楊祥坤,許國(guó)振,潘 茹

心力衰竭(心衰)病人,在一定階段會(huì)出現(xiàn)三焦壅塞、氣血水液代謝失常的病理變化,以胸悶喘氣、咳痰、脘腹脹滿、雙下肢水腫、二便艱澀為其臨床特征。宣導(dǎo)瀉肺飲是我科治療心衰的臨床驗(yàn)方,具有宣導(dǎo)三焦,化痰活血利水的功效,臨床應(yīng)用有較好的療效。本實(shí)驗(yàn)通過采用宣導(dǎo)瀉肺飲作用于心衰大鼠,觀察其對(duì)心衰大鼠血流動(dòng)力學(xué)及神經(jīng)內(nèi)分泌的影響,并探討其作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 藥品與儀器 戊巴比妥鈉(中國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)上?；瘜W(xué)試劑公司生產(chǎn),批號(hào):20041117);肝素、青霉素等均為市售產(chǎn)品;BL-420E+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)、BL-New Century生物信號(hào)顯示與處理軟件(成都泰盟科技有限公司生產(chǎn))、YX-200型動(dòng)物呼吸機(jī)(成都泰盟科技有限公司生產(chǎn))、MFV-1200型電磁血流量計(jì)(日本光電公司生產(chǎn));血漿心鈉素(ANP)、醛固酮(ALD)、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)等放射免疫分析測(cè)定盒(北京北方生物技術(shù)研究所);Gγ-1200放射免疫計(jì)數(shù)器(中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)科技實(shí)業(yè)總公司中佳光電儀器分公司)。實(shí)驗(yàn)藥品:洛汀新(鹽酸貝那普利片,每片10mg,北京諾華制藥有限公司生產(chǎn),批號(hào):05032);宣導(dǎo)瀉肺飲濃縮液(組成:葶藶子、萊菔子、澤瀉、桑白皮、杏仁、川厚樸、豬苓、陳皮、當(dāng)歸、川木通等組成,相當(dāng)于每毫升含生藥3.81 g,武漢中醫(yī)院制劑室生產(chǎn))。

1.2 分組與模型制作 SPF級(jí)Wistar雄性大鼠60只,體重190 g～210 g。由湖北省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供[合格證號(hào):SCXK(鄂)2003-0005]。60只大鼠中隨機(jī)抽出10只作為假手術(shù)組,剩余均復(fù)制心衰大鼠模型,成功后再按隨機(jī)數(shù)字表法分為模型組、洛汀新組、中藥小劑量組、中藥大劑量組、中藥+洛汀新組。每組樣本數(shù)均為10只。造模方法:采用縮窄腹主動(dòng)脈方法[1]復(fù)制大鼠心衰模型,大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后,3%戊巴比妥鈉30mg/kg腹腔注射麻醉,無菌操作,劍突下腹正中切口,打開腹腔,在左腎動(dòng)脈分支以上,鈍性分離暴露腹主動(dòng)脈,用游標(biāo)卡尺測(cè)量其直徑,然后采用相應(yīng)的注射針頭與腹主動(dòng)脈一起平行結(jié)扎[2],抽出針頭,即可形成腹主動(dòng)脈狹窄(橫截面積減少50%～60%)。術(shù)后經(jīng)腹腔注射青霉素1周(前3 d每只4×105U,后4 d每只2×105U),預(yù)防感染。

1.3 處理因素 造模成功隨機(jī)分組后,開始給予實(shí)驗(yàn)藥物灌胃。假手術(shù)組和造模組予生理鹽水3 m L;洛汀新組予洛汀新2 mg/kg;中藥小劑量組予宣導(dǎo)瀉肺飲濃縮液0.28 g/kg;中藥大劑量組予宣導(dǎo)瀉肺飲濃縮液0.55 g/kg;中藥+洛汀新組予宣導(dǎo)瀉肺飲濃縮液0.28 g/kg,洛汀新 2 mg/kg。用法:每日 1次灌胃,連續(xù)1個(gè)月。

