徐 雁鄒建洲劉中華徐少偉沈 波晉 瑋滕 杰丁小強(qiáng)

維持性血液透析患者外周血單個(gè)核細(xì)胞核因子κB活性與微炎癥、氧化應(yīng)激狀態(tài)及心血管疾病的關(guān)系

徐 雁1，3鄒建洲2，3劉中華2徐少偉2沈 波2晉 瑋2滕 杰2丁小強(qiáng)2

目的：探討維持性血液透析（MHD）患者外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）核因子κB（NF-κB）活性與微炎癥、氧化應(yīng)激狀態(tài)及心血管疾?。–VD）的關(guān)系。 方法：選取MHD治療3個(gè)月以上的患者（32例），以體檢健康者（12例）為對(duì)照組。采用ELISA法檢測(cè)受試者PBMC的NF-κB活性，比色法檢測(cè)血清總抗氧化能力（TAOC）及丙二醛（MDA）。Pearson相關(guān)和線性回歸分析PBMC的NF-κB活性與其他指標(biāo)的相關(guān)性。二分類Logistic回歸分析NF-κB活性與CVD的關(guān)系。 結(jié)果：MHD患者PBMC的NF-κB活性［（1 142.4±413.0）ng/mg核蛋白vs（208.3 ±39.5）ng/mg核蛋白，P＜0.05］、血清高敏C反應(yīng)蛋白（hsCRP）（3.2 mg/L vs 0.5 mg/L，P＜0.05）、TAOC［（21.9 ±6.6）U/m l vs（15.7±2.3）U/ml，P＜0.05］和MDA［（6.80±0.86）nmol/ml vs（3.89±0.51）nmol/m l，P＜0.05］皆顯著高于對(duì)照組。單次HD后MHD患者PBMC的NF-κB活性顯著升高［（2 076.5±690.1）ng/mg核蛋白vs（1 142.2±413.0）ng/mg核蛋白，P＜0.05］，TAOC顯著降低［（13.6±5.0）U/ml vs（21.9±6.6）U/m l，P＜0.05］。Pearson相關(guān)分析顯示PBMC的NF-κB活性與白細(xì)胞計(jì)數(shù)（r=0.454，P＜0.05）、血清hsCRP（r=0.590，P＜0.05）及MDA（r=0.390，P＜0.05）呈正相關(guān)。線性回歸分析顯示白細(xì)胞計(jì)數(shù)（β=0.338，P＜0.05）、血清hsCRP（β=0.440，P＜0.05）及MDA（β=0.319，P＜0.05）皆與PBMC的NF-κB活性獨(dú)立相關(guān)。Logistic回歸分析顯示PBMC的NF-κB活性升高（＞1 170.0 ng/mg核蛋白）是CVD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（OR=8.47，P＜0.05）。 結(jié)論：MHD患者PBMC的NF-κB活性顯著升高，且與微炎癥、氧化應(yīng)激狀態(tài)及CVD相關(guān)，可作為患者的炎癥標(biāo)志物。

血液透析 核因子κB 炎癥 氧化應(yīng)激 心血管疾病

微炎癥狀態(tài)臨床上可無(wú)明顯癥狀，但其在維持性血液透析（maintenance hemodialysis，MHD）患者中發(fā)生率達(dá)35%～65%［1］，與氧化應(yīng)激狀態(tài)關(guān)系密切，互為因果。兩者與患者動(dòng)脈粥樣硬化、貧血、營(yíng)養(yǎng)不良、促紅細(xì)胞生成素抵抗及感染等密切相關(guān)，是增加MHD患者死亡率的重要因素［2，3］。因此，尋找敏感性檢測(cè)指標(biāo)對(duì)早期、及時(shí)發(fā)現(xiàn)MHD患者微炎癥狀態(tài)，提高患者的生活質(zhì)量和生存率有重要意義。核因子κB（NF-κB）是引發(fā)炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，為炎癥和氧化應(yīng)激狀態(tài)聯(lián)系的核心環(huán)節(jié)［3］。但因其檢測(cè)繁瑣，長(zhǎng)期以來(lái)只用于科研［4］。近年NF-κB的ELISA檢測(cè)方法的建立使其高通量定量分析成為可能，使NF-κB成為應(yīng)用于臨床炎癥狀態(tài)的敏感標(biāo)志物成為可能。本文采用橫斷面研究，探討MHD患者外周血單個(gè)核細(xì)胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）NF-κB活性與炎癥、氧化應(yīng)激狀態(tài)及心血管疾?。╟ardiovascular disease，CVD）的關(guān)系。

