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        白掌的組培與快繁技術(shù)

        2011-09-12 02:09:36江金蘭羅慶國李永清
        浙江農(nóng)業(yè)科學(xué) 2011年5期
        關(guān)鍵詞:葉柄外植體種苗

        江金蘭,葉 煒,羅慶國,李永清

        (福建省三明市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所,福建 沙縣 360059)

        白掌 (Spathiphyllum floribundum),又名白鶴芋、苞葉芋、一帆風(fēng)順、和平芋,屬天南星科苞葉芋屬多年生常綠草本觀葉植物,由于白掌花葉兼美,輕盈多姿,生長旺盛,且又耐陰,故深受人們的青睞,常用于室內(nèi)綠化美化裝飾[1]。白掌不僅是優(yōu)良的觀葉植物,它還可以抑制人體呼出的廢氣如氨氣和丙酮,同時(shí)它也可以過濾空氣中的苯、三氯乙烯和甲醛,它的高蒸發(fā)速度可以防止鼻粘膜干燥,使患病的可能性大大降低[2]。白掌常用分株和播種繁殖,年繁殖系數(shù)低,遠(yuǎn)不能滿足商品化生產(chǎn)的要求,因此大規(guī)模生產(chǎn)常采用組織培養(yǎng)法繁殖,增殖迅速,株叢整齊,是種苗生產(chǎn)的最佳途徑。

        1 材料與方法

        材料從三明市農(nóng)科所引進(jìn),試驗(yàn)于2008年在本單位生物中心實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行,選擇生長健壯,無病蟲害的白掌側(cè)芽、葉片、葉柄為外植體。

        從母株上剪取側(cè)芽 (母株少澆水,土壤保持干燥),用清水將芽表面徹底沖洗干凈,剪去外層的苞葉,先用75%的酒精浸30 s后,再用0.1%的升汞浸泡8 min(期間不停的振蕩)后,用無菌水沖洗4~5次,備用。將側(cè)芽的葉片、葉柄剪去,側(cè)芽接種于側(cè)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基 (1) -(4)誘導(dǎo)叢生芽,剪下的葉片、葉柄接種于葉片、葉柄誘導(dǎo)培養(yǎng)基 (5)-(8)誘導(dǎo)愈傷組織,葉柄切成1 cm左右,葉片切成1 cm×1 cm左右,葉片的背面用刀片劃幾刀。為了避免交叉污染,每瓶培養(yǎng)基接種一個(gè)外植體。每種培養(yǎng)基接種40個(gè)樣本,定期觀察側(cè)芽、愈傷組織的萌發(fā)情況、不定芽的數(shù)量,生根的株數(shù),以比較不同培養(yǎng)基的培養(yǎng)效果。

        誘導(dǎo)培養(yǎng)基。側(cè)芽誘導(dǎo)不定芽:(1)MS+6-BA 5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1;(2)MS+6-BA 3 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1;(3)1/2MS+6-BA 5 mg·L-1+NAA 0.5 mg· L-1;(4)MS+6-BA 1 mg·L-1+KT 3 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1。葉片、葉柄誘導(dǎo)愈傷組織:(5)1/2MS+6-BA 5 mg·L-1+NAA 0.2 mg · L-1+2,4-D 0.4 mg·L-1;(6)MS+6-BA 5 mg· L-1+NAA 0.2 mg·L-1+2,4-D 0.4 mg·L-1;(7)MS+6-BA 3 mg·L-1+NAA 0.2 mg · L-1+2,4-D 0.2 mg·L-1;(8)MS+2,4-D 2 mg·L-1。增殖培養(yǎng)基:(9)MS+6-BA 2 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1;(10)MS。生根培養(yǎng)基:(11)1/2MS+IBA 0.5 mg·L-1+AC 0.5 g·L-1;(12)1/2 MS+NAA 0.2 mg·L-1+AC 0.5 g·L-1。pH 為 5.8,培養(yǎng)溫度為(25±1)℃,光照強(qiáng)度1 500~2 000 lx,光照為每天14 h,瓊脂粉 5.5 g·L-1。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 不定芽與愈傷組織的誘導(dǎo)

