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        生大黃對(duì)肝性腦病大鼠腫瘤壞死因子-α和血氨水平的影響

        2011-06-15 06:23:52周禎祥
        中國(guó)中醫(yī)急癥 2011年8期
        關(guān)鍵詞:肝性果糖腦病

        李 軍 周禎祥

        1廣東藥學(xué)院中藥學(xué)院(廣東廣州510006)

        2湖北中醫(yī)藥大學(xué)(湖北武漢430065)

        在臨床上應(yīng)用生大黃口服或者保留灌腸治療肝性腦?。℉E)取得較滿(mǎn)意療效[1-3]。 近年研究發(fā)現(xiàn)腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和血氨(BA)參與肝性腦病的發(fā)生[4],本實(shí)驗(yàn)旨在觀察生大黃對(duì)肝性腦病大鼠TNF-α和BA的影響,為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)參考。

        1 實(shí)驗(yàn)材料

        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)雄性wistar大鼠70只,體質(zhì)量(200±20)g,購(gòu)自湖北省醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,合格證號(hào):2009A052。

        1.2 試劑及藥品生大黃煎制成含生藥質(zhì)量濃度為1g/mL大黃水煎液,置于冰箱4℃保存?zhèn)溆?;乳果糖口服溶液,?guī)格:5.0g/10mL,由丹東康復(fù)制藥有限公司生產(chǎn),批號(hào):091201。四氯化碳(CCl4,分析純),由老河口市石油化工總廠生產(chǎn),批號(hào):090802,用液體石蠟配制成 20%的CCl4石蠟溶液;TNF-α(ELISA)試劑盒購(gòu)自深圳晶美生物工程有限公司;BA、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程公司。

        1.3 分組及造模70只大鼠采用數(shù)字表法隨機(jī)分為假手術(shù)組10只,模型組、生大黃組和乳果糖組各20只。HE大鼠模型制作參照文獻(xiàn)[5]方法。除假手術(shù)組外,采用CCl4誘導(dǎo),結(jié)扎、切除2/3肝臟,建立大鼠HE模型。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始每日1次給大鼠灌胃20%CCl4石蠟溶液5mL/kg,連續(xù)2d。手術(shù)前大鼠禁食12h,在戊巴比妥鈉麻醉下背位固定于手術(shù)板上,無(wú)菌操作,沿腹正中線上腹部小切口開(kāi)腹,暴露肝臟,依次在肝蒂部結(jié)扎左前葉及中葉,將此兩葉切除;然后再將暴露的肝右葉結(jié)扎,但不切除。假手術(shù)組相應(yīng)地同時(shí)灌胃同等體積的生理鹽水,并行假手術(shù)(剖腹但不切肝)。于實(shí)驗(yàn)第5日(術(shù)后禁食24 h)開(kāi)始,生大黃組和乳果糖組分別予生大黃水煎液5g/100g、乳果糖0.5g/100g灌胃,連續(xù)灌胃3d。實(shí)驗(yàn)第8日全部大鼠在乙醚麻醉下腦電圖檢測(cè)和心臟采血。

        1.4 標(biāo)本采集與檢測(cè)腦電圖檢測(cè):采血前,各組大鼠均在乙醚麻醉下俯臥,安置額枕骨間電極,用八道生理記錄儀描記腦電圖。血清生化指標(biāo):取血5mL,離心取血清,嚴(yán)格按照試劑盒操作說(shuō)明檢測(cè)血清 TNF-α、BA、AST、ALT 水平。

        1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 12.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料以(±s)表示,組間比較采用t檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié) 果

        2.1 各組大鼠死亡率比較假手術(shù)組大鼠無(wú)死亡,模型組死亡率為 60%(12/20),生大黃組死亡率為 30%(6/20),乳果糖組死亡率為35%(7/20);生大黃組和乳果糖組與模型組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);但生大黃組與乳果糖組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

        2.2 各組大鼠腦電圖變化假手術(shù)組大鼠腦電圖以α波為主,無(wú)明顯異常;模型組大鼠腦電頻率變慢,波幅變小,多以寬大的δ波為主;與模型組比較,生大黃組和乳果糖組大鼠腦電的頻率變快,尤其生大黃組接近于正常組,可見(jiàn)α波型。

        2.3 各組大鼠血清TNF-α、BA、ALT、AST水平比較見(jiàn)表 1。與假手術(shù)組比較,模型組大鼠血清TNF-α、BA、AST、ALT水平顯著升高(P均 <0.01);與模型組比較,生大黃組和乳果糖組大鼠血清TNF-α、BA、ALT、AST水平顯著降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05 或 0.01);生大黃組大鼠血清 TNF-α、BA、ALT 水平較乳果糖組低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

