湯 雯 屠幼英 張 維

(浙江大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院茶學(xué)系 杭州 310058)

茶樹花是茶樹(Camellia sinensis)的生殖器官之一，具備“花期長(zhǎng)、開花多、結(jié)實(shí)少”的特點(diǎn)。在我國(guó)，茶樹花通常被認(rèn)為在茶葉生產(chǎn)中毫無作用，這對(duì)茶資源是一巨大浪費(fèi)。研究表明，茶樹花含有與鮮葉相似的成分，包括豐富的蛋白質(zhì)、類黃酮、茶多糖、茶皂素等多種有益成分和活性物質(zhì)［1］，對(duì)人體具有解毒、降脂、降糖、抗癌、養(yǎng)顏等功效［2］。因此，充分利用茶樹花資源，提取其有效成分應(yīng)用于生產(chǎn)，不僅具備了相當(dāng)?shù)膽?yīng)用前景及巨大的經(jīng)濟(jì)效益，而且對(duì)資源有效配置起到了一定的作用［3］。

茶皂苷，又名茶皂素，是一類齊墩果烷型五環(huán)三萜類化合物，廣泛存在于茶樹的根、葉、種子和花中［4］。目前 2005 年，日本學(xué)者 Yoshikawa 等人［5］首次在茶樹花中分離出3種具有抑制血清甘油三酸脂的茶皂苷成分，這之后20余種茶樹花中特有皂苷單體被陸續(xù)檢測(cè)出。并且其化學(xué)結(jié)構(gòu)、生物活性及兩者之間關(guān)系也被相繼明確。研究發(fā)現(xiàn)，茶樹花皂苷具有降血脂、保護(hù)腸胃、降血糖等生物活性。2007年日本已經(jīng)開發(fā)出茶樹花飲料，可口可樂公司在日本和臺(tái)灣進(jìn)行銷售。并且被批準(zhǔn)作為保健飲品。另外，還與其他成分一起開發(fā)成為降脂減肥產(chǎn)品。

1 提取、分離與化學(xué)結(jié)構(gòu)研究

由于茶皂苷含量低，種類多，同分異構(gòu)體多，結(jié)構(gòu)相似，分離單體皂苷非常困難［6］。日本學(xué)者Yoshikawa課題組采用液相色譜、氣象色譜、液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用、多級(jí)質(zhì)譜聯(lián)用、核磁共振等技術(shù)對(duì)茶樹花皂苷單體分離鑒定、生物活性做了大量研究并取得相應(yīng)成果。

2005年，通過對(duì)日本志賀縣茶樹花花蕾冷凍干燥，甲醇提取，乙酸乙酯(取水相)、正丁醇萃取(取正丁醇相)，再對(duì)萃取物依次利用正相硅膠柱色譜、反相硅膠柱色譜、高效液相色譜分離純化，得出3種乙?；凝R墩果烷型的三萜類茶皂苷，分別命名為Floratheasaponins(A，B，C)［5］。之后，通過質(zhì)譜、核磁共振等手段鑒定了3種茶花皂苷的化學(xué)結(jié)構(gòu)。兩年之后，利用相似的方法，通過對(duì)乙酸乙酯萃取水相和正丁醇萃取、對(duì)正丁醇相進(jìn)行分離純化，從中國(guó)安徽茶樹花中分離鑒定出除Floratheasaponins(A，B，C)之外的6種乙酰化的齊墩果烷型的三萜類皂苷Floratheasaponins(D，E，F(xiàn)，G，H，I)，并確定其化學(xué)結(jié)構(gòu)，同時(shí)Assamsaponin E也被檢測(cè)出［7］。2009年茶樹花皂苷單體Floratheasaponins J也從日本茶樹花中分離鑒定確立［8］。

2007年，在日本靜岡縣的第二屆食品制藥科學(xué)研討會(huì)上，Yoshikawa對(duì)近期他們?cè)谥袊?guó)福建省茶樹花中新發(fā)現(xiàn)的3種被命名為Chakasaponins(Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ)的乙?；凝R墩果烷型的三萜類茶樹花皂苷單體進(jìn)行了闡述［9］，并于2009年對(duì)外宣布了結(jié)果［10］。2008年，他們?cè)谥袊?guó)四川茶樹花又發(fā)現(xiàn)了兩種乙?；凝R墩果烷型的三萜類皂苷Chakasaponins(V，VI)［11］。

