鄭芳，朱雪松，李春雷，李志浩，陳莉莉，陳光輝（.湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬東風(fēng)醫(yī)院藥劑部，十堰市44008；.湖北醫(yī)藥學(xué)院，十堰市 44008）

頭孢替安（Cefotiam）為半合成的第2代廣譜頭孢菌素類抗生素，不僅對(duì)大多數(shù)革蘭陽性菌有效，而且對(duì)革蘭陰性菌作用較強(qiáng)，主要用于治療敏感菌所致的感染，如肺炎、支氣管炎、膽道感染、腹膜炎、尿路感染以及手術(shù)和外傷所致的感染和敗血癥等，尤其是對(duì)老年呼吸器官感染性疾病的療效確切[1，2]。鹽酸氨溴索（Ambroxol hydrochloride）是祛痰藥溴己新的體內(nèi)代謝產(chǎn)物，具有黏痰溶解作用，可使痰中黏多糖纖維分化裂解，稀化痰液，并能抑制支氣管黏膜酸性糖蛋白的合成而降低痰黏度，便于咳出，適用于痰液黏稠不易咳出者[3]。臨床上治療呼吸道感染性疾病常將2藥聯(lián)合應(yīng)用，但二者能否在同一輸液中配伍使用未見報(bào)道。為此，本試驗(yàn)根據(jù)臨床用藥濃度，采用反相高效液相色譜法，考察注射用頭孢替安與鹽酸氨溴索注射液在0.9%氯化鈉注射液中、室溫（（20±1）℃）下配伍0～8 h時(shí)的穩(wěn)定性，旨在為臨床安全、合理用藥提供參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Ultimate3000高效液相色譜儀，包括Ultimate3000泵、Ultimate3000二極管陣列檢測(cè)器、四元低壓混合系統(tǒng)、Chromeleon工作站（美國(guó)戴安公司）；pHS-3C型酸度計(jì)（上海藍(lán)凱儀器儀表有限公司）；AEU-210電子天平（日本島津公司）。

1.2 試藥

頭孢替安對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：130565-200501）；鹽酸氨溴索對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：100599-200502）；注射用鹽酸頭孢替安（商品名：海替舒，大元制藥株式會(huì)社，批號(hào)：A01457，規(guī)格：每支0.5 g）；鹽酸氨溴索注射液（商品名：沐舒坦，德國(guó)Boehringer Ingelheim公司，批號(hào)：S0389，規(guī)格：2 mL∶15 mg）；0.9%氯化鈉注射液（四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：A090811）；乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純，水為新制注射用水。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液配制

2.1.1 對(duì)照品溶液：準(zhǔn)確稱取頭孢替安對(duì)照品與鹽酸氨溴索對(duì)照品各適量，用S?。状缉U0.025 mol·L－1磷酸二氫鉀溶液＝4∶1）溶解并稀釋配制成頭孢替安濃度為0.996 mg·mL－1和鹽酸氨溴索濃度為0.748 mg·mL－1的對(duì)照品貯備液；將上述2種對(duì)照品貯備液用S稀分別稀釋5倍，即得頭孢替安與鹽酸氨溴索對(duì)照品溶液。

2.1.2 配伍溶液：將2支注射用鹽酸頭孢替安和1支鹽酸氨溴索注射液一同加入0.9%氯化鈉注射液100 mL中，搖勻，即得。2.1.3 樣品溶液：取與配伍溶液中同批號(hào)的注射用鹽酸頭孢替安2支，加入同批號(hào)0.9%氯化鈉注射液100 mL中，得頭孢替安樣品溶液；取同一批鹽酸氨溴索注射液1支，同法制成鹽酸氨溴索樣品溶液。

2.2 含量測(cè)定方法[4，5]

2.2.1色譜條件：色譜柱為Agilent HC-C18（150 mm×4.6 mm，5 μm），流動(dòng)相為乙腈（A）-0.025 mol·L－1磷酸二氫鉀溶液（B）（梯度洗脫程序：0→12 min，A 8%→33%），流速為1.0 mL·min－1，檢測(cè)波長(zhǎng)為260 nm（頭孢替安）、247 nm（鹽酸氨溴索），進(jìn)樣量為20 μL，柱溫為25℃。