對(duì)象和方法

研究對(duì)象 2010年12月復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院血液凈化中心MHD治療患者32例，原發(fā)病包括慢性腎小球腎炎14例，糖尿病腎病9例，高血壓腎損害5例，多囊腎1例，梗阻性腎病1例，其他2例原發(fā)病不明。

入選標(biāo)準(zhǔn) MHD 3個(gè)月以上，年齡大于18歲。

排除標(biāo)準(zhǔn) 近一個(gè)月有發(fā)熱等感染征象、缺血性損傷及活動(dòng)性皮膚潰瘍等；白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）＞10×109/L或＜4×109/L；血液系統(tǒng)疾病、腫瘤或惡病質(zhì)等；應(yīng)用靜脈鐵劑；近三個(gè)月內(nèi)曾有以下情況：消化道出血、輸血或任何原因住院，腹膜透析、腎移植轉(zhuǎn)為HD者；不愿參與研究者。

透析方式 患者均應(yīng)用德國(guó)Fresenius4008B/S透析機(jī)或日本日機(jī)裝透析機(jī)（Nikkiso-DBB），透析器均為一次性使用，膜材料為聚砜膜，面積1.2～1.5m2。透析用水為反滲水，標(biāo)準(zhǔn)碳酸氫鹽透析液，透析液流量為500 ml/min，血流量200～300 ml/min。透析處方為3次/周，4～5h/次，采用普通肝素或低分子肝素抗凝，血管通路均為自體動(dòng)靜脈內(nèi)瘺或中心靜脈置管。

健康對(duì)照組 本院體檢中心健康者12例，肝功能、腎功能、血常規(guī)、尿常規(guī)、心電圖、胸片、腹部彩色超聲波檢查正常，無(wú)肥胖、吸煙史等。

本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有受試對(duì)象均簽署知情同意書。

方法

臨床資料 包括年齡、性別、促紅細(xì)胞生成素用量及透析相關(guān)資料等。體質(zhì)量指數(shù)（BMI）=體重（kg）/［身高（m）］2。用單室尿素清除指數(shù)（spKt/V）評(píng)價(jià)透析充分性。

實(shí)驗(yàn)室檢查 常規(guī)方法檢測(cè)血紅蛋白、WBC、血清肌酐、血尿素氮、鈣、磷、白蛋白、前白蛋白、三酰甘油、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇和高敏C反應(yīng)蛋白（hsCRP）。

PBMC的NF-κB活性測(cè)定 MHD患者于周中短周期透析的透析前空腹及透析結(jié)束前10 min抽血，對(duì)照組晨起空腹抽血10 ml，置肝素抗凝管。取血后2h內(nèi)采用密度梯度離心法分離人PBMC，提取PBMC的核蛋白。采用ELISA法檢測(cè)核蛋白NF-κB活性，根據(jù)ELISA試劑盒（上海藍(lán)基生物公司，產(chǎn)品號(hào)E01N0011）說(shuō)明書操作。

