高 冷，韓 雪，李 寧

（長春工業(yè)大學(xué) 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，吉林 長春 130012）

GAO Leng，HAN Xue，LINing

（School of Chemistry and Life Science,Changchun University of Technology,Changchun 130012,China）

工程師園地

超聲波法提取刺五加苷B的條件研究

高 冷，韓 雪，李 寧

（長春工業(yè)大學(xué) 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，吉林 長春 130012）

本文采用超聲波法提取刺五加苷B，使用正交實(shí)驗(yàn)的方法對提取條件進(jìn)行優(yōu)化，確定最佳提取條件為料液比為1：20，以水為浸提劑，時間60min,超聲功率650W，此條件下刺五加苷的提取率為3.68%。

刺五加苷B；超聲波法；高效液相色譜；正交實(shí)驗(yàn)

Study on the extraction process for syringin by technology of ultrasonic

GAO Leng，HAN Xue，LINing

（School of Chemistry and Life Science,Changchun University of Technology,Changchun 130012,China）

Abstract:This article used the ultrasonic extraction to syringin,using themethod of orthogonal experiment to optimize the extraction conditions.The determination optimum extraction condition for thematerial fluid ratio was 1∶20,water as extraction agent,time of extraction was 60min,ultrasonic power was 650W,under these conditions,the extraction rate of syingin was 3.68%.

Key words:syringin；ultrasonic；HPLC；orthogonal

刺五加（Acanthopanaxsenticosus)又名五加參，是五加科重要的藥用植物之一，主要分布在中國東北部、俄羅斯遠(yuǎn)東地區(qū)及日本北海道等地，具有益氣健脾，補(bǔ)腎安神之功效。刺五加中所含的刺五加苷具有7種型式，其中刺五加苷B相對含量最多[1]，也是刺五加中的主要藥效成分之一[2]。

本文以超聲波技術(shù)為基礎(chǔ)，討論了料液比，乙醇濃度，提取時間及超聲功率對刺五加苷B提取率的影響，采用正交實(shí)驗(yàn)法確定其最佳的工藝條件，以促進(jìn)刺五加的進(jìn)一步開發(fā)和應(yīng)用。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 色譜條件

色譜柱：AgilentC18（5μm，150mm×4.6mm）；柱溫：25℃；流動相：甲醇 - 水（40：60）；流速：1.0mL·min-1；進(jìn)樣量：5μL；檢測波長：270nm；保留時間：15min。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制[3]

準(zhǔn)確稱取刺五加苷B標(biāo)準(zhǔn)品5mg，置于50mL容量瓶中，加入甲醇溶解，定容。用移液管分別吸取對照液 0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL，置于 10mL容量瓶中，分別加入甲醇定容至刻度，搖勻，按1.1色譜條件分別進(jìn)樣，記錄色譜圖，測定峰面積。以進(jìn)樣量（X）為橫坐標(biāo)，峰面積值（Y）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程：Y=246794X+2783.7（r2=0.9997）。

1.2樣品的制備

取刺五加干燥莖皮，粉碎（過60目），超聲提取，離心，濃縮，干燥得粗提取物。選取料液比，乙醇濃度，時間和超聲功率作為單因素實(shí)驗(yàn)的考察對象，采用L9（34）正交實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化。

1.3 樣品的測定

稱取0.010g提取物，甲醇溶解，50mL容量瓶中定容。取5μL注入液相色譜儀中，測得峰面積，按回歸方程計(jì)算刺五加苷B的含量，并計(jì)算其提取率。

1.4 刺五加苷B的液相色譜圖

圖1、2分為刺五加標(biāo)準(zhǔn)品和提取物的液相色譜圖。

由圖1、2可以看出，提取物與標(biāo)準(zhǔn)品的保留時間相同，證明所提物質(zhì)是刺五加苷B。

圖1 刺五加苷B標(biāo)準(zhǔn)品的HPLC圖譜Fig.1 HPLC chromatogram of Syringin standard sample

