張廣波，周麗杰，曹 笠※

(1.大連市第三人民醫(yī)院檢驗科，遼寧大連 116022;2.遼河油田第二職工醫(yī)院檢驗科，遼寧盤錦 124010)

迄今，尿細菌培養(yǎng)仍然是確診尿路感染的金標準，但是從患者留取尿液標本到獲取檢驗報告需3～5 d的時間，將會延緩對尿路感染的診斷和治療［1］。UF-1000i型全自動尿沉渣分析儀(簡稱UF-1000i)，尿化學分析儀測定亞硝酸鹽、白細胞酯酶和尿沉渣鏡檢診斷也是檢測尿路感染的有意義的指標。UF-1000i型全自動尿沉渣分析儀采用了流式細胞技術和熒光染色的方法對尿液中的有形成分進行定量分析，較鏡檢法敏感。干化學干擾因素較多影響結(jié)果的可靠性。顯微鏡檢查作為傳統(tǒng)方法既費時又難以標準化，人為影響因素多。為了探討聯(lián)合應用UF-1000i、干化學法、顯微鏡鏡檢在診斷尿路感染上的臨床應用價值，本研究對220份潔凈中段尿標本分別進行UF-1000i和尿干化學分析儀及顯微鏡檢測，將結(jié)果與定量尿細菌培養(yǎng)結(jié)果作了比較。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標本來源 隨機抽取2010年本院門診及住院患者中疑似尿路感染的患者尿液標本220份，患者年齡患者年齡18～70歲，男性標本102份，女性標本118份。

1.1.2 采集方法 用潔凈一次性尿杯留取中段尿，分裝3個試管，每管10 mL。前兩管按儀器操作規(guī)程在UF-1000i和尿化學分析儀進行分析測定，另一管離心后進行尿沉渣顯微鏡檢查及細菌培養(yǎng)。

1.1.3 儀器和試劑 UF-1000i(日本 Sysmex公司產(chǎn)品);尿十項干化學分析儀(德國寶靈曼公司生產(chǎn)的Miditron JuniorlI型，試條為Combur10 TestM試帶條);血平板購于上海伊華醫(yī)學科技有限公司;OLYUSCMPX-31顯微鏡。

1.1.4 質(zhì)控 質(zhì)控品為廠家提供的原裝配套產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 UF-1000i檢測標本 UF-1000i進行每日質(zhì)控，數(shù)據(jù)正常時開始檢測，按儀器說明嚴格正規(guī)操作，分裝后的第一管尿液標本在UF-1000i檢測系統(tǒng)進行檢測。將進樣針插入含充分混勻樣品的試管，按進樣開關，儀器自動吸取800 μL樣品，分析各種參數(shù)，打印分析數(shù)據(jù)。記錄細菌(≥2750/μL為陽性檢出)和白細胞(≥20/μL為陽性檢出)。

1.2.2 尿干化學分析儀檢測標本 第二管尿液標本在尿化學分析儀檢測系統(tǒng)進行檢測，整個過程在2 h內(nèi)完成，并按照儀器的操作規(guī)程要求進行操作。亞硝酸鹽陽性(f+1)或白細胞酯酶陽性(≥1+)作為尿路感染的陽性標準。

1.2.3 顯微鏡檢測 取另一管尿液標本，以相對離心力400×g離心5 min，然后手持離心管45°～90°吸棄上清液，保留0.2 mL沉渣量，輕輕搖勻，用一次性滴管取1滴(20 μL)置于清潔載玻片上，加蓋玻片，于高倍鏡下連續(xù)計數(shù)至少10個視野中白細胞數(shù)，分別取其平均值，所有操作在2 h內(nèi)完成。

1.2.4 定量尿細菌培養(yǎng) 用5 μL定量接種環(huán)取充分混勻的尿液分別接種血平板和沙氏培養(yǎng)基，放37℃溫箱內(nèi)孵育18～24 h，取出作菌落計數(shù)，凡革蘭陰性菌≥105cfu/mL，革蘭陽性菌≥104cfu/mL為定量尿細菌培養(yǎng)結(jié)果陽性，若有2種以上雜菌生長則被視為污染，重新送檢。

1.3 統(tǒng)計學方法 統(tǒng)計評價聯(lián)合應用UF-1000i型全自動尿沉渣分析儀和尿干化學分析、顯微鏡鏡檢和尿細菌培養(yǎng)結(jié)果，將所得資料進行統(tǒng)計學處理，組間比較用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 三種方法的檢測結(jié)果 220例尿液標本中，尿沉渣細菌培養(yǎng)陽性92例，陽性率42%，陰性128例，陰性率58%;UF-1000i陽性114例，陽性率52%，陰性106例，陰性率48%;干化學檢測陽性76例，陽性率35%，陰性144例，陰性率65%。

2.2 UF-1000i與定量尿細菌培養(yǎng)結(jié)果的比較UF-1000i檢測白細胞、細菌與定量尿細菌培養(yǎng)的結(jié)果兩者之間的差異有統(tǒng)計學意義(χ2=2.21，P＜0.05)(表1)。UF-1000i有較高的靈敏度(82.6%)，但是，假陽性率非常高(29.7%)。

表1 UF-1000i與定量尿培養(yǎng)結(jié)果的比較

2.3 干化學檢測與定量尿細菌培養(yǎng)結(jié)果的比較干化學檢測在診斷尿路感染中(與定量尿細菌培養(yǎng)的結(jié)果比較)有較高的假陰性率(28.2%)，但有較高的特異度(92.2%)。兩者之間的差異無統(tǒng)計學意義(χ2=1.23，P ＞0.05)(表2)。