1.4 觀察指標(biāo)的測(cè)定 實(shí)驗(yàn)觀察前禁食12 h。3%戊巴比妥鈉30mg/kg腹腔注射,麻醉后固定連接BL-420E+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),記錄Ⅱ?qū)碾妶D及心率,行呼吸機(jī)輔助呼吸(頻率60/min,潮氣量3.5 m L)。分離主動(dòng)脈約 0.5 cm,安放 2 mm的電磁血流量計(jì)探頭,測(cè)每搏輸出量(SV)、心輸出量(CO)、每搏量指數(shù)(SV I)、心臟指數(shù)(CI)指標(biāo)。分離右頸總動(dòng)脈行動(dòng)脈插管,接BL-420E+生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),測(cè)動(dòng)脈收縮壓(SAP)、動(dòng)脈舒張壓(DAP)、平均動(dòng)脈壓(MAP)等指標(biāo)。用心導(dǎo)管于心尖部插入左心室[3],測(cè)左室收縮壓(LVSP)、左室內(nèi)壓最大上升速率(LV+dp/d tmax)等指標(biāo)。由左心室導(dǎo)管直接放血,離心后取血漿冰浴保存,送同位素室應(yīng)用Gγ-1200放射免疫計(jì)數(shù)器,采用均相競(jìng)爭(zhēng)放射免疫法測(cè)定AngⅡ、ALD、ANP等放免指標(biāo)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 選用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示。均數(shù)間兩兩比較采用t檢驗(yàn),多個(gè)樣本均數(shù)間每?jī)蓚€(gè)均數(shù)的比較采用q檢驗(yàn),多個(gè)樣本均數(shù)與一個(gè)對(duì)照組均數(shù)比較用Dunnett’t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)結(jié)果(見表1、表2) 模型組與假手術(shù)組相比,SBP 、DBP、M AP 、HR、LVSP、LV+dp/d tmax、SV 、CO 、SV I、CI等指標(biāo)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或 P＜0.01),模型組 HR增加明顯,其他各指標(biāo)下降明顯,說明造模成功。中藥大劑量組、中藥小劑量組、洛汀新組、中藥+洛汀新組與模型組相比,HR減慢明顯,其他各項(xiàng)指標(biāo)均有提高(P＜0.05或 P＜0.01)。說明各處理因素均能夠改善心功能。中藥大劑量組、中藥小劑量組、洛汀新組與中藥+洛汀新組比較,LVSP、LV+dp/dtmax、SV、CO、SV I、CI等均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或 P＜0.01),中藥+洛汀新組改善心功能更加明顯。中藥大劑量組與中藥小劑量組相比,DBP 、MAP 、LVSP、LV+dp/dtmax、SV、CO 、SV I、CI等指標(biāo)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明隨著宣導(dǎo)瀉肺飲劑量的增大,其改善心功能的作用也隨之增強(qiáng)。

表1 各組 SBP、DBP、M AP、LVSP、LV+dp/d tmax的比較(±s)

組別 SBP(mm Hg) DBP(mmHg) M AP(mmHg) LVSP(mm Hg) LV+dp/dtmax(mmH g/s)假手術(shù)組 114.50±21.00 95.00±24.47 101.70±23.23 126.00±12.45 4 666.00±639.61模型組 89.70±18.261) 69.80±23.781) 76.50±21.391) 96.10±15.902) 3 666.90±650.671)中藥大劑量組 118.90±18.424) 88.40±11.683)7) 98.50±13.183)7) 122.90±13.644)5)7) 6 202.40±558.014)6)8)中藥小劑量組 100.90±25.583)6) 70.00±17.596) 80.30±18.696) 110.30±10.863)6) 4 898.80±663.014)6)洛汀新組 112.90±18.193)5) 78.10±23.585) 89.70±21.105) 123.30±22.104)5) 4 874.00±614.024)6)中藥+洛汀新組 128.60±13.684) 95.90±11.004) 105.10±8.684) 144.00±22.154) 6 521.00±550.954)與假手術(shù)組比較,1)P＜0.05,2)P＜0.01;與模型組比較,3)P＜0.05,4)P＜0.01;與中藥+洛汀新組比較,5)P＜0.05,6)P＜0.01;與中藥小劑量組比較,7)P＜0.05,8)P＜0.01

表2 各組 HR、SV 、CO 、SV I、CI的比較(±s)

表2 各組 HR、SV 、CO 、SV I、CI的比較(±s)

組別 HR(/m in) SV(m L/beat) CO(m L/m in) SV I[m L/(beat·m2)] CI[m L/(m in·m2)]假手術(shù)組 381.80±32.26 0.228±0.034 86.967±14.512 7.72±1.12 2 942.45±437.78模型組 458.60±30.591) 0.124±0.0181) 56.620±6.7501) 4.35±0.771) 1 980.32±286.521)中藥大劑量組 389.10±26.032) 0.276±0.0572)3)5) 106.830±20.2662)3)5) 9.23±1.522)3)4) 3 579.04±552.172)3)4)中藥小劑量組 397.90±48.472) 0.207±0.0472)3) 80.849±12.9612)3) 7.57±1.922)3) 2 958.76±603.512)3)洛汀新組 384.40±35.452) 0.260±0.0412)3) 99.866±18.6362)3) 9.34±1.802)3) 3 592.29±801.2622)3)中藥+洛汀新組 399.20±27.562) 0.370±0.0592) 147.301±23.0292) 12.48±2.272) 4 970.58±901.352)與假手術(shù)組比較,1)P＜0.01;與模型組比較,2)P＜0.01;與中藥+洛汀新組比較,3)P＜0.01;與中藥小劑量組比較,4)P＜0.05,5)P＜0.01

