李敏芳

(陜西省商洛市林木種苗站,陜西商洛 726000)

油松是商洛主要造林樹種之一,商洛市每年除本地所產(chǎn)油松種子外,還需大量從外地調(diào)入(主要是山西),在收購和調(diào)種時急需知道種子的發(fā)芽狀況,才能夠確定種子的質(zhì)量等級以及是否收購和調(diào)用。1999年以前,對油松種子生活力與發(fā)芽率的關系有過相近的研究報道,但是,2000年執(zhí)行新的《林木種子檢驗規(guī)程》(GB-1999),對種子發(fā)芽的標準作了新的規(guī)定,與以前測定的發(fā)芽率數(shù)值出入較大。2008～2009年,筆者根據(jù)新的檢驗規(guī)程對山西、商洛不同地域的30個油松種子樣品進行了生活力和發(fā)芽率測定試驗研究,總結(jié)歸納出了兩者之間的關系規(guī)律,為快速、準確地掌握油松種子的發(fā)芽率提供了參考依據(jù)。近年來,我們在生產(chǎn)中應用四唑法快速測定油松種子生活力,來判斷油松種子發(fā)芽率的情況,使生活力測定較好地應用于生產(chǎn)實踐,已累計育苗造林用種60 000 kg,取得了滿意的效果。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗設備材料 光照發(fā)芽器、恒溫箱、TTC(四唑)、發(fā)芽盒、海棉、配液瓶、蒸餾水、量筒、試管、電子天坪、放大鏡、解剖刀、鑷子、解剖針、滴管。

1.1.2 供試種子 油松種子來源于本地的洛南、商州、柞水和山西省晉中市和順縣,共30個樣本,每個樣本重為0.1 kg[1]。

1.2 試驗方法

1.2.1 種子抽樣與分組 對同一批純凈油松種子樣本,按規(guī)定隨機抽取兩個測定樣品,一個用于生活力測定樣品;另一個用于發(fā)芽率測定樣品。每個樣品用四分法將種子分成4份,從每份中隨機提取25粒組成100粒。共取4個100粒,即4個重復。

1.2.2 生活力測定

測定樣品的預處理:

①將數(shù)好的種子樣品每100粒包在一個紗布塊內(nèi)(不能太緊),扎好后系上標簽,投入45℃的溫水中浸泡24 h(中間換水2次),使種子充分吸水膨脹,種皮軟化。

②剝除種皮和內(nèi)種皮,盡量不能使胚乳受損傷,分組放在潮濕的吸水紙上,并將空粒、腐爛粒、病蟲感染粒以及其它明顯喪失生活力的種子,分別記入生活力測定記錄表中。

四唑染色法:四唑是2,3,5三苯基氯化四唑的簡稱,英文名Tetrazolium ch loride,所以也稱TTC。四唑為白色粉末,其水溶液本身無色,當被種子吸收之后,活細胞內(nèi)的脫氫酶可將其還原成穩(wěn)定且不擴散的紅色物質(zhì)甲月替,從而使種子中有生命的部位染成紅色,而無生命的部位不染色。根據(jù)染色的部位及分布狀況,判別種子的生活力。凡種胚染成紅色者為有生活力,未染成紅色者,種胚活細胞已死亡,為無生活力[2-3]。

①配液:用中性蒸餾水(pH 值6.5～7.0)來溶解。配成1%的四唑溶液。則稱取1 g四唑溶于100m l蒸餾水中即可。

②染色:將染色樣品分組侵入四唑溶液中,在35℃的黑暗環(huán)境中染色4 h[1]。染色結(jié)束后,瀝去溶液,用清水沖洗種子,將經(jīng)過染色的種子分組放在潮濕的濾紙上,保持濕潤,以備鑒定。

③鑒定:根據(jù)染色的部位、染色面積的大小和染色程度判別種子的生活力,判別標準按國標檢驗技術規(guī)程(GB-1999)執(zhí)行。凡胚和胚乳全部正常染色者為有生活力的種子,凡胚和胚乳未著色和種胚短于種腔1/3[1]者為無生活力的種子。并將鑒定結(jié)果記入生活力測定表中。

1.2.3 發(fā)芽率測定 按照1999年新頒布的《林木種子檢驗規(guī)程》(GB-1999)執(zhí)行。

測定樣品的預處理:將樣品投入45℃的溫水中浸泡24 h(中間換水2次),使種子充分吸水膨脹,進行催芽。對發(fā)芽盒、發(fā)芽床、發(fā)芽基(海棉)等器具進行消毒清洗處理待用。

