林 建，薛曉康，王 露，劉 剛

(上?；ぱ芯吭?檢測中心，上海200062)

六六六、滴滴涕農(nóng)藥曾被廣泛使用，雖然禁用多年，但由于其降解半衰期長，土壤中很難降解，導(dǎo)致其在蔬菜、水果和中藥材中仍有檢出［1］。農(nóng)藥隨食物鏈進(jìn)入人體造成傷害，同時也形成了食品出口的貿(mào)易壁壘。傳統(tǒng)的農(nóng)藥殘留提取和凈化方法步驟繁瑣、耗時長，所需溶劑量大，對人及環(huán)境均造成不利影響［2－4］?；|(zhì)固相分散萃取(MSPD)是Barker等于1989年在固相萃取(SPE)的基礎(chǔ)上提出的一種前處理方法，符合現(xiàn)代人們對農(nóng)藥殘留分析的環(huán)境友好、健康安全和高效經(jīng)濟(jì)的3大要求［5－6］。目前有機(jī)氯農(nóng)藥分析方法主要以氣相色譜電子捕獲檢測器和質(zhì)譜法為主［7－10］?；|(zhì)固相分散萃取取樣量少，要求儀器靈敏度高;同時蔬菜樣品中含有的色素等成分容易對色譜分析造成干擾，因此采用氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行分析。我們結(jié)合基質(zhì)固相分散萃取和氣相質(zhì)譜聯(lián)用法，建立了一種快速、準(zhǔn)確的六六六和滴滴涕農(nóng)藥在蔬菜中的殘留檢測方法。

1 材料和方法

1.1 供試材料

儀器:Agilent7890A/5975C型氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀，EI源，帶分流/不分流進(jìn)樣器，Agilent質(zhì)譜工作站，美國Agilent公司;HP-5MS毛細(xì)管柱，30 m ×250 μm ×0.25 μm;勻漿機(jī)(GF-1，江蘇海門市貝其貝爾儀器制造有限公司);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(GG17，上海申生科技有限公司);馬弗爐;玻璃層析柱，直徑1.5 cm、長20 cm，柱底部自帶玻璃砂芯，上端附有30 mL貯液杯。

試劑:六六六、滴滴涕對照品均為100 mg·L－1，購于中國標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)開發(fā)公司標(biāo)樣部。無水硫酸鈉(450℃活化4 h，使用前130℃活化2 h);弗羅里硅土(150～250 μm，650℃ 活化6 h，使用前130℃活化2 h);酸性處理過的活性炭;正己烷、乙酸乙酯均為分析純，經(jīng)過全玻璃儀器蒸餾裝置重蒸。

其他必備的實驗室裝置、器皿及辣椒。

1.2 樣品前處理

稱取辣椒樣品約200 g，高速勻漿機(jī)勻漿后，準(zhǔn)確稱取1.0 g樣品于研缽中，加入2.0 g弗羅里硅土和2.0 g無水硫酸鈉，充分研磨至無顆粒狀樣品。在玻璃層析柱下面鋪2 cm左右無水硫酸鈉，1.0 g活性炭，再把上述研磨后樣品裝入柱中，再加入1 cm左右無水硫酸鈉。用10 mL正己烷預(yù)淋，再用正己烷/乙酸乙酯(V∶V為9∶1)30 mL清洗研缽和研錘，清洗液淋洗層析柱，收集淋洗液于250 mL平底燒瓶中，40℃下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，改用氮氣吹干，正己烷定容至1 mL待測。

1.3 GC-MS條件

色譜柱:HP-5MS毛細(xì)管柱 30 m×250 μm×0.25 μm，升溫程序:60℃(保持 1 min)，20℃·min－1升至200℃(保持0 min)，5℃·min－1升至240℃，10℃·min－1升至300℃(保持 5 min)。載氣:高純氦氣;流速:1 mL·min－1;不分流進(jìn)樣;進(jìn)樣口溫度:250℃;電離方式:電子轟擊，70 eV;離子源溫度:230℃;四極桿溫度:150℃;色譜質(zhì)譜接口溫度:280℃;質(zhì)譜掃描方式:選擇離子檢測(SIM)。

2 結(jié)果與分析

2.1 前處理方法的選擇

基質(zhì)固相分散實驗主要考慮到固相填料類型、固相與基質(zhì)比例、淋洗液類型及其體積的選擇。本實驗基本參照文獻(xiàn)進(jìn)行前處理［11］。但由于新鮮辣椒含水量較大，研磨過程中添加了2.0 g無水硫酸鈉;考慮其色素含量較多，為防止其干擾檢測，層析柱中加入少許活性炭以達(dá)到更好的凈化效果。

