韓黎麗，劉 宇 ，鄧文英，陳小兵，李 寧，羅素霞

(1鄭州大學基礎醫(yī)學院，鄭州 450000;2鄭州大學附屬腫瘤醫(yī)院)

cadherin家族是由一系列結(jié)構(gòu)和功能相似的單鏈跨膜糖蛋白組成，按其最初來源分為上皮型、神經(jīng)型和胎盤型3種，主要參與介導鈣離子依賴的同型細胞間的黏附。研究發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)型鈣黏附蛋白(N-cadherin)可促使癌細胞從癌組織塊上脫離及癌細胞與內(nèi)皮或基質(zhì)成分黏附，在腫瘤形成的過程中有助于血管形成及上皮細胞—間質(zhì)細胞的遷移，從而使腫瘤細胞更加富于侵襲性，易于轉(zhuǎn)移［1～3］。2001～2005年，我們采用免疫組織化學的方法檢測了98例大腸腺癌組織以及10份癌旁組織中N-cadherin表達情況，并分析其表達與臨床病理的關系。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 98份大腸癌組織標本(觀察組)，患者男63例，女35例;年齡32～76歲，平均56.3歲。均經(jīng)手術(shù)病理檢查證實診斷。組織學分級:Ⅰ級(高分化)34例，Ⅱ級(中等分化)38例，Ⅲ級(低分化)26例。根據(jù)2003版美國腫瘤聯(lián)合會(AJCC)和國際抗癌聯(lián)盟(UICC)大腸癌TNM臨床分期標準，Ⅰ期15例，Ⅱ期49例，Ⅲ期34例。術(shù)前均未接受放、化療或其它特殊治療。對照組為10例正常大腸上皮組織(取自手術(shù)切除標本的兩殘端，距癌組織3 cm以上)，經(jīng)病理證實為分化良好的腺上皮及少量固有層成分。

1.2 N-cadherin檢測 N-cadherin鼠抗人單克隆抗體均購自美國Abcam公司，工作濃度均為1∶110;PV-9000二步法免疫組織化學檢測試劑盒、DAB顯色增強劑購自北京中杉生物技術(shù)有限公司。兩組標本甲醛固定，石蠟包埋，行HE染色。用已知表達N-cadherin的精原細胞瘤組織切片作陽性對照;以未經(jīng)免疫的鼠IgG代替一抗作為陰性對照;以PBS代替一抗作為空白對照。染色結(jié)果由3名醫(yī)師雙盲評價，每例至少評價5個高倍鏡視野，每個視野觀察細胞數(shù)不少于200個。將胞質(zhì)著色判為陽性，按陽性細胞所占百分比及著色深淺判定結(jié)果。細胞染色:細胞無著色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。按陽性細胞數(shù)百分比評分:0分，無陽性細胞;1分，陽性細胞＜10%;2分，陽性細胞為10% ～50%;3分，陽性細胞＞50%。取兩項評分的乘積作為終評分:0分為陰性或弱陽性，1分為中度陽性，2分為強陽性，≥1分為陽性。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件。兩個有序變量之間的聯(lián)系用Spearman相關分析;分類變量之間的比較用χ2檢驗。檢驗水準α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 N-cadherin表達 觀察組N-cadherin陽性率為71.4%，對照組未見N-cadherin表達(P＜0.01)。

2.2 N-cadherin的表達與大腸腺癌臨床病理特征的關系 見表1。

表1 N-cadherin表達與大腸腺癌臨床病理特征的關系

3 討論

N-Cadherin 基因定位于 18q11.2［4］，表達相對分子質(zhì)量約120 kD的單鏈跨膜糖蛋白。研究發(fā)現(xiàn)，N-cadherin蛋白在胚胎的發(fā)育以及多種生物學過程(消化道形成、神經(jīng)突觸的形成以及調(diào)節(jié)垂體后葉的活動)中起重要作用［5～7］，被認為是一種潛在的促癌基因。

本研究發(fā)現(xiàn)，N-cadherin在大腸腺癌細胞的胞質(zhì)均有不同程度表達。其表達水平與大腸腺癌患者年齡、性別、腫瘤位置、腫瘤大小、浸潤深度以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況無關，但與腫瘤的TNM分期以及組織學分級呈正相關，即腫瘤的臨床分期越高，腫瘤細胞的分化程度越低，N-cadherin的表達越高。其促進腫瘤侵襲及轉(zhuǎn)移的可能機制:①使表皮生長因子受體(EGFR)的作用持續(xù)增強［8］。EGFR是一種具有酪氨酸激酶特性的生長因子受體，當表皮生長因子與之結(jié)合后可刺激細胞的分裂和增殖，從而促進腫瘤形成。②直接作用于成纖維細胞生長因子受體，調(diào)節(jié)腫瘤細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移［9］。③增加惡性T細胞瘤對上皮細胞的黏附力，使其更容易發(fā)生轉(zhuǎn)移［10］。④激活MAPKERK信號轉(zhuǎn)導系統(tǒng)，誘導MMP-9表達，促進腫瘤血管的形成，使腫瘤易于生長和轉(zhuǎn)移。

綜上所述，N-cadherin參與了大腸腺癌的浸潤和轉(zhuǎn)移，有望成為大腸癌治療的新靶點。

［1］Suyama K，Shapiro I，Guttman M，et al.A signaling pathway leading to metastasis is controlled by N-cadherin and the FGF receptor［J］.Cancer cell，2002，2(4):301-314.

［2］Jaggi M，Nazemi T，Abrahams NA，et al.N-cadherin switching occurs in high Gleason grade prostate cancer［J］.The Prostate，2006，66(2):193-199.

［3］Nagi C，Guttman M，Jaffer S，et al.N-cadherin expression in breast cancer:correlation with an aggressive histologic variant--invasive micropapillary carcinoma［J］.Breast Cancer Res Treat，2005，94(3):225-235.

［4］Tran NL，Nagle RB，Cress AE，et al.N-cadherin expression in human prostate carcinoma cell lines.An epithelial-mesenchymal transformation mediating adhesion with stromal cells［J］.Am J Pathol，1999，155(3):787-798.

［5］Garcia-Castro MI，Vielmetter E，Bronner-Fraser M.N-cadherin，A cell adhesion molecule involved in establishment of embryonic left right asymmetry［J］.Science，2000，288(5468):1047-1051.

［6］Tanaka H，Shan W，Phillips G，et al.Molecular modification of N-cadherin in response to synaptic activity［J］.Neuron，2000，25(13):93-107.

［7］Rubinek T，Yu R，Hadani M，et al.The cell adhesion molecules N-cadherin and neural cell adhesion molecule regulate human growth hormone:a novel mechanism for regulating pituitary hormone secretion［J］.J Clin Endocrinol Met，2003，88(8):3724-3730.

［8］Suyama K，Shapiro I，Guttman M，et al.A signaling pathway leading to metastasis is controlled by N-cadherin and the FGF receptor［J］.Cancer Cell，2002，2(7):301-314.

［9］Wheelock MJ，Johnson KR.Cadherin-mediated cellular signaling［J］.Curr Opin Cell Biol，2003，15(5):509-514.

［10］Makagiansar IT，Yusuf-Makagiansar H，Ikesue A，et al.N-cadherin involvement in the heterotypic adherence of malignant Tcells to epithelia［J］.Mol Cell Biochem，2002，233(1-2):1-8.