宋天增,馮 靜,曾憲垠,張 明,蔣艷君,蔣忠榮,李 平

(1.四川省甘孜藏族自治州畜牧業(yè)科學(xué)研究所,四川康定 626000;2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與理學(xué)院,四川雅安 625014; 3.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院,四川雅安 625014)

牦牛人工授精技術(shù)是人工采集公牦牛精液,并經(jīng)過質(zhì)量檢查、稀釋處理(和冷凍)后 ,再用輸精器將精液輸入母牦牛的生殖道內(nèi)最容易受精的部位,卵子受精后經(jīng),母牦牛排出的妊娠,最終產(chǎn)下牦牛牛犢。

較黃牛和奶牛而言,牦牛任保持有野性的一面,性情兇猛,再加上受傳統(tǒng)飼養(yǎng)模式的影響,在牦牛的飼養(yǎng)管理上還沒有“去角”習(xí)慣,牦牛的采精技術(shù)和人工受精技術(shù)受到了很大的限制。

1 公牦牛的馴養(yǎng)

選擇優(yōu)良的公牦牛,每天有專門的技術(shù)人員對其添草加料、梳理被毛、按摩陰囊等方式與其親近;選擇合適的發(fā)情母牦牛做臺牛訓(xùn)練采精。

在公牦牛的馴養(yǎng)過程中,負(fù)責(zé)采精的技術(shù)人員(兼飼養(yǎng)員)不要對其抽打、不和獸醫(yī)一起為其打針輸液等。

2 用具的清洗和消毒

1) 人工授精備用的器械、藥品等需放置于清潔的廚柜或瓷盤內(nèi)。常用的器械、藥品等應(yīng)放在操作臺上的瓷盤內(nèi),用清潔的紗布蓋上。

2) 玻璃器皿使用后,經(jīng)自來水沖洗后,立即泡于0.1%新潔而滅溶液中;新購置或長期未使用過的玻璃器皿,用肥皂水或洗衣粉水刷洗干凈;如粘有污物或油垢,通過初步洗刷后,放入鉻酸洗液中浸泡數(shù)小時(shí),最后用自來水沖洗干凈,再用0.1%新潔而滅溶液浸泡0.5 h,之后用高壓過的蒸餾水或生理鹽水沖洗干凈。

器皿應(yīng)顯現(xiàn)光亮無水滴附著。玻璃器皿洗凈后,口向下倒置于架上,使水分充分流盡,器皿上復(fù)蓋3～4層清潔紗布,以防止塵土污染。

3) 玻璃輸精器、刻度吸管等通過洗凈之后,用70%的酒精消毒,再用高壓過的生理鹽水沖洗2～3遍。消毒過的輸精器只能為一頭母牛輸精,輸精完畢,必須按上法清洗、消毒,才能為另一頭母牛輸精。

4) 裝器械、用具的瓷盤,取顆粒精液的鑷子等,用酒精棉球擦拭消毒,最后用無煙火焰將酒精烤盡才能使用。

3 牦牛的采精方法

公牦牛在一歲左右就出現(xiàn)爬跨母牦牛的性行為,但此時(shí)沒有成熟精子產(chǎn)生,也不能夠使母牛受孕。公牦牛的性成熟時(shí)間是在兩周歲以后。公牦牛的使用年限可達(dá)10年左右,配種能力最旺盛的時(shí)間是3～7歲,以后逐漸減弱[1]。在自然交配的條件下,一頭公?？膳?5～20頭母牦牛。推廣牦牛的人工授精技術(shù)后,一頭公牛最多可配2 400頭左右母牦牛。

3.1 臺牛的選擇與保定

選擇體個(gè)適合公牦牛的發(fā)情母牦牛為臺牛,將發(fā)情母牦牛牽入保定架后,要拴系和保定好其頭部,保證其頭部不再左右或上下?lián)u擺以及大幅度的后驅(qū)擺動。