氧化應(yīng)激指標(biāo)測(cè)定 血清管采集MHD患者周中短周期透析前空腹及透析結(jié)束前10 min靜脈血，對(duì)照組晨起空腹外周靜脈血2 ml，4℃離心后取血清，采用可見光分光光度法（機(jī)體中許多抗氧化物質(zhì)，能使Fe3+還原成Fe2+，后者可與菲啉類物質(zhì)形成穩(wěn)固的絡(luò)合物，通過(guò)比色可測(cè)出其抗氧化能力的高低。）測(cè)定總抗氧化能力（total antioxidant capacity，TAOC），試劑盒（貨號(hào)A015）購(gòu)自南京建成生物工程研究所。硫代巴比妥酸（TBA）反應(yīng)法測(cè)定丙二醛（malondialdehyde，MDA），試劑盒（貨號(hào)A003-1）購(gòu)自南京建成生物工程研究所，嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作。

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 用SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。連續(xù)性變量先行正態(tài)性檢驗(yàn)。正態(tài)分布的連續(xù)變量采用±s表示；偏態(tài)分布的連續(xù)變量采用中位數(shù)（四分位數(shù)間距）表示。用多個(gè)獨(dú)立樣本非參數(shù)檢驗(yàn)、兩相關(guān)樣本非參數(shù)檢驗(yàn)、兩獨(dú)立樣本非參數(shù)檢驗(yàn)、單因素方差分析、配對(duì)樣本t檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)比較組間差異。Pearson相關(guān)和線性回歸分析NF-κB活性與各指標(biāo)之間的相關(guān)性。二分類Logistic回歸分析NF-κB活性與CVD的關(guān)系。所有P值均為雙側(cè)檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所有可信區(qū)間為95%。

結(jié) 果

一般資料 MHD組男18例，女14例，年齡61.0歲（52.5～71.0歲）；健康對(duì)照組男7例，女5例，年齡60歲（51～70）歲。兩組的性別構(gòu)成和年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MHD組共19例（59.4%）患者合并CVD，其中心肌梗死3例（15.8%），心絞痛4例（21.1%），心力衰竭4例（21.1%），腦梗死5例（26.3%），腦出血2例（10.5%），外周血管病1例（5.3%）。

PBMC的NF-κB活性、血清hsCRP及氧化應(yīng)激指標(biāo) MHD患者透析前PBMC的NF-κB活性、血清hsCRP、TAOC及MDA均顯著高于健康對(duì)照組（P＜0.05）。單次透析后PBMC的NF-κB活性顯著高于透析前，hsCRP較透析前略有升高，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，TAOC顯著降低，MDA較透析前無(wú)明顯變化（表1）。

表1 PBMC的核因子κB活性、血清hsCRP及氧化應(yīng)激指標(biāo)比較

PBMC的NF-κB活性相關(guān)因素分析 MHD患者血清hsCRP中位數(shù)為3.2 mg/L（1.1～8.9 mg/L），其中17例（53.1%）患者血清hsCRP升高（＞3 mg/L）。Pearson相關(guān)分析顯示PBMC的NF-κB活性與WBC、血清hsCRP及MDA呈正相關(guān)（hsCRP行自然對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換）（表2）。校正了年齡、性別、血管通路后PBMC的NF-κB活性仍與WBC（r= 0.414，P＜0.05）、hsCRP（r=0.389，P＜0.05）及MDA（r=0.356，P＜0.05）呈正相關(guān)。線性回歸分析顯示W(wǎng)BC、血清hsCRP及MDA皆與PBMC的NF-κB活性獨(dú)立相關(guān)（表3）。

MHD患者PBMC的NF-κB活性與CVD的相關(guān)性分析 合并CVD患者PBMC的NF-κB活性顯著高于非CVD患者［（1 308.8±413.0）ng/mg核蛋白vs（899.1±277.2）ng/mg核蛋白，P＜0.05］。Logistic回歸分析結(jié)果顯示PBMC的NF-κB活性升高（＞1 170.0 ng/mg核蛋白）、年齡增長(zhǎng)及前白蛋白降低（＜0.34 g/L）為CVD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（將CVD與非CVD患者中有差異的變量以中位數(shù)為界分為兩組引入Logistic回歸方程）（表4）。

