金二榮 王 璐 張 潔 邸阜生 劉 聰 洪燕青

非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD）包括非酒精性單純性脂肪肝（NAFL）以及由其演變的非酒精性脂肪性肝炎（NASH）和肝硬化，炎癥在NAFLD的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起重要作用。近來(lái)發(fā)現(xiàn)脂肪組織、肝臟分泌的脂肪因子chemerin可通過(guò)結(jié)合受體chemer?inR趨化巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞參與機(jī)體炎癥反應(yīng)，在NAFLD患者血漿chemerin水平明顯增高[1]。本文就2型糖尿?。═2DM）伴NAFLD患者血漿chemerin水平變化以及chemerin與T2DM伴NAFLD炎癥的關(guān)系進(jìn)行探討。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2008年5月—2010年10月在天津市第三中心醫(yī)院門診新確診或病史<5年而未使用任何降糖藥物治療的T2DM患者，其中合并NAFLD患者120例（A組），不合并NAFLD患者62例（B組），選取同期健康體檢者60例（C組）。所有T2DM患者均排除糖尿病急慢性并發(fā)癥、慢性腎功不全、冠心病、心律失常、腫瘤、妊娠及風(fēng)濕免疫系統(tǒng)疾病，無(wú)飲酒史或飲酒折合乙醇量男性每周<140 g,女性每周<70 g，并排除病毒性肝炎、自身免疫性肝病、藥物及毒物引起的肝病等。T2DM診斷采用1999年WHO診斷標(biāo)準(zhǔn)；NAFLD的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照參考文獻(xiàn)[2]。

1.2 研究方法

1.2.1 基本數(shù)據(jù)采集 測(cè)量各研究對(duì)象的身高、體質(zhì)量，腰圍、臀圍，計(jì)算體質(zhì)量指數(shù)（BMI）和腰臀比（WHR）。

1.2.2 標(biāo)本采集 全部受試對(duì)象空腹8 h后取肘正中靜脈血測(cè)空腹血糖（FBG）、餐后2 h血糖（2 hPG）、HbA1c（%）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、高敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）、腫瘤壞死因子（TNF）-α、白細(xì)胞介素（IL）-6、chemerin?？诜?5 g無(wú)水葡萄糖行葡萄糖耐量試驗(yàn)（OGTT）及胰島素、C肽釋放試驗(yàn)測(cè)空腹胰島素（FINS），計(jì)算穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）=FBG×FINS/22.5。

1.2.3 檢測(cè)方法 內(nèi)臟脂肪面積測(cè)量采用電阻抗法，血糖測(cè)定采用葡萄糖氧化酶法，血脂測(cè)定采用酶化學(xué)法，HbA1c測(cè)定采用高效液相層析法，血漿胰島素測(cè)定采用放射免疫法，chemerin測(cè)定采用酶聯(lián)免疫吸附法（試劑購(gòu)自北京康肽生物科技有限公司），TNF-α、IL-6采用酶聯(lián)免疫吸附法（試劑購(gòu)自北京愛(ài)迪森生物科技有限公司），hs-CRP采用散射比濁法，B超檢查用AKLOKA5000型B超檢測(cè)儀。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0軟件統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)量資料用±s表示，多組間比較采用方差分析及q檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料間比較采用χ2檢驗(yàn)，指標(biāo)間的關(guān)系判定采用Pearson相關(guān)分析和多元逐步回歸分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組臨床資料比較 除性別、年齡、身高外，體質(zhì)量、BMI、腰圍、WHR、TC、TG、LDL-C、FBG、2hPG、HbA1c、FINS、HOMA-IR、內(nèi)臟脂肪面積在A、B組均顯著高于C組，HDL-C顯著低于C組（均P<0.01）；A組與B組的體質(zhì)量、BMI、腰圍、WHR、TC、HDL-C、FBG、2 h PG、HbA1c、FINS、HOMA-IR差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P>0.05），TG、LDL-C、內(nèi)臟脂肪面積差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P<0.01），見(jiàn)表1。

2.2 3組間chemerin水平及炎性指標(biāo)的比較 A組、B組的chemerin、hs-CRP、IL-6、TNF-α均高于C組（P<0.01），A組的chemerin、hs-CRP、IL-6、TNF-α均高于B組（P<0.05或P<0.01），見(jiàn)表2。