        將側(cè)芽的葉片、葉柄剪去,側(cè)芽接種于側(cè)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基 (1) -(4),剪下的葉片、葉柄接種于葉片、葉柄誘導(dǎo)培養(yǎng)基 (5) - (8),20 d后側(cè)芽萌動(dòng),培養(yǎng)基 (1)中萌發(fā)的芽較壯,葉色濃綠,表明側(cè)芽誘導(dǎo)不定芽時(shí)MS較1/2MS好,分裂素6-BA比KT誘導(dǎo)率更高,且以5 mg L-1為宜。葉片、葉柄40 d后邊緣出現(xiàn)少量愈傷組織,60 d后愈傷組織萌發(fā)不定芽,培養(yǎng)基 (6)為最適宜 (表1),通過愈傷組織萌出不定芽的時(shí)間較側(cè)芽長,且變異率更高,故本研究以側(cè)芽誘導(dǎo)不定芽方式為主。

        表1 不同外植體在不同培養(yǎng)基上的出芽情況

        2.2 不定芽的增殖

        將側(cè)芽誘導(dǎo)的不定芽接種于增殖培養(yǎng)基 (9)-(10)中,在種苗生產(chǎn)過程中,9代以前以 (9)為主,分裂素6-BA的量慢慢降低,9代以后以不加激素的空白培養(yǎng)基 (10)為主,每隔30 d左右繼代1次。結(jié)果 (表2)培養(yǎng)基 (9)的增殖倍數(shù)達(dá)3.83,培養(yǎng)基 (10)的增殖倍數(shù)為1.93。

        表2 不同培養(yǎng)基對叢生芽增殖的影響

        2.3 不定芽的生根

        將增殖培養(yǎng)中2 cm以上的無根苗切下接種于生根培養(yǎng)基 (11) - (12),7 d后近基部有小根長出,30 d后生根培養(yǎng)基 (11)生根率最高,達(dá)100.0%(表 3)。

        表3 不同培養(yǎng)基的生根效果

        2.4 煉苗與移栽

        生根培養(yǎng)30 d后,將試管苗煉苗1~2 d,洗凈根部培養(yǎng)基,用1 000倍液的甲基托布津浸泡5 min后,移栽至裝有泥炭土的穴盤中,把移栽苗放在溫室栽培架上,移栽后澆透水,覆蓋薄膜保濕,保持相對濕度90%以上,遮蔭70% ~80%,7 d后掀開薄膜,增加澆水次數(shù),保持苗床濕潤,15 d后開始施肥噴藥,以后每7~10 d為1周期,藥劑防治以1 000倍液的甲基托布津或多菌靈噴霧,施肥以花多多2 000倍液噴施,3個(gè)月后可作為穴盤苗出售。

        3 小結(jié)與討論

        側(cè)芽最適宜的培養(yǎng)基為 MS+6-BA 5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1,葉片、葉柄最適宜的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為 MS+6-BA 5 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+2,4-D 0.4 mg·L-1,繼代增殖培養(yǎng)基9代以前以MS+6-BA 2 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1為宜,生根培養(yǎng)基以 1/2 MS+IBA 0.5 mg·L-1+AC 0.5 g·L-1為宜。

        在外植體的消毒過程中,側(cè)芽相對于用葉片、葉柄困難,在建立無菌系的過程中,用側(cè)芽誘導(dǎo)不定芽相對于用葉片、葉柄誘導(dǎo)愈傷組織產(chǎn)生不定芽容易,且變異率更低。

        在試驗(yàn)和生產(chǎn)的過程中發(fā)現(xiàn),白掌較容易生根,省去生根培養(yǎng)階段,把增殖階段的有根苗直接移栽,可以大大的降低生產(chǎn)成本,但未經(jīng)過生根培養(yǎng)的移栽苗,種苗的整齊度不一致,因此對污染率及種苗整齊度的控制仍然是生產(chǎn)過程中應(yīng)把握的重點(diǎn)。

        [1]譚文澄,戴策剛.觀賞植物組織培養(yǎng)技術(shù) [M].北京:中國林業(yè)出版社,2000:84-141.

        [2]余亞白,陳源,賴呈純,等.室內(nèi)空氣凈化植物的研究與利用現(xiàn)狀及應(yīng)用前景 [J].福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2006,21(4):425-429.

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