2.2 質(zhì)譜條件的選擇

通過全掃描方式(SCAN)對六六六和滴滴涕作總離子流圖(TIC)，然后針對質(zhì)譜中的碎片離子，選擇豐度相對較高、分子質(zhì)量較大的碎片離子，對測試樣品進(jìn)行GC-MSD-SIM選擇試驗。最終確定選擇離子作為定性和定量的特征目標(biāo)監(jiān)測離子。測定時根據(jù)參考物質(zhì)和待測樣品在SIM離子流圖中的峰面積，采用外標(biāo)法定量。表1為六六六、滴滴涕選擇離子檢測條件。

表1 六六六和滴滴涕農(nóng)藥選擇離子檢測條件

2.3 線性范圍及檢出限

準(zhǔn)確配制含量分別為0.01、0.05、0.1、0.5、1 mg·L－1的六六六和滴滴涕農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.3所述條件重復(fù)進(jìn)樣3次，以峰面積(y)對進(jìn)樣濃度(x)作線性回歸分析，結(jié)果表明六六六和滴滴涕農(nóng)藥在各自的線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好;以3倍基線噪音(S/N)來計算檢出限，得出其檢測限為 1.3～1.8 μg·L－1。其回歸方程、相關(guān)系數(shù)及檢出限如表2所示。

2.4 方法的回收率及精密度

在空白樣品中添加 0.05、0.1、0.5 mg·L－1的六六六和滴滴涕農(nóng)藥參考物質(zhì)，按照1.2的方法處理后測定其回收率，每個樣品重復(fù)3次，結(jié)果如表3所示。其平均回收率為76.5% ～101.9%，RSD為2.23%～7.23%，均符合農(nóng)藥殘留分析的要求。

表2 六六六、滴滴涕農(nóng)藥線性范圍及檢出限

表3 六六六和滴滴涕在辣椒樣品中的添加回收率

續(xù)表3

3 小結(jié)

由于蔬菜樣品往往含有大量水分和色素，因此在研磨過程中加入少量無水硫酸鈉以吸取水分，層析柱中加入少量活性炭吸附色素，減少雜質(zhì)對色譜分析的影響。

回收率及檢出限結(jié)果表明，基質(zhì)固相分散萃取結(jié)合氣相質(zhì)譜法用于蔬菜中六六六、滴滴涕農(nóng)藥的檢測，具有溶劑用量少、省時高效等特點，方法靈敏度高，重復(fù)性好，回收率高，可推廣用于蔬菜中其余有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留的檢測。

［1］趙華，胡秀卿，吳珉，等．基質(zhì)固相分散-加速溶劑萃取-氣相色譜法測定土壤中六六六和滴滴涕農(nóng)藥殘留［J］．浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008(3):339-441.

［2］余建新，胡小鐘，邵俊杰，等．大口徑毛細(xì)氣相色譜法測定油脂、果蔬中20種有機(jī)氯農(nóng)藥的殘留量［J］．色譜，2000，18(4):346-349.

［3］Colume A，Cardenas S，Gallego M，et al．Simplified method for the determination of chlorinated fungicides and insecticides in fruits by gas chromatography［J］．Chromatogr A，2000，882:193-203.

［4］許泓，林安清，古瓏，等．果蔬中107種殘留農(nóng)藥的氣相色譜-質(zhì)譜檢測方法［J］．分析測試學(xué)報，2004，23(3):34-38.

［5］Barker S A．Matrix solid-phase dispersion［J］．Journal of chromatography A，2000，885:115-127.

［6］段勁生，王梅，孫明娜，等．基質(zhì)固相分散在農(nóng)藥殘留分析中的 應(yīng)用研 究進(jìn) 展［J］．農(nóng) 藥，2006，45(8):508-510.

［7］申中蘭，蔡繼寶，高蕓，等．基質(zhì)固相分散-加速溶劑萃取-氣相色譜法測土壤中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留［J］．分析化學(xué)，2005，33(9):1318-1320.

［8］侯圣軍，郝向洪，申麗，等．基質(zhì)固相萃取-氣相色譜電子捕獲檢測器同時測定大米中12種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量［J］．分析試驗室，2007，26(5):115-118.

［9］羅慶，孫麗娜．超聲波提取-GC/MS法同時測定農(nóng)用土壤中有機(jī)氯農(nóng)藥和多氯聯(lián)苯［J］．安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38(22):12195-12197，12245.

［10］王貴雙，高麗華，趙俊平，等．固相萃取-氣相色譜-質(zhì)譜法測定糧谷中17種有機(jī)氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留［J］．中國釀造，2010，11:165-168.

［11］奉夏平，陳衛(wèi)國，王志元，等．基質(zhì)固相分散-氣相色譜法同時測定蔬菜水果中多種農(nóng)藥殘留［J］．食品科學(xué)，2005，26(7):194-197.