討 論

NF-κB是細(xì)胞中一個(gè)重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，靜息狀態(tài)下與κB抑制因子（IκB）相結(jié)合形成復(fù)合體，以無(wú)活性狀態(tài)存在于胞質(zhì)中。當(dāng)細(xì)胞受到外界刺激時(shí)，IκB激酶復(fù)合體活化將IκB磷酸化，使NF-κB暴露核定位位點(diǎn)。游離的NF-κB迅速移至細(xì)胞核，與特異性κB序列結(jié)合，誘導(dǎo)相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄。在炎性病變中，激活NF-κB的因素主要有細(xì)胞因子（TNF-α、白細(xì)胞介素1β）、內(nèi)毒素及氧化應(yīng)激等。不同的刺激因素可以通過(guò)不同的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路激活NF-κB，其中最重要的是依賴IκB絲氨酸磷酸化的經(jīng)典途徑。該信號(hào)途徑反應(yīng)十分迅速，實(shí)驗(yàn)證實(shí)5 min左右即可使NF-κB的活性水平達(dá)到峰值，且廣泛存在［5-7］。大量研究已經(jīng)證實(shí)NF-κB為炎癥事件的敏感標(biāo)志物，但因其檢測(cè)繁瑣，較少應(yīng)用于臨床［4，7，8］。近年來(lái)隨著NF-κB的ELISA檢測(cè)方法的建立，使其高通量測(cè)定成為可能［4，9］。

表2 MHD患者PBMC的NF-κB活性及血清hsCRP與臨床及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)相關(guān)性的單變量分析

表3 MHD患者PBMC的NF-κB活性與其他指標(biāo)相關(guān)性的線性回歸分析

表4 MHD患者CVD危險(xiǎn)因素的二分類Logistic回歸分析

本研究結(jié)果顯示，MHD患者PBMC的NF-κB活性明顯高于健康對(duì)照組，超過(guò)半數(shù)的MHD患者血清hsCRP升高，說(shuō)明MHD患者體內(nèi)普遍存在微炎癥狀態(tài)。同時(shí)，單次透析后PBMC的NF-κB活性明顯高于透析前，提示HD過(guò)程可激活NF-κB，誘發(fā)炎癥反應(yīng)，也證實(shí)了NF-κB信號(hào)通路反應(yīng)迅速，表明NF-κB活化可以更早期提示炎癥反應(yīng)。與以往的研究結(jié)果相符［3，7，8］。C反應(yīng)蛋白是反映體內(nèi)炎癥狀態(tài)公認(rèn)的可靠標(biāo)志物，本研究結(jié)果提示MHD患者PBMC的NF-κB活性與WBC及hsCRP呈正相關(guān)，說(shuō)明其可以很好地反映MHD患者的炎癥狀態(tài)。

MHD患者體內(nèi)普遍存在較高水平的氧化應(yīng)激狀態(tài)，與氧自由基清除系統(tǒng)的嚴(yán)重?fù)p傷使體內(nèi)活性氧（reactive oxygen species，ROS）升高，氧化和抗氧化系統(tǒng)失衡有關(guān)［10］。氧化應(yīng)激通過(guò)NF-κB、激活蛋白1途徑激活單核細(xì)胞的炎癥基因啟動(dòng)子，隨后相關(guān)mRNA激活轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生炎癥因子。反之炎癥因子通過(guò)白細(xì)胞膜上的還原型輔酶Ⅱ（NADPH）氧化酶復(fù)合物的氧化作用產(chǎn)生ROS放大氧化應(yīng)激反應(yīng)，從而進(jìn)一步刺激炎癥細(xì)胞的激活，因此氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)之間形成螺旋上升的惡性循環(huán)［3］。正常狀態(tài)下，機(jī)體存在完善的抗氧化機(jī)制，通過(guò)無(wú)酶途徑（如維生素E、維生素C、類胡蘿卜素及硒等）和有酶途徑（如過(guò)氧化氫酶、過(guò)氧化物歧化酶及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶）清除ROS，起到抗氧化作用。我們測(cè)定的TAOC包括無(wú)酶和有酶途徑。MDA是體內(nèi)超氧陰離子攻擊生物膜中的多價(jià)不飽和脂肪酸引發(fā)過(guò)氧化作用的毒性最終產(chǎn)物，是經(jīng)典的、最有代表意義的脂質(zhì)氧化標(biāo)志物［10］。

