、表3可知，各因素對(duì)工藝的影響順序?yàn)锽＞C＞A，且浸泡時(shí)間和提取時(shí)間有顯著性影響。從降低經(jīng)濟(jì)成本方面考慮，A因素取水平1。故最佳提取工藝為A1B1C2，即花椒不浸泡，加5倍量水，提取6 h。

2.2.3 單獨(dú)提取沒(méi)藥中揮發(fā)油的工藝研究 按“2.1”項(xiàng)下方法，照“2.2.1”項(xiàng)下條件單獨(dú)取沒(méi)藥進(jìn)行提取，以冷卻后的揮發(fā)油體積為評(píng)價(jià)指標(biāo)，優(yōu)選工藝。單提沒(méi)藥的正交試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4；沒(méi)藥單提工藝的方差分析結(jié)果見(jiàn)表5。

由表4、表5可知，各因素對(duì)工藝的影響順序?yàn)镃＞A＞B，且提取時(shí)間有顯著性影響。從降低經(jīng)濟(jì)成本方面考慮，A、B因素分別取水平3、1。故最佳提取工藝為A3B1C3，即不浸泡，加9倍量水，提取8 h。

2.2.4 混合提取花椒與沒(méi)藥中揮發(fā)油的工藝研究 按“2.1”項(xiàng)下方法，照“2.2.1”項(xiàng)下條件取花椒、沒(méi)藥進(jìn)行提取，以冷卻后的揮發(fā)油體積為評(píng)價(jià)指標(biāo)，優(yōu)選工藝。混合提取的正交試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表6；混合提取的方差分析結(jié)果見(jiàn)表7。

由表6、表7可知，各因素對(duì)工藝的影響順序?yàn)锽＞A＞C，且各因素均有顯著性影響，因C因素的2、3水平間無(wú)顯著性差異，故提取時(shí)間定為6～8 h。最佳提取工藝為A1B3C3，即浸泡60 min，加5倍量水，提取6～8 h。

表4 單提沒(méi)藥的正交試驗(yàn)結(jié)果（n＝3）Tab 4 Results of orthogonal test of the extraction of Myrrha（n＝3）

表5 沒(méi)藥單提工藝的方差分析結(jié)果Tab 5 Results of variance analysis of the extraction of Myrrha

表6 混合提取的正交試驗(yàn)結(jié)果Tab 6 Results of orthogonal test of the mixture extraction

表7 混合提取的方差分析結(jié)果Tab 7 Results of variance analysis of the mixture extraction

2.3 驗(yàn)證試驗(yàn)

分別取花椒50 g、沒(méi)藥超微粉末25 g和二者的混合物，3份藥材分別置于圓底燒瓶中，按上述各單提、混提最佳工藝進(jìn)行提取，重復(fù)試驗(yàn)3次，讀取揮發(fā)油體積。結(jié)果，花椒、沒(méi)藥單獨(dú)提取的揮發(fā)油得量之和高于混合提取的量，表明花椒、沒(méi)藥以單獨(dú)提取為佳。驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表8。

表8 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果（mL，n＝3）Tab 8 Results of validation test（mL，n＝3）

3 討論

一般來(lái)說(shuō)，含揮發(fā)油藥材若極性、溶解性能等性質(zhì)相近，組成結(jié)構(gòu)相似，能混合提取盡量混合提取，以方便生產(chǎn)。但花椒、沒(méi)藥性質(zhì)相差甚遠(yuǎn)，花椒系植物的種子，沒(méi)藥屬樹(shù)脂樹(shù)膠類(lèi)藥材。若混合提取，沒(méi)藥黏性強(qiáng)，阻礙花椒揮發(fā)油的提出，使揮發(fā)油提取量下降，故本試驗(yàn)結(jié)果證明，花椒、沒(méi)藥分別單獨(dú)提取為佳。

沒(méi)藥超微粉末在提取揮發(fā)油時(shí)，一定要加適量碎石或毛細(xì)管，形成一定的孔隙，以免加熱時(shí)局部溫度過(guò)高使圓底燒瓶炸裂。

[1] 陳振德，許重遠(yuǎn)，謝 力.超臨界流體萃取花椒揮發(fā)油化學(xué)成分的研究[J].中國(guó)中藥雜志，2001，26（10）：687.

[2] 于維萍，辛義周.乳香、沒(méi)藥揮發(fā)油β-CD包合物的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)藥房，2007，18（18）：1379.

[3] 王 勇，賈曉斌，魏惠華，等.氣相色譜-質(zhì)譜法分析4種方法提取沒(méi)藥所得提取物的化學(xué)成分[J].中國(guó)藥房，2005，16（19）：1512.

[4] 弭向輝，龔祝南.花椒揮發(fā)油的提取、分離和抗菌實(shí)驗(yàn)[J].南京師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2004，27（4）：63.

Optimization of Extraction Technology of Simiao Junyi Ointment by Orthogonal Test

JIN Yi-shu（Shenzhou Hospital of Shengyang Medical College，Shenyang 110002，China）
HE Qun，HE Yong-heng，JIANG Yu，YAN Jian-ye，NIE Zi-wen（Hunan University of Traditional Chinese Medicine，Changsha 410208，China）

OBJECTIVE：To study the extraction technology of Simiao junyi ointment.METHODS：The extraction technologies of Zanthoxyli Pericarpium，Myrrha and mixture of them were optimized by orthogonal test using amount of water，soaking time and extraction time as factors and with the filed of volatile oil as index.RESULTS：The optimal extraction technology of Zanthoxyli Pericarpium was as follows：5-fold water，not soaking and reflux extracting for 6 h.The optimal extraction technology of myrrha was as follows：9-fold water added，not soaking and reflux extracting for 8 h.The optimal extraction technology of the mixture of Zanthoxyli Pericarpium and Myrrha was as follows：5-fold water，soaking for 60 min and reflux extracting for 6-8 h.The field of volatile oil from Zanthoxyli Pericarpium or Myrrha was high than that of mixture.CONCLUSION：The volatile oil of Pericarpium Zanthoxyli and Myrrha should be extracted from Simiao junyi ointment respectively to obtain the highest field.The method is reasonable，scientific and feasible.

Zanthoxyli Pericarpium；Myrrha；Volatile oil；Orthogonal test；Steam distillation

R284.2；R283.621

A

1001-0408（2011）07-0603-03

Δ湖南省科學(xué)技術(shù)廳科技計(jì)劃一般項(xiàng)目（2009SK3125）

＊副主任藥師。研究方向：劑型與療效。電話：024-22871204。E-mail：celestial_516@163.com

#通訊作者：主任醫(yī)師，碩士研究生導(dǎo)師。研究方向：肛腸疾病的防治。E-mail：heyongheng1964@163.com

Δ江西省科技計(jì)劃工業(yè)領(lǐng)域重點(diǎn)項(xiàng)目（2007BG13105）

＊碩士研究生。研究方向：藥物新劑型。電話：0791-6361839。E-mail：liufen_512@163.com

#通訊作者：副教授。研究方向：藥物新劑型與制劑新技術(shù)。電話：0791-6361839。E-mail：zhonghj@ncu.edu.cn

2010-02-19

2010-04-12）