置床:每個發(fā)芽盒放置兩個100粒,2個重復,每個樣品共做4個重復,放置在兩個發(fā)芽盒里,置好后放入光照發(fā)芽箱內(nèi)。

觀察記載:

①每天檢查1次發(fā)芽的環(huán)境溫度,發(fā)芽器溫度同預定溫度25℃相差不能超過±1℃。

②保持發(fā)芽床的水份。水份不足時應及時加水,經(jīng)常保持種子濕潤。

③有蓋發(fā)芽盒通氣不良,應每天揭蓋1次使發(fā)芽盒充分換氣。

④發(fā)現(xiàn)感染了霉菌的種子,及時取出清洗,以防感染正常種子。

⑤種子置床后第10 d做第1次發(fā)芽記載,第21 d做最后一次發(fā)芽記載。發(fā)芽測定記載正常幼苗、不正常幼苗、異狀發(fā)芽粒、新鮮粒和腐爛粒等[1]。

2 結(jié)果與分析

2.1 山西油松種子生活力與發(fā)芽率關系分析

2008年,對山西晉中地區(qū)15個油松種子樣品做了發(fā)芽率和生活力測定,其結(jié)果見表1。

通過表1生活力與發(fā)芽率測定數(shù)值,建立發(fā)芽率(Y)與生活力(X)一元回歸方程:Y=-28.941+1.276X,相關系數(shù)為 r=0.994,說明生活力與發(fā)芽率關系是極顯著的。通過該一元回歸方程,可通過快速測定油松種子生活力,就可得出山西晉中產(chǎn)區(qū)油松種子發(fā)芽率參考數(shù)值。

2.2 商洛油松種子生活力與發(fā)芽率關系分析

2008～2009年,對陜西商洛市的洛南縣、商州區(qū)、柞水縣15個油松種子樣品做了發(fā)芽率和生活力測定,其結(jié)果見表2。

通過表2生活力與發(fā)芽率測定數(shù)值,建立發(fā)芽率(Y)與生活力(X)一元回歸方程:Y=-23.292+1.194X,相關系數(shù)為 r=0.992,說明生活力與發(fā)芽率關系是極顯著的。通過該一元回歸方程,可通過快速測定油松種子生活力,就可得出商洛產(chǎn)區(qū)油松種子發(fā)芽率參考數(shù)值。

表1 山西油松種子發(fā)芽率與生活力測定結(jié)果

表2 商洛市油松種子發(fā)芽率與生活力測定結(jié)果

3 結(jié)語與討論

(1)從表1、2可以看出山西種子生活力和發(fā)芽率之間的差異最小3%,最大11%,平均7.8%;商洛種子的生活力和發(fā)芽率之間的差異最小為5%,最大為12%,平均9.5%。由此可見,山西晉中地區(qū)的油松種子的生活力和發(fā)芽率之間的差異小,商洛地區(qū)油松種子的生活力和發(fā)芽率之間的差異較大。由于地理條件的差異,山西油松種子顆粒大,種皮薄,發(fā)芽快,發(fā)芽率高,但遺傳品質(zhì)差;而商洛油松種子顆粒小,種皮厚,發(fā)芽慢,發(fā)芽率低,但遺傳品質(zhì)好。

(2)通過對山西、商洛主產(chǎn)區(qū)所產(chǎn)油松種子生活力與發(fā)芽率數(shù)值測定,建立一元回歸方程,其相關系數(shù)接近于1,達到極顯著水平,說明油松種子生活力與發(fā)芽率之間存在著緊密的線性正相關關系,可以在飛播造林、育苗用種等生產(chǎn)實踐中參考應用。

(3)通過對30個油松種子樣品的對比試驗和多年來的檢驗實踐,不難看出發(fā)芽率高的種子,生活力和發(fā)芽率之間的差距較小,發(fā)芽率低的種子差距較大。若對于儲藏多年的陳種子有時發(fā)芽率與生活力往往不一定存在正相關關系。

[1] 國家質(zhì)量技術監(jiān)督局.林木種子檢驗規(guī)程(GB2772-1999)[S].1999-11-10發(fā)布,200-04-01實施10-44.

[2] 喻方圓,周景莉,洑香香,等.林木種苗質(zhì)量檢驗技術[M].北京:中國林業(yè)出版社,2008:20-35.

[3] 周陛勛,華啟斌,陳幼生,等.林木種子檢驗[M].北京:中國標準出版社,1986:40-73.

[4] 董麗芬,邵崇斌,張蓮英.油松種子生活力與發(fā)芽率的關系以及二者差值與活力關系的初步探討[J].種子,1988(3):29-30.