本研究發(fā)現(xiàn)MHD患者透析前MDA水平顯著高于對(duì)照組，說(shuō)明MHD患者體內(nèi)普遍存在氧化應(yīng)激狀態(tài)。常規(guī)HD過(guò)程誘發(fā)氧化應(yīng)激的潛在因素有：（1）透析膜生物不相容性是產(chǎn)生ROS的主要原因；（2）透析液中微生物和內(nèi)毒素污染；（3）MHD中丟失水溶性小分子物質(zhì)（如維生素C）、微量元素（如硒）和酶調(diào)節(jié)復(fù)合物，損傷抗氧化系統(tǒng)；（4）紅細(xì)胞通過(guò)血泵時(shí)的機(jī)械損傷所致微量溶血也有一定影響；（5）應(yīng)用靜脈鐵劑和促紅細(xì)胞生成素等藥物，加重患者的氧化應(yīng)激狀態(tài)；（6）終末期腎病患者由于厭食、高血鉀限制新鮮蔬菜水果的攝入等原因造成維生素C等抗氧化維生素?cái)z入不足［11］。我們的研究發(fā)現(xiàn)，MHD患者透析前抗氧化指標(biāo)TAOC明顯高于對(duì)照組，與國(guó)外一些學(xué)者的研究結(jié)果相似［12，13］。

MHD患者TAOC升高的原因考慮與以下因素有關(guān)：（1）患者TAOC升高是體內(nèi)ROS產(chǎn)生增多的代償機(jī)制；（2）腎衰竭患者體內(nèi)的代謝產(chǎn)物如尿酸、膽紅素等影響了抗氧化能力的檢測(cè)結(jié)果。患者單次透析后TAOC明顯降低，驗(yàn)證了透析過(guò)程能消耗、丟失維生素C和硒等水溶性抗氧化物質(zhì)，此外還與透析后尿酸降低有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)MHD患者PBMC的NF-κB活性與hsCRP及MDA獨(dú)立相關(guān)，進(jìn)一步支持炎癥與氧化應(yīng)激狀態(tài)之間密切相關(guān)，NF-κB為炎癥和氧化應(yīng)激狀態(tài)聯(lián)系的核心環(huán)節(jié)。而我們的研究中hsCRP與MDA無(wú)相關(guān)性，僅提示兩者有相對(duì)獨(dú)立的病理過(guò)程，不能根據(jù)hsCRP水平判斷氧化應(yīng)激的程度［14］。

血清白蛋白為公認(rèn)的營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)，本研究顯示，hsCRP與白蛋白呈負(fù)相關(guān)，提示微炎癥狀態(tài)可加重營(yíng)養(yǎng)不良，NF-κB活性和hsCRP與BMI、前白蛋白及血脂等無(wú)相關(guān)性，可能與我們排除了中重度炎癥和營(yíng)養(yǎng)不良的患者，Ⅱ型營(yíng)養(yǎng)不良的患者較少及樣本量相對(duì)較小有關(guān)。目前認(rèn)為動(dòng)脈粥樣硬化本身是一種炎癥性疾病，免疫反應(yīng)造成的血管損傷是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的中心環(huán)節(jié)。NF-κB是引起炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，在炎癥反應(yīng)中起重要作用。分子水平的研究發(fā)現(xiàn)，動(dòng)脈粥樣硬化炎癥病變過(guò)程中炎性細(xì)胞的激活和炎性因子的釋放與NF-κB的激活密切相關(guān)［15］。本研究顯示MHD患者PBMC的NF-κB活性升高是CVD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，NF-κB＞1170.0 ng/mg核蛋白，發(fā)生CVD的風(fēng)險(xiǎn)升高8.47倍。但因檢測(cè)方法較新，相關(guān)研究甚少，尤其在MHD患者尚無(wú)相關(guān)報(bào)道。因此，結(jié)果的穩(wěn)定性尚需進(jìn)一步的研究驗(yàn)證。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)前白蛋白降低和高齡也是CVD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，驗(yàn)證了傳統(tǒng)和非傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素在MHD患者CVD的發(fā)病中皆有重要作用。