3.2 人工采精

按黃牛種公牛常規(guī)采精的方法,采用假陰道法進(jìn)行采精。假陰道的內(nèi)壓要黃牛和奶牛種公牛的稍大,假陰道內(nèi)壁溫度40～43℃[1]。

采精過程中,采精技術(shù)人員要做好自我防護(hù),小心公牦牛的角頂傷與腳踩傷。

4 牦牛的采精頻率

成年牦牛一般每周采精3次,隔日采精。青年牦牛射精量較成年牦牛少,采精次數(shù)應(yīng)當(dāng)酌減。也可1日連續(xù)2次采精,休息2～3日后再采精。

5 牦牛的精液品質(zhì)檢查

健康牦牛精液呈乳白色,無異味,精子活率為0.7～0.9,密度為8億～16億/mL,精子的畸形率為5%～8%,精液的PH為6.4～6.9[1]。牦牛的采精量一般為2～5 mL,若一天連續(xù)采精,則第二次采精量少于第一次。

6 母牦牛的發(fā)情鑒定

6.1 發(fā)情周期

母牦牛的發(fā)情周期很不一致,平均21 d,也有報(bào)道21.3 d、14.88 d,但是個(gè)體差異懸殊,最短者5～6 d,最長者 60 d以上,一般6～25 d占多數(shù)[2,3]。

母牦牛發(fā)情的癥狀不象普通牛那樣明顯。發(fā)情初期,外陰部略有充血腫脹,陰道粘膜充血呈粉紅色,這時(shí)僅有育成后備公牛追逐,壯齡公牛不追逐。發(fā)情10～15 h后,逐漸達(dá)到發(fā)情旺期,精神不安,興奮,吼叫,爬跨其它母牛,食欲減退,產(chǎn)奶量下降。陰唇腫脹并有粘液流出,常作舉尾排尿姿勢,陰戶頻頻擴(kuò)張,陰道濕潤潮紅,引誘公牛并接受交配。此后,發(fā)情征狀逐漸減弱,陰道粘液變濃,逐漸進(jìn)入休情期[4]。

6.2 發(fā)情持續(xù)期與排卵時(shí)期

母牦牛發(fā)情持續(xù)期與發(fā)情周期一樣不一致,平均為 41.6 h、51.0 h,個(gè)別短的 12 h,長的94～118 h,一般24～36 h。青年牦牛較正常,一般平均28 h,44 h;經(jīng)產(chǎn)牦牛不正常,為12～118 h。

母牦牛排卵時(shí)間,大約在發(fā)情終止后12 h,范圍5～36 h。黃體形成時(shí)間,約在排卵后 64 h,范圍30～120 h。

7 牦牛的輸精

7.1 發(fā)情母牦牛的保定

將發(fā)情母牦牛牽入保定架后,要拴系和保定好頭部,左右兩側(cè)(后驅(qū))各有一人保定,防止牛后軀擺動,保定穩(wěn)妥后方可輸精。如果有專門的保定架,將母牦牛牽入保定架內(nèi),可保定其頭部、腹部以及后驅(qū),輸精時(shí)將更安全。

7.2 輸精

母牦牛的子宮頸比普通牛的短,長約5 cm,子宮頸內(nèi)壁一般有3個(gè)大小不等的環(huán)狀皺裂,即子宮頸環(huán)[5]。

1) 清除直腸余糞輸精員將左手指甲剪短,銼平,左手臂戴上一次性長臂手套,并涂上肥皂水,將手指并成錐形,緩慢旋轉(zhuǎn)進(jìn)入肛門,掏出直腸糞便。

2) 把握子宮頸將左手伸入肛門,手撐展開掌心向下,按壓撫摸,隔著直腸在骨盆底部能觸摸到一個(gè)長約5 cm的質(zhì)地較硬的圓形棒狀物,且有環(huán)狀皺裂,這就是子宮頸,將子宮頸后端輕輕固定在手中。