2.2.2 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：在“2.2.1”項(xiàng)色譜條件下，分別進(jìn)樣“2.1”項(xiàng)下對(duì)照品溶液、配伍溶液和稀釋了50倍的配伍溶液，記錄色譜圖（見圖1）。結(jié)果理論板數(shù)按頭孢替安與鹽酸氨溴索峰計(jì)均不低于8 000，2主峰與相鄰峰之間的分離度不低于1.5，2主峰DAD匹配值均不低于999.93，說明2主峰為純峰。

圖1 高效液相色譜圖Fig 1 HPLC chromatograms

2.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：分別精密量取“2.1”項(xiàng)下頭孢替安與鹽酸氨溴索對(duì)照品貯備液各0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 mL，分別置于10 mL容量瓶中，用S稀稀釋至刻度，搖勻。在“2.2.1”項(xiàng)色譜條件下分別進(jìn)樣分析，記錄色譜。以峰面積（A）為縱坐標(biāo)，濃度（c）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得頭孢替安與鹽酸氨溴索的回歸方程分別為A替＝0.415 1c替+2.005 6（r＝0.999 3，n＝5），A氨＝0.529 9c氨+0.155 5（r＝0.999 4，n＝5）。結(jié)果表明，二者檢測(cè)濃度分別在49.6～398.4、37.4～299.2 μg·mL－1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2.4 精密度試驗(yàn)：分別進(jìn)樣“2.1.1”項(xiàng)下頭孢替安與鹽酸氨溴索對(duì)照品溶液20 μL，重復(fù)6次，結(jié)果頭孢替安峰面積RSD為0.44%（n＝6），鹽酸氨溴索峰面積RSD為0.48%（n＝6）。

2.2.5 重復(fù)性試驗(yàn)：取同一批樣品，按“2.1.2”項(xiàng)下配伍溶液配制方法平行制備12份，6份直接進(jìn)樣，記錄峰面積，測(cè)得鹽酸氨溴索RSD為0.88%（n＝6）；另6份分別稀釋50倍后進(jìn)樣，記錄峰面積，測(cè)得頭孢替安峰面積RSD為0.91%（n＝6）。

2.2.6 回收率試驗(yàn)：分別精密吸取鹽酸氨溴索對(duì)照品貯備液1.6、2.0、2.4 mL各3份，分置9個(gè)10 mL容量瓶中，用S稀稀釋至刻度，搖勻，進(jìn)樣；分別精密吸取頭孢替安對(duì)照品貯備液0.8、1.0、1.2 mL各3份，分置9個(gè)25 mL容量瓶中，用S稀稀釋至刻度，搖勻。再以“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定峰面積，代入回歸方程計(jì)算濃度（c），并計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝9）Tab 1Results of recovery test（sn＝9）

2.3 配伍穩(wěn)定性試驗(yàn)

2.3.1 外觀及pH值變化：取“2.1.2”項(xiàng)下配伍溶液適量，置于室溫（（20±1）℃）下，分別于0、1、2、4、6、8 h時(shí)觀察顏色變化并測(cè)定pH值，結(jié)果見表2。

表2 注射用鹽酸頭孢替安與鹽酸氨溴索注射液配伍后pH值、外觀及含量變化Tab 2 Appearance，pH value and content changes of cefotiam hydrochloride for injection withAmbroxol hydrochloride

2.3.2 相對(duì)百分含量變化：取“2.1.2”項(xiàng)下配伍溶液適量，于室溫（（20±1）℃）下放置，分別于0、1、2、4、6、8 h時(shí)直接進(jìn)樣，以“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定鹽酸氨溴索的峰面積；同上法取“2.1.2”項(xiàng)下配伍溶液適量，在各時(shí)間點(diǎn)即刻用S稀稀釋50倍后立即進(jìn)樣，測(cè)定頭孢替安的峰面積。以配伍0 h含量為100%計(jì)算藥物相對(duì)含量變化，結(jié)果見表2。