2.3 血漿chemerin與各變量間的相關(guān)性分析 T2DM合并NAFLD患者血漿chemerin水平與腰圍、LDL-C、內(nèi)臟脂肪面積、TNF-α、IL-6呈正相關(guān)（r分別為 0.193、0.185、0.822、0.687、0.731，P<0.05 或P<0.01），與臀圍、WHR、身高、體質(zhì)量、BMI、TC、TG、HDL-C、FBG、2 h PG、FINS、HOMA-IR、HbA1c、hs-CRP無(wú)相關(guān)性（r分別為 0.087、0.139、0.128、0.164、0.033、-0.061、-0.025、0.055、-0.132、-0.023、-0.076、-0.148、0.125、0.001，均P>0.05）。

表1 3組臨床參數(shù)的比較 ±s）

表1 3組臨床參數(shù)的比較 ±s）

表中數(shù)據(jù)采用±s或例表示；*P<0.05，**P<0.01，表2同

組別 n WHR A組B組C組F或χ2 q A∶B A∶C B∶C 120 62 60性別（男/女）56/64 30/32 31/29 0.358---年齡（歲）60.73±11.83 60.23±10.47 59.00±9.41 0.839---身高（cm）165.22±8.31 166.07±7.91 166.02±7.26 1.824---體質(zhì)量（kg）73.73±5.93 74.58±6.47 65.47±6.39 35.020**1.27 6.53**7.80**BMI（kg/m2）27.10±2.50 27.10±2.27 23.72±1.34 53.294**0.66 9.25**8.60**腰圍（cm）89.30±6.64 88.80±5.03 76.13±5.55 45.78**1.47 11.45**7.90**0.95±0.06 0.94±0.04 0.87±0.05 45.003**1.16 8.73**7.58**內(nèi)臟脂肪面積（cm2）117.95±8.17 108.63±7.34 98.42±3.27 98.801**7.72**16.17**8.45**TC（mmol/L）5.33±2.17 5.17±1.10 3.70±0.80 21.635**2.17 6.01**5.32**TG（mmol/L）LDL-C（mmol/L）HDL-C（mmol/L）FBG（mmol/L）2 h PG（mmol/L）FINS（mU/L）HbA1c（%）組別 n HOMA-IR A組B組C組F或χ2 q A∶B A∶C B∶C 120 62 60 2.19±2.56 1.91±1.30 1.01±0.28 9.229**2.18*3.85**3.17**3.34±0.46 3.20±0.39 2.89±0.27 22.509**2.03*6.57**4.45**0.97±0.16 1.04±0.16 1.30±0.07 41.330**0.51 10.17**10.51**9.65±2.20 9.55±1.92 5.10±0.61 78.831**1.02 14.48**14.17**14.90±5.08 14.34±5.08 7.23±0.48 63.425**0.74 10.10**7.32**11.08±1.86 10.76±2.09 7.89±1.69 52.608**0.77 9.24**8.47**4.76±1.42 4.53±0.96 1.80±0.51 72.441**1.23 15.70**14.44**8.73±1.42 8.27±1.52 5.05±0.30 68.128**0.51 19.82**16.08**

表2 3組chemerin及炎癥指標(biāo)的比較

2.4 多元逐步回歸分析 以T2DM合并NAFLD患者血漿chemerin水平為因變量，以BMI、腰圍、臀圍、WHR、內(nèi)臟脂肪面積、TC、TG、LDL-C、HDL-C、FBG、2 h PG、FINS、HOMR-IR、HbA1c、TNF-α、hs-CRP、IL-6為自變量進(jìn)行多元逐步回歸分析，結(jié)果表明內(nèi)臟脂肪面積、TNF-α、IL-6進(jìn)入分析模型，=-209.184+1.629X1+0.313X2+0.425X3（：chemer?in；X1：內(nèi)臟脂肪面積；X2：TNF-α；X3：IL-6），所得模型決定系數(shù)（R2）=0.764（F=129.302，P<0.01）。

3 討論

NAFLD是一種多病因引起的肝細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積過(guò)多的臨床病理綜合征。本研究發(fā)現(xiàn)A組、B組患者 TC、TG、LDL-C、FBG、2 h PG、HbA1c、FINS、HOMA-IR、內(nèi)臟脂肪面積高于正常對(duì)照組，HDL-C低于正常對(duì)照組，表明T2DM、NAFLD患者存在有糖脂代謝紊亂。研究發(fā)現(xiàn)NAFLD與糖尿病、肥胖等代謝綜合征密切相關(guān)，存在脂肪組織和肝臟的天然免疫功能紊亂，肥胖和肝脂肪變性時(shí)，脂肪組織、肝臟可分泌TNF-α、hs-CRP、IL-6多種炎性細(xì)胞因子，在NAFLD的形成和發(fā)展中發(fā)揮重要作用[3]。本研究亦顯示A組、B組患者血漿IL-6、TNF-α、hs-CRP高于正常對(duì)照組，與以上所述一致，表明炎癥在糖尿病、脂肪肝的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。