3) 輸精呈45度向上插入輸精槍逐步擰轉(zhuǎn)輸精槍,之后呈水平沿陰道壁向前移動,這樣可避免進(jìn)入尿道口和膀胱,繼續(xù)使輸精槍向前,直到槍尖到達(dá)子宮頸口。兩手相互配合調(diào)整方向,使輸精槍緩慢穿越子宮頸的環(huán)狀皺壁,進(jìn)入子宮頸深部或子宮體,保持把握子宮頸的手,輕輕推動槍塞完全進(jìn)入槍筒。

輸精槍不要盲目插得太深,不論在何種情況下,都不能將精液送到超過子宮角彎曲部,以免影響精子獲能和損傷子宮內(nèi)膜,影響受精。在不能確認(rèn)卵泡發(fā)育側(cè)時(shí),盲目將精液輸?shù)锰?可能使排卵側(cè)無精子而使卵子無法受精,而導(dǎo)致配種失敗。

4) 輸精量:要求輸精劑量準(zhǔn)確,凍精顆粒1粒,解凍液2 mL,或細(xì)管凍精1支。解凍后精子或率在0.3以上的精液方可輸精。輸精要適時(shí),每一情期輸精2次,以早、晚各輸精一次為好。

8 牦牛人工授精的意義

1) 牦牛人工授精技術(shù)的應(yīng)用與推廣,極大地提高了優(yōu)良公牦牛的配種效率,擴(kuò)大了與配母牦牛的頭數(shù)。在自然交配的情況下,一頭公牦?？膳?5～20頭母牦牛。推廣牦牛的人工受精技術(shù)后,一頭公牛最多可配2 400頭左右母牦牛,成百上千倍地提高了公牦牛的利用效率,可減少飼養(yǎng)公牦牛的頭數(shù),降低了草場的載畜量,對高原草場的保護(hù)起到了積極的意義。

2) 擴(kuò)大了種公牦牛的配種范圍,加強(qiáng)了各地區(qū)之間的合作與交流,加快了地方牦牛品種的雜交改良步伐。精液冷凍保存技術(shù)的成功,使精液的傳播和運(yùn)輸不受時(shí)間、地域、國度的限制。

3) 加速了牦牛育種工作進(jìn)程和繁殖改良速度,加速了優(yōu)質(zhì)高效牦牛業(yè)的發(fā)展。

4) 提高了配種母牦牛的受胎率因?yàn)殛笈１窘慌浞N是陰道內(nèi)射精,精子到達(dá)受精部位要運(yùn)行很遠(yuǎn),而且要穿過許多障礙,導(dǎo)致精子大量死亡,到達(dá)受精部位的精子寥寥無幾,使受精率顯著降低。而人工授精是直接將公牦牛的精液輸入母牦牛的生殖道的最合適部位,使精子可以順利到達(dá)輸卵管的受精部位,提高了受精率。

人工授精所用精液均經(jīng)檢查合格,輸精過程中便于發(fā)現(xiàn)母牦牛繁殖障礙并及時(shí)采取相應(yīng)的措施進(jìn)行治療,又能克服公母牦牛自然交配中因體格相差太大而難于交配的困難。

5) 避免了生殖器官直接接觸造成的疾病傳播由于公牛不與母牛接觸,且人工授精有嚴(yán)格的技術(shù)操作規(guī)程,使參加配種的公母牛之間不會發(fā)生疾病的傳播。

[1] 王自科.天竺白牦牛精液冷凍試驗(yàn)[J].黑龍江動物繁殖, 2004,12(4):31-32.

[2] 朱世恩.家畜繁殖學(xué)(第五版)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社, 2009:102.

[3] 新農(nóng)村建設(shè)網(wǎng).牦牛繁殖生理特點(diǎn)[DB].http://www.huhhot.gov.cn/town/tex t.asp?id=4328&dm=011

[4] 牦牛的繁殖技術(shù)[DB].http://blog.bioon.net/user1/5569/ archives/2006/64382.shtml

[5] 李青旺.動物繁殖技術(shù)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2010:69-70.