總之，MHD患者PBMC的NF-κB活性與炎癥、氧化應(yīng)激狀態(tài)及CVD密切相關(guān)，可成為應(yīng)用于臨床的炎癥狀態(tài)敏感標(biāo)志物。由于本研究樣本量較小，且為橫斷面研究，結(jié)果的可靠性還有待大樣本研究證實(shí)。

1 Stenvinkel P.Inflammatory and atherosclerotic interactions in the depleted uremic patient.Blood Purif，2001，19（1）：53-61.

2 Chawla LS，Krishnan M.Causes and consequences of inflammation on anemiamanagement in hemodialysis patients.Hemodial Int，2009，13：222-234.

3 Rodriguez-Ayala E，Anderstam B，Suliman ME，et al.Enhanced RAGE-mediated NF kappa B stimulation in inflamed hemodialysis patients.Atherosclerosis，2005，180（2）：333-340.

4 林 青，鄭 健，陳宇新，等.人外周血中NF-κB p65定量檢測(cè)方法的建立及臨床應(yīng)用.第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，32（7）：728 -730.

5 Kutuk O，Basaga H.Inflammation meets oxidation：NF-κB as a mediator of initial lesion development in atherosclerosis.Trends Mol Med，2003，9（12）：549-557.

6 Ghosh S，Karin M.Missing pieces in the NF-κappa B puzzle.Cell，2002，109（Suppl）：S81-S96.

7 Menegatti E，Ronco C，Winchester JF，et al.Absence of NF-κB activation by a new polystyrene-type adsorbent designed for hemoperfusion.Blood Purif，2005，23（1）：91-98.

8 Rangan GK，Kan G，Steer JH，et al.Altered expression of nuclear factor-kB in peripheral blood mononuclear cells in chronic haemodialysis patients.Nephrol Dial Transplant，2006，21（4）：1137 -1139.

9 Raj DS，Boivin MA，Dominic EA，et al.Haemodialysis induces mitochondrial dysfunction and apoptosis.Eur JClin Invest，2007，37（12）：971-977.

10 Himmelfarb J，Stenvinkel P，Ikizler TA，etal.The elephant in uremia：Oxidant stress as a unifying concept of cardiovascular disease in uremia.Kidney Int，2002，62（5）：1524-1538.

11 Kao MPC，Ang DS，Pall A，etal.Oxidative stress in renaldysfunction：mechanisms，clinical sequelae and therapeutic options.J Hum Hypertens，2010，24（1）：1-8.

12 Caimi G，Carollo C，Montana M，et al.Nitric oxide metabolites，leukocyte activationmarkers and oxidative status in dialyzed subjects. Blood Purif，2009，27（2）：194-198.

13 Elshamaa MF，Sabry S，Nabih M，et al.Oxidative stressmarkers and C-reactive protein in pediatric patients on hemodialysis.Ann Nutr Metab，2009，55（4）：309-316.

14施雪楓，丁 峰，顧 勇，等.維持性血液透析患者氧化應(yīng)激指標(biāo)的研究與評(píng)價(jià).中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2002，2（5）：274-276.