2.2 放免指標(biāo)(見表3) 模型組 ANP、ALD、AngⅡ均高于假手術(shù)組(P＜0.05或P＜0.01),說明模型組存在神經(jīng)內(nèi)分泌過度激活,造模成功。與模型組比較,中藥大劑量組、中藥小劑量組、洛汀新組、中藥+洛汀新組ANP、ALD、AngⅡ水平下降(P＜0.05或P＜0.01)。說明各處理因素均能對(duì)抗神經(jīng)內(nèi)分泌激活。但中藥大劑量組、中藥+洛汀新組ALD水平較洛汀新組降低明顯(P＜0.01)。

表3 各組ANP、ALD、AngⅡ水平比較(±s)

表3 各組ANP、ALD、AngⅡ水平比較(±s)

組別 ANP(ng/m L) A LD(ng/m L) A ngⅡ(pg/mL)假手術(shù)組 2.13±0.37 0.99±0.31 1 543.10±506.25模型組 2.93±0.682) 1.50±0.481) 3 040.11±820.252)中藥大劑量組 2.03±0.454) 0.67±0.084)5)1 482.60±639.404)中藥小劑量組 2.03±0.524) 0.94±0.443) 1 930.51±479.543)洛汀新組 2.11±0.294) 1.08±0.373) 1 565.82±473.134)中藥+洛汀新組 2.19±0.733) 0.72±0.104)5)1 713.25±671.254)與假手術(shù)組比較,1)P＜0.05,2)P＜0.01;與模型組比較,3)P＜0.05,4)P＜0.01;與洛汀新組比較,5)P＜0.01

3 討 論

腹主動(dòng)脈結(jié)扎法[4]是常用的慢性壓力超負(fù)荷型心衰造模方法,該方法的機(jī)制是造成腎缺血,導(dǎo)致腎素增加,激活腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(RAS),增加外周阻力,同時(shí)狹窄腹主動(dòng)脈也可直接使心臟后負(fù)荷增加。此法與臨床上的充血性心力衰竭的病理變化過程較為吻合,且簡(jiǎn)單,易控制,機(jī)制明了,模型穩(wěn)定,心衰程度比較齊同。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,與模型組相比,各用藥組HR減慢明顯,其他各項(xiàng)血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)均有提高,明顯改善了心功能。中藥大劑量組與中藥小劑量組相比,DBP、MAP、LVSP、LV+dp/dtmax、SV、CO、SI、CI等指標(biāo)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明隨著宣導(dǎo)瀉肺飲劑量的增大,其改善心功能的作用也隨之增強(qiáng)?，F(xiàn)代藥理研究表明,葶藶子水提取物可明顯增強(qiáng)心肌收縮性即對(duì)心肌具有正性肌力作用,能改善心臟的泵血功能對(duì)心率無明顯影響,不增加心肌耗氧量,對(duì)心衰的心臟可增加輸出量,降低靜脈壓[5]。陳皮和當(dāng)歸均可增強(qiáng)心臟收縮力,使心輸出量增加,尚可擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈,使冠脈流量增加[6]。萊菔子的提取液靜脈注射能明顯降壓及降肺動(dòng)脈高壓,其中β-谷甾醇,尚有一定的鎮(zhèn)咳、祛痰作用[7]。川木通、豬苓、澤瀉[8]有利尿作用。杏仁有平喘作用,其含有的苦杏仁苷在人體內(nèi)分解產(chǎn)生氫氰酸,能鎮(zhèn)靜呼吸中樞而起止咳平喘作用。所以諸藥合用可以明顯改善心衰大鼠的血流動(dòng)力學(xué),從而改善心功能。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明,心室重塑是充血性心力衰竭發(fā)生、發(fā)展的重要病理環(huán)節(jié),而RAS系統(tǒng)的激活,是心室重塑的主要機(jī)制之一。AngⅡ、ALD是RAS系統(tǒng)主要的效應(yīng)物質(zhì),病理情況下,二者均可導(dǎo)致水鈉潴留和循環(huán)血量增加,增加心臟負(fù)荷;促進(jìn)心肌和平滑肌增生、重構(gòu)[9,10]。ANP是由心房分泌的一種擴(kuò)血管物質(zhì),它能直接抑制心肌細(xì)胞和血管平滑肌肥厚和間質(zhì)纖維化[11]。本次實(shí)驗(yàn)過程中心衰大鼠模型組血漿中的 AngⅡ、ANP、ALD分泌均較假手術(shù)組升高。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明宣導(dǎo)瀉肺飲能抑制 RAS系統(tǒng)的過度激活,降低血漿中的 AngⅡ、ANP、ALD水平,宣導(dǎo)瀉肺飲和洛汀新具有協(xié)同作用,然而,中藥+洛汀新組及中藥大、小劑量組在抑制ANP、ALD、AngⅡ等神經(jīng)內(nèi)分泌過度激活中,未見明顯差異。

綜上所述,宣導(dǎo)瀉肺飲治療心衰的作用,其機(jī)制可能與強(qiáng)心、利尿、降低心臟負(fù)荷以及抑制神經(jīng)內(nèi)分泌過度激活有關(guān),其他作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

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