李亞明,劉 奇
(宜興市人民醫(yī)院,江蘇 宜興 214200)
目前已經(jīng)證實生殖道HPV感染是宮頸癌發(fā)生的必要條件,生殖道感染的HPV亞型有30多種,分高危型和低危型。HPV感染的致癌性,反應了感染階段的流行性。隨著宮頸疾病的研究進展,宮頸癌中無性HPV生長周期通常整合病毒DNA到宿主染色體上,提示HPV和宮頸損傷共同進展。而整合HPV病變細胞的清除,主要和T細胞亞群的數(shù)量和功能有一定的相關性。本文主要是研究宮頸病變HPV感染者T細胞亞群和IL-2的變化情況。
選擇2009年8月—2011年4月在我院婦科檢查,有宮頸病變感染HPV的患者209例,年齡24~57歲,A組:高危組(87例),B組:低危組(122例),同時選擇正常體檢,無HPV感染,C組(53例)作為對照組。
采用亞能生物技術(深圳)有限公司提供的宮頸細胞脫落采集器,采集宮頸細胞標本1份,同時,抽取靜脈血3mL抗凝保存。
ABI7500Real Time PCR system基因擴增儀產(chǎn)于美國;核酸分子雜交儀及配套試劑由亞能生物技術(深圳)有限公司提供物;BD-流式細胞儀、CD3、CD4、CD8及IL-2試劑購于美國BD公司。
實驗操作方法、步驟及結果判讀嚴格按照操作說明書進行。統(tǒng)計學方法采用F檢驗和t檢驗。
根據(jù)PCR擴增后,核酸雜交檢測結果,將209例患者分成三組,高危組87例(HPV161826313539455153565859666873),低危組122例(HPV6114042445461707281)。正常組53例。T細胞:三組相比無顯著性差異(P>0.1);T細胞:A、B組低于C組,差異有顯著性(P<0.005),且A組低于B組(P<0.025)T細胞:A組低于B、C組差異有高度顯著性(P<0.005),B、C組差異無顯著性(P>0.25);比值:A組低于C組,差異有顯著性。IL-2:A、B 組低于 C 組,差異有顯著性(P<0.005),A、B組差異無顯著性。外周血及IL-2檢測結果見表1。
病毒感染一方面可以激發(fā)宿主的非特異性細胞免疫和體液免疫,一方面抑制特異性免疫反應的形成,病毒的清除主要依靠宿主的特異性細胞免疫[1]。HPV早期蛋白E1-E7不僅參與病毒復制,還可以調(diào)節(jié)免疫反應,E7參與局部抗原提呈的調(diào)節(jié),E7過度復制可抑制抗原提呈細胞功能。E7抗原可減弱HPV感染細胞對INF-α的反應,影響INF-α的抗病毒作用,其中HPV16E7抗原可在CTL水平誘導特異性耐受。HPV高危型與泌尿生殖道的惡性腫瘤有關,而低危型僅與泌尿生殖道的良性病變有關[2]。
IL-2是由激活的T細胞產(chǎn)生,主要能刺激T細胞增殖和產(chǎn)生細胞因子;使NK細胞活化、增殖;刺激B細胞增殖,分泌抗體[4]。本次實驗發(fā)現(xiàn),高危型和低危型的IL-2濃度均低于正常組,進一步印證HPV感染的患者其細胞免疫和體液免疫均受到抑制,提示HPV感染不易治愈且有反復發(fā)作的可能。在目前HPV預防性疫苗和治疫性疫苗還沒有實質(zhì)性進展的時候,我們認為臨床使用白細胞介素治療,提高機體特異細胞免疫和體液免疫,對治愈HPV感染有一定作用。
表1 不同程度患者外周血CD+3、CD+4、CD+8、及IL-2檢測結果()
表1 不同程度患者外周血CD+3、CD+4、CD+8、及IL-2檢測結果()
高危組(A組)低危組(B組)正常組(C組)ACD+4/B A/C B/C F t P F t P F t P CD+0.25 CD+367.56±2.64 66.98±2.18 68.17±2.421.3030.351 >0.2501.1301.127 >0.1001.9120.315 >19.25±1.86 23.19±2.14 24.37±3.141.30210.85 <0.0051.1603.726 <0.0051.5421.716 >0.05 CD+4/CD+8 1.09±0.14 1.17±0.24 1.31±0.191.7210.196 >0.252.4202.513 <0.0251.4031.715 >0.25 IL-2 7.77±11.73 8.36±11.52 18.25±8.751.9470.347 >0.252.7731.826 <0.054.6271.619 <0.0521.17±3.58 27.21±4.23 31.81±2.461.0122.241 <0.0251.2404.812 <0.0050.9782.316 <0.025 CD+48
[1]MITTAL K DEMOPOULOS RI.Tatam[J].Int J Gyecol Pathol,1998,12(13):2016-2072.
[2]SEUNG H S,JEA K L,O YE S S.The relationship between cytokines and HPV 216,HPV216E6,E7andhigh2risk HPV viral load in the uterine cervix[J].Gynecol O ncol,2007,104(3):732-728.
[3]張培影,徐俠,楊海燕,等.HPV16/18型表達和細胞病理學檢查與宮頸癌及癌前病變的相關性研究[J].南京中醫(yī)藥大學學報,2009,50(1):778-781.
[4]董金蓉,謝飛.人乳頭瘤病毒的病原免疫學及其疫苗的研究進展[J].微生物學免疫學進展,2007,35(3):74-79.