2.4 配伍結(jié)果

在室溫（（20±1）℃）下，注射用鹽酸頭孢替安與鹽酸氨溴索注射液在0.9%氯化鈉注射液中8 h內(nèi)，配伍液雖無色澄明、無氣泡產(chǎn)生及肉眼可見的沉淀生成，但顏色呈逐漸加深趨勢(shì)。由表2結(jié)果顯示，配伍液pH值與頭孢替安含量變化明顯。以上結(jié)果表明該配伍溶液不穩(wěn)定。

3 討論

由二極管陣列檢測(cè)器在200～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)分別對(duì)“2.1.1”項(xiàng)下的頭孢替安與鹽酸氨溴索對(duì)照品溶液色譜峰進(jìn)行在線紫外掃描，由掃描圖譜得知：頭孢替安與鹽酸氨溴索分別在260、247 nm波長(zhǎng)處有最大吸收。故筆者將該試驗(yàn)二者的檢測(cè)波長(zhǎng)分別定為260 nm和247 nm。

由于頭孢替安（10 mg·mL－1）與鹽酸氨溴索（0.15 mg·mL－1）的臨床用藥濃度差別大，所以二者含量不能同時(shí)測(cè)定，故筆者采取鹽酸氨溴索臨床用藥濃度直接進(jìn)樣，而頭孢替安需稀釋50倍后再進(jìn)樣來解決。

該試驗(yàn)采用梯度洗脫，使得頭孢替安與鹽酸氨溴索這2個(gè)極性差別較大的物質(zhì)在同一色譜條件下在較短的時(shí)間內(nèi)達(dá)到了分離；同時(shí)二極管陣列檢測(cè)器充分發(fā)揮其在配伍試驗(yàn)中的應(yīng)用（如對(duì)色譜峰純度的分析，檢測(cè)配伍過程中新產(chǎn)生的有紫外吸收的物質(zhì)，顯示一定色譜條件下產(chǎn)生的色譜峰的紫外掃描圖譜等）。

該試驗(yàn)采用反相高效液相色譜法分別測(cè)定頭孢替安與鹽酸氨溴索的含量，2主峰不僅在12 min內(nèi)完全洗脫，且與其他雜質(zhì)有效分離，同時(shí)2主藥分別在49.6～398.4 μg·mL－1和37.4～299.2 μg·mL－1濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回收率較高，且重現(xiàn)性較好，具有準(zhǔn)確、可靠、靈敏等特點(diǎn)。

該試驗(yàn)只考察了配伍液于室溫（（20±1）℃）下、8 h內(nèi)在0.9%氯化鈉注射液中配伍穩(wěn)定性，對(duì)其在其他溫度下、更長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)或其他溶媒中的配伍情況尚待進(jìn)一步研究。該試驗(yàn)的配伍研究?jī)H從配伍液外觀、pH值及含量這幾方面進(jìn)行考察，為使該配伍試驗(yàn)更完善，可進(jìn)一步考察配伍液的微粒變化。

該配伍液不穩(wěn)定，為了臨床用藥安全，建議臨床在必須聯(lián)合應(yīng)用以上2藥時(shí)，將2主藥分開靜脈滴注；配伍液0～1 h內(nèi)2主藥含量變化不大，故在先后使用同一輸液管路靜脈滴注2藥時(shí)，中間不需要0.9%氯化鈉注射液作為間隔。

[1] 陸 進(jìn)，李淑芳，馬秉智，等.頭孢替安與3種輸液的配伍穩(wěn)定性 [J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2008，28（11）：934.

[2] 胡忠杰，周蕾，苗佩宏.注射用鹽酸頭孢替安與木糖醇注射液的配伍穩(wěn)定性考察[J].中國(guó)藥房，2007，18（8）：599.

[3] 朱科明，李 申，楊 波，等.沐舒坦對(duì)呼吸系統(tǒng)的保護(hù)作用機(jī)制[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)·麻醉與復(fù)蘇分冊(cè)，2001，22（1）：49.

[4] 李順煒，袁孔現(xiàn)，李國(guó)忠，等.鹽酸氨溴索注射液與16種常用藥物配伍穩(wěn)定性考察[J].安徽醫(yī)藥，2008，12（5）：400.

[5] 周 蕾，苗佩宏，胡忠杰.注射用鹽酸頭孢替安與果糖注射液的配伍穩(wěn)定性考察[J].中國(guó)藥房，2007，18（29）：2 279.