        表1 各組大鼠血清TNF-α、BA、AST、ALT水平比較 (±s)

        表1 各組大鼠血清TNF-α、BA、AST、ALT水平比較 (±s)

        與假手術(shù)組比較,△P<0.05,△△P<0.01;與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01;與乳果糖組比較,▲P<0.05。

        AST(U/L)120.53±18.65 425.32±58.62△△316.45±42.24△*351.52±46.22△*組 別 n TNF-α(pg/L)BA(mg/L)1.05±0.42 4.63±1.62△△生大黃組 14 112.46±26.43△**▲ 2.08±1.08△*▲乳果糖組 13 186.37±41.59△** 3.12±1.36△△*假手術(shù)組 10 51.38±9.42模型組 8 514.54±82.64△△ALT(U/L)52.25±10.52 942.67±185.36△△426.48±128.57△△*▲582.34±165.61△△*

        3 討 論

        HE是嚴(yán)重肝病引起的以代謝紊亂為基礎(chǔ),以意識(shí)改變和昏迷為主要表現(xiàn)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙綜合征[6]。目前HE發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚,多數(shù)認(rèn)為是多種因素作用的結(jié)果,氨中毒學(xué)說(shuō)仍占主導(dǎo)地位。BA來(lái)源分體內(nèi)代謝產(chǎn)氨和腸道內(nèi)產(chǎn)氨,入血后在肝臟中經(jīng)鳥(niǎo)氨酸循環(huán)合成尿素,由尿排出。肝臟損害時(shí),不能將進(jìn)入肝臟的氨都轉(zhuǎn)變?yōu)槟蛩?,使BA升高[7],氨進(jìn)入腦細(xì)胞后干擾腦細(xì)胞的能量代謝,使Na+-K+-ATP酶活性減低,ATP缺乏,能量供應(yīng)不足,以致不能維持中樞神經(jīng)系統(tǒng)的興奮活動(dòng),從而引起昏迷。BA在HE的發(fā)病過(guò)程中起著重要作用,能否降低BA濃度在臨床上是衡量藥物療效和評(píng)估患者預(yù)后的一個(gè)重要指標(biāo),臨床上常采用綜合性治療,尤其是降低BA水平來(lái)控制HE的出現(xiàn)[8]。TNF-α是淋巴細(xì)胞或單核巨噬細(xì)胞分泌的促炎癥細(xì)胞因子,它對(duì)機(jī)體炎癥反應(yīng)起著重要促進(jìn)作用,可刺激外周血中性粒細(xì)胞向肝組織內(nèi)移動(dòng)、浸潤(rùn),放大肝組織內(nèi)炎癥應(yīng)答,加重肝臟組織炎癥損傷。TNF-α和BA在肝硬化合并HE患者外周血中明顯升高,它們可能直接參與肝細(xì)胞功能損傷和HE 的發(fā)生[9]。

        HE 屬于中醫(yī)學(xué)“神昏”、“癡呆”、“厥逆”、“癲狂”等范疇。 下法是中醫(yī)學(xué)八法之一,是通過(guò)蕩滌腸胃,將停留在腸胃的有害物質(zhì)從下竅而出,以祛除病邪的一種方法,以通里攻下的方法有效防治肝性腦?。?0]。生大黃具有通腑瀉下,蕩滌腸道積滯功效,本實(shí)驗(yàn)中,造模后大鼠血清TNF-α、BA、ALT、AST水平均高于假手術(shù)組,在經(jīng)過(guò)乳果糖和生大黃的治療后,血清TNF-α、BA、ALT、AST水平下降,與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;且生大黃組大鼠血清TNF-α、BA、ALT水平較乳果糖組低,生大黃療效優(yōu)于乳果糖。本研究結(jié)果顯示,生大黃可改善大腦誘發(fā)電位異常和肝功能、降低血清TNF-α和BA水平,對(duì)大鼠HE有治療作用,其作用機(jī)制可能與生大黃瀉下作用,縮短腸道對(duì)氨、內(nèi)毒素等有毒物質(zhì)的吸收,抑制TNF-α對(duì)肝臟組織炎癥損傷有關(guān)。

        [1]王堂明,邱波,李樹(shù)民,等.生大黃粉口服治療肝性腦病60例[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志,2008,28(6):558-559.

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