2009年，從福建油茶(Camellia oleifera)茶花中通過萃取、提取、正相硅膠柱色譜、反相硅膠柱色譜、高效液相色譜分離純化，質(zhì)譜、核磁共振等鑒別結(jié)構(gòu)，得出4種油茶茶樹花乙?；凝R墩果烷型的三萜類皂苷 Yuchasaponins(A，B，C，D)［12］，同時(shí)野茉莉皂苷J(rèn)egosaponin B也被在這類油茶茶花中分離鑒定出。

茶樹花皂苷研究熱度自2005年其逐年增加，至目前為止，已有19種茶樹花特有皂苷單體，2種其他茶皂苷單體在茶樹花中被成功分離純化鑒定，且技術(shù)較為成熟。表1列出了這20種皂苷單體的英文名稱、來源、分子式、含量和主要功效。圖1，2，3，4，5，6分別為這22中皂苷單體結(jié)構(gòu)圖。

表1 目前已分離出的21中茶樹花皂苷單體名稱、來源、分子式、含量、主要功效

注:1、*表示此類皂苷在茶樹除茶花以外的器官中被首次發(fā)現(xiàn)。2、+號(hào)表示作用強(qiáng)烈程度，+++＞++＞+;－表示作用弱。

圖1 茶樹花皂苷單體 Floratheasaponins(A，B，C，D，E，F(xiàn)，G，H，I)結(jié)構(gòu)圖Figure 1 Chemical structure of Floratheasaponins(A，B，C，D，E，F(xiàn)，G，H，I)

2 茶樹花皂苷生物活性

隨著科學(xué)技術(shù)的日新月異，茶皂苷單體的生物活性被廣泛研究。茶樹花皂苷單體的生物活性主要有腸胃保護(hù)、降血脂、減肥抗過敏等。表1中主要功效一欄介紹了茶樹花皂苷各類生物活性。

2.1 腸胃保護(hù)作用

2007 年，Masayuki Yoshikawa課題組［16］發(fā)現(xiàn)茶樹花皂苷單體Floratheasaponins(A，B，C)對(duì)胃粘膜損傷修復(fù)作用較強(qiáng)。2009年［12］，他們發(fā)現(xiàn)福建茶樹花甲醇提取物和正丁醇萃取物可以保護(hù)因酒精和鎮(zhèn)痛藥對(duì)胃粘膜造成損傷后，指出胃粘膜保護(hù)相關(guān)的乙?；凝R墩果烷型配糖結(jié)構(gòu)，探討了皂苷結(jié)構(gòu)與胃粘膜活動(dòng)能力。他們認(rèn)為乙?；凝R墩果烷型的三萜部分21與22位?；鶊F(tuán)和3-O型葡萄糖苷酸結(jié)構(gòu)的皂苷與此最為相關(guān)。Yuchasaponins(A，B，C，D)配糖結(jié)構(gòu)與這些具有胃粘膜活動(dòng)能力的皂苷相同，且21與22位具備2個(gè)?；鶊F(tuán)，所以預(yù)計(jì)也有該功效。福建茶樹花甲醇提取物中特有的皂苷Chakasaponins(Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ)當(dāng)用量100mg/kg時(shí)具有明顯的加速胃蠕動(dòng)的功效［10］。

2.2 降高血脂、高血壓作用

2005年研究者報(bào)道了茶花皂苷Floratheasaponins(A，B，C)對(duì)吸收了橄欖油的大鼠血漿中的甘油三酸脂的影響［5］。茶樹花皂苷能明顯抑制大鼠血漿中的甘油三酸脂的升高。茶花皂苷C的作用比另外兩種皂苷的作用明顯。同時(shí)，他們通過比較Floratheasaponins(A，B，C)與 Theasaponins(E1，E2)［15］及它們的脫?；苌锟寡甯视腿嶂芰Γf明了皂苷21碳和22碳的?；芴岣咴碥盏幕钚?，而23碳的酰基則降低這種活性。

2.3 抗糖尿病作用

茶樹花皂苷單體Floratheasaponins(A，B，C)于2007年被發(fā)現(xiàn)有抑制機(jī)體糖類吸收作用［16］。Floratheasaponins類皂苷單體某些特有成分似乎對(duì)糖類吸收有著卓越的抑制作用。

2.4 抗過敏作用

組胺被認(rèn)為是即時(shí)過敏反應(yīng)離體試驗(yàn)的脫粒標(biāo)志物，由受抗原或者脫粒誘導(dǎo)的柱狀細(xì)胞刺激分離而得。此外，β-氨基己糖苷酶也被普遍認(rèn)為是柱狀細(xì)胞的脫粒標(biāo)志物，β-氨基己糖苷酶也儲(chǔ)藏于柱狀細(xì)胞的分泌器官中，當(dāng)柱狀細(xì)胞受到免疫刺激的時(shí)候也隨著組胺一起釋放出來