15 deWintherMP，Kanters E，Kraal G，etal.Nuclear FactorκB signaling in atherogenesis.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2005，25（5）：904-914.

NF-κB activity of peripheral blood mononuclear cell，m icroinflammation，oxidative stress and cardiovascular disease in hemodialysis patients

XU Yan1，3，ZOU Jian-zhou2，3，LIU Zhong-hua2，XU Shao-wei2，SHEN Bo2，JINWei2，TENG Jie2，DING Xiao-qiang21Department of Nephrology，Shanghai Tongji Hospital，Shanghai200065，China
2Department of Nephrology，Zhongshan Hospital，F(xiàn)udan University，Shanghai200032，China
3XU Yan and ZOU Jian-zhou are considered to be first authors

DINGXiao-qiang（E-mail：dxq93216@medmail.com.cn）

Objective：The aim of the study was tomeasure nuclear factor kappa B（NF-κB）activity of peripheral blood mononuclear cell（PBMC）and evaluate the correlation of NF-κB activity andmicroinflammation，oxidative stress and cardiovascular disease in patients with maintenance hemodialysis（MHD）. M ethodology：The peripheral blood was obtained from thirty two patients with MHD before and after undergoing hemodialysis and 12 age-matched healthy subjects regarded as control.Nuclear extracts NF-κB activity of PBMC was measured by enzyme-linked immunosorbant assay（ELISA）and serum total antioxidant capacity（TAOC）and malondialdehyde（MDA）was measured by colorimetry. Pearson correlation and linear regression were used to assess the relationship between NF-κB activity and other laboratory parameters.Binary logistic regression was used to assess the correlation of NF-κB activity and CVD in MHD patients. Results：NF-κB activity of PBMC［（1 142±413）ng/mg nuclear extracts vs（2 083±39.5）ng/mg nuclear extracts，P＜0.05］，serum hsCRP（3.2 mg/L vs 0.5 mg/L，P＜0.05），TAOC［（21.9±6.6）U/ml vs（15.7±2.3）U/m l，P＜0.05］and MDA［（6.80±0.86）nmol/m l vs（3.89±0.51）nmol/m l，P＜0.05］were significantly higher in MHD patients compared with controls.After a single HD session，NF-κB activity of PBMC was increased acutely［post-HD（2 077±690）ng/mg nuclear extracts vs pre-HD（1 142±413）ng/mg nuclear extracts，P＜0.05］and T-AOC was decreased significantly（13.6±5.0 U/m l vs 21.9±6.6 U/ml，P＜0.05）.In all MHD patients，NF-κB activity was correlated positively with white blood cell count（r=0.454，P＜0.05），hsCRP（r=0.590，P＜0.05）and MDA（r=0.390，P＜0.05）.Linear regression analysis showed white blood cell count（β=0.338，P＜0.05），hsCRP（β=0.440，P＜0.05）and MDA（β=0.319，P＜0.05）were independently associated with NF-κB activity.High NF-κB activity（＞1 170 ng/mg nuclear extracts）was positively and independently associated with CVD（OR=8.47，P＜0.05）. Conclusion：NF-κB activity of PBMC ismarkedly elevated in MHD patients，which is associated with microinflammation，oxidative stress and cardiovascular disease and can be a usefulmarker of inflammation in patients with MHD.

hemodialysis nuclear factor kappa B inflammation oxidative stress cardiovascular disease

2011-05-31

（本文編輯 律 舟 春 江 書 實(shí)）

上海市重大項(xiàng)目（08DZ1900602）；教育部國(guó)家“211工程”重點(diǎn)學(xué)科建設(shè)項(xiàng)目（三期）（211XK20）

1上海市同濟(jì)醫(yī)院腎內(nèi)科（上海，200065）；2復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院腎內(nèi)科血液凈化中心；3共為第一作者

丁小強(qiáng)（E-mail：dxq93216@medmail.com.cn）

?2011年版權(quán)歸《腎臟病與透析腎移植雜志》編輯部所有