Kukla等[1]研究發(fā)現(xiàn)NAFLD血漿chemerin水平明顯較正常人高。本研究得出相似的結(jié)果：T2DM合并NAFLD血漿chemerin水平高于正常對(duì)照組和單純T2DM患者，同時(shí)T2DM合并NAFLD患者血漿IL-6、TNF-α、hs-CRP高于單純 T2DM 患者，而chemerin又是機(jī)體炎癥反應(yīng)標(biāo)志物[3]。提示chemer?in可能通過(guò)炎癥機(jī)制參與T2DM合并NAFLD的發(fā)生、發(fā)展。國(guó)外研究發(fā)現(xiàn)肥胖患者血漿chemerin水平與炎癥指標(biāo)TNF-α、IL-6、hs-CRP呈正相關(guān)[3]。本研究顯示T2DM合并NAFLD血漿chemerin水平與TNF-α、IL-6、腰圍、內(nèi)臟脂肪呈正相關(guān)，腰圍、內(nèi)臟脂肪面積是肥胖的臨床指標(biāo)，表明chemerin還與肥胖尤其是中心性肥胖的發(fā)生相關(guān)。Chemerin可促進(jìn)脂肪細(xì)胞的分化，參與成熟脂肪細(xì)胞的脂肪分解，chemerin與LDL-C相關(guān)，提示chemerin還參與NAFLD的脂代謝。但本研究chemerin與hs-CRP、臀圍、WHR、身高、體質(zhì)量、BMI、TC、TG、HDL-C、FBG、2hPG、FINS、HOMA-IR 、HbA1c無(wú)相關(guān)性。

本研究表明TNF-α、IL-6是血漿chemerin的影響因素，TNF-α、IL-6可導(dǎo)致糖尿病患者胰島素抵抗，增加糖尿病患者脂肪肝的發(fā)生率。由此推論T2DM患者炎癥、胰島素抵抗與NAFLD的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，而chemerin在這個(gè)環(huán)節(jié)起到重要作用。內(nèi)臟脂肪面積也是影響血漿chemerin的危險(xiǎn)因素，這可能與chemerin主要由內(nèi)臟脂肪組織產(chǎn)生有關(guān)。

Chemerin的表達(dá)受炎性因子的調(diào)節(jié)。Parlee等[4]研究發(fā)現(xiàn)TNF-α可增強(qiáng)chemerin前體在脂肪細(xì)胞中的合成和分泌。國(guó)內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)高脂飲食誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝C57BL/6小鼠模型與對(duì)照組相比，肝臟chemerin的mRNA表達(dá)下調(diào)，但是肝臟中chemer?in R的mRNA表達(dá)卻上調(diào)[5]。肝臟chemerin的mRNA表達(dá)下調(diào)是由炎癥使脂肪變的肝細(xì)胞氧化應(yīng)激、脂質(zhì)過(guò)氧化不斷加重，肝細(xì)胞的功能和完整性遭破壞所致；而chemerin R mRNA表達(dá)上調(diào)可能與TNF-α促進(jìn)單核細(xì)胞chemerinR表達(dá)有關(guān)[5]。

[1]Kukla M,Zwirska-Korczala K,Hartleb M,et al.Serum Chemerin and vaspin in non-alcoholic fatty liver disease[J].Scand J Gastroen?terol,2010,45(2):235-242.

[2]中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組.非酒精性脂肪性肝病診療指南（2010年修訂版）[J].中華肝臟病雜志，2010，18(3)：163-166.

[3]Lehrke M,Becker A,Greif M,et al.Chemerin is associated with markers of inflammation and components of the metabolic syndrome but does not predict coronary atherosclerosis[J].Eur J Endo crinol,2009,161(2):339-344.

[4]Parlee SD,Ernst MC,Muruganandan S,et al.Serum chemerin levels vary with time of day and are modified by obesity and tumor necro?sis factor-{alpha}[J].Endocrinology,2010,151(6):2590-2602.

[5]張強(qiáng)，朱榕峰,劉爽，等.高脂誘導(dǎo)非酒精性脂肪性肝病小鼠肝臟Chemerin及其受體的表達(dá)[J].新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2009，26(3)：224-228.