表2 干化學檢測與定量尿培養(yǎng)結(jié)果的比較

2.4 鏡檢與定量尿細菌培養(yǎng)結(jié)果的比較 鏡檢靈敏度較低(56.5%)，兩者之間的差異無統(tǒng)計學意義(χ2=0.69，P ＞0.05)(表3)。

表3 鏡檢與定量尿培養(yǎng)結(jié)果的比較

3 討論

目前應用于臨床尿液分析的方式主要有全自動尿沉渣分析儀法、干化學法及尿顯微鏡鏡檢法，由于各實驗室之間的差異，尿液分析模式多種多樣。為此，不合理的分析模式影響了尿液分析的質(zhì)量，這樣將影響臨床醫(yī)師對尿液檢測報告的分析和判斷。事實上，目前所采用的三種檢測方法各有優(yōu)缺點。UF-1000i型全自動尿沉渣分析儀將尿液標本進行稀釋和染色后，運用流式細胞計數(shù)和電阻抗技術，獲得尿有形成分的前向散射光信號和前向熒光信號，前向散射光信號反映細胞體積大小，前向熒光信號反映細胞染色質(zhì)的大小，從而得到尿有形成分的大小、橫斷面、染色成分、染色部分的長度和體積的信息，分類尿有形成分。細菌由于體積小并含有DNA和RNA，所以前向散射光強度要比紅、白細胞弱，但熒光強度要比紅細胞強，又比白細胞弱，因此可以從紅細胞、白細胞、上皮細胞、管型等尿有形成分中將細菌區(qū)分開來，并且可定量顯示。但其結(jié)果受到細菌種類、菌體大小、標本放置時間等因素的影響。尿液中的淋巴細胞、單核細胞、小圓上皮細胞、個體較大的精子等情況的出現(xiàn)都會影響UF-1000i白細胞計數(shù)檢測的準確性。這導致UF-1000i檢測白細胞和細菌是高敏感性和低特異性的。

本實驗中干化學法檢測的靈敏度僅為28.3%，假陰性率高達71.7%，特異度為92.2%，提示尿干化學分析儀對亞硝酸鹽的測定是特異的，但是如果飲食中缺乏亞硝酸鹽，或者有些細菌不含能引起硝酸鹽還原為亞硝酸鹽的還原酶［2］，或者尿液沒有在膀胱中存留足夠長時間(4 h以上)以完成硝酸鹽向亞硝酸鹽的轉(zhuǎn)變等，都會引起假陰性。干化學法亞硝酸鹽試驗靈敏度約為0.05 g/L［3］，其靈敏度較低，以致假陰性較高。

本研究把UF-1000i和干化學法均陽性的標本，經(jīng)尿培養(yǎng)全都發(fā)現(xiàn)有細菌。證明UF-1000i和干化學法都陽性的標本涂片染色鏡檢敏感性低的原因可能是由于標本混勻不充分，涂片量不足或染色過程中沒有充分固定而導致細菌丟失，也可能由于沉渣中有大量雜物掩蔽難以辨認細菌而造成。

從本實驗可見，多數(shù)標本UF-1000i和干化學法、鏡檢3種方法檢測結(jié)果較一致，在不相符的標本中，UF-1000i陽性率較高，UF-1000i易將小圓上皮細胞、滴蟲等誤認為白細胞。而干化學法不能檢出淋巴細胞，且干擾因素多，某些臨床用藥可引起干化學法假陰性，而污染甲醛和高濃度膽紅素等可以引起干化學法假陽性［4］，差異較大，不能反映治療前后細菌的改變，因而在診斷尿路感染及治療效果時，UF-1000i更靈敏、有效。

UF-1000i法、干化學法兩法結(jié)合更適合于健康普查篩選。中華醫(yī)學會經(jīng)過研究初步篩選標準［5］，即在干化學試紙質(zhì)量合格，尿液分析儀運轉(zhuǎn)正常的情況下，測定結(jié)果中的紅細胞、白細胞、蛋白質(zhì)及亞硝酸鹽全部為陰性時可免去顯微鏡檢查，但在腎臟疾病，不論干化學結(jié)果如何都應作沉渣鏡檢。而尿沉渣檢查對各種疾病(如腎臟、泌尿系統(tǒng)疾病等)有重要臨床意義，而如每個尿標本都鏡檢又極大地浪費了實驗時間，降低實驗室工作效率，所以對那些干化學法、UF-1000i法都正常的尿液標本，可采用抽樣鏡檢或其他方法來檢查。如此通過干化學法、UF-1000i法、鏡檢法建立陽性標本報警系統(tǒng)，檢驗人員可多化時間在陽性標本上。

［1］ 婁崢，胡曉波，蔣燕群，等.UF-100尿液分析儀篩查尿路感染臨床意義的探討［J］.檢驗醫(yī)學，2004，19(1):54.

［2］ 王春燕，張森發(fā).sysmexVF100尿沉渣分析儀對尿路感染療效的監(jiān)測［J］.上海醫(yī)學檢驗雜志，2000，15(2):80.

［3］ 葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程［M］.3版.南京:東南大學出版社，2006:290.

［4］ 叢玉隆，馬俊龍.尿液干化學分析與顯微鏡檢查［J］.中華醫(yī)學檢驗雜志，1997，20(3):135-137.

［5］ 冠麗筠，陳宏礎.臨床基礎檢驗學［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1989:136.