圖2 刺五加提取物的HPLC圖譜Fig.2 HPLC chromatogram ofextractive ofacanthopanax

2 結(jié)果與討論

2.1 單因素對刺五加苷B提取率的影響

2.1.1 料液比對刺五加苷B提取率的影響（圖3）

圖3 料液比對提取率的影響Fig.3 Effectof fluid ratio on extraction rate

由圖3可見，當(dāng)料液比超過1∶15時，提取率的增加趨于平緩，說明刺五加苷已基本溶出，再增加料液比，不但提取率變化不大，還會給后續(xù)工作增加困難，所以料液比選擇1∶15。

2.1.2 乙醇濃度對刺五加苷B提取率的影響（圖4）

由圖4可見，隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增加，提取率呈明顯的遞減趨勢，主要是由于超聲波在水中的傳遞性較好，因此，選擇水作為提取劑。

圖4 乙醇濃度對提取率的影響Fig.4 Effectofethanol concentration on extraction rate

2.1.3 提取時間對刺五加苷B提取率的影響（圖5）

圖5 時間對提取率的影響Fig.5 Effectof time on extraction rate

由圖5可見，提取時間增長，提取率呈遞增趨勢，但在60min后，遞增的趨勢減弱，主要是由于超聲時間較短時，刺五加苷不易溶出，但時間過長提取率增加不明顯，綜合考慮選取60min為提取時間。2.1.4 超聲功率對刺五加苷B提取率的影響（圖6）

圖6 功率對提取率的影響Fig.6 Effectof power on extraction rate

由圖6可見，隨著超聲功率的增大，提取率明顯增加，但當(dāng)功率大于750W時，增加趨勢較弱，主要是因?yàn)楣β侍。?xì)胞破碎不完全，功率太大會破壞刺五加苷B的結(jié)構(gòu)，不利于提取，因此選擇功率為750W。

2.2 提取條件的優(yōu)化

根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)論設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化[4]提取條件，采用L9（34）的設(shè)計(jì)方法，分別討論不同的料液比，乙醇濃度，提取時間及超聲功率對刺五加苷B提取率的影響，確定最佳的提取條件。具體方案見表1。

表1 正交實(shí)驗(yàn)因素水平表Tab.1 Level table oforthogonal factor

表2 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果表Tab.2 Resultsoforthogonal test

結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)中影響刺五加苷B提取率的主次因素分別為乙醇濃度〉超聲功率〉浸提時間〉料液比，最佳工藝條件為A3B1C2D1即料液比為1∶20，以水為浸提劑，時間60min,超聲功率650W，此條件下刺五加苷的提取率為3.68%。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)采用超聲波法提取刺五加苷B，在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用正交實(shí)驗(yàn)對提取條件進(jìn)行優(yōu)化，得到最佳提取工藝為：料液比為1∶20，以水為浸提劑，時間60min,超聲功率650W，此條件下刺五加苷B的提取率為3.68%。超聲波法較其它常規(guī)方法具有提取時間短，溫度低，提取率高的優(yōu)點(diǎn)，它加速了提取的進(jìn)程，可以避免高溫對目標(biāo)產(chǎn)物的破壞，達(dá)到更理想的提取效果。

［1］吳立軍,鄭健,姜寶虹,等.刺五加莖葉化學(xué)成分［J］.藥學(xué)學(xué)報,2006,34（4）:294-296.

［2］李慶勇,付玉杰.超聲波法提取刺五加中丁香苷的研究［J］.植物研究,2003,（2）:182-184.

［3］袁曄蓉,李強(qiáng).刺五加苷的制備及其含量測定［J］.遼寧中醫(yī)雜志,2007,34（6）:809-811.

［4］伍娟,沈平,沈永嘉.均勻設(shè)計(jì)優(yōu)選微波輔助萃取刺五加中有效成分的研究［J］.中成藥,2003,25（1）:11.

R284；O644.3

A

1002-1124（2011）01-0050-03

2010-11-09

高 冷（1963-），男，吉林省，副教授，碩士學(xué)位，主要從事天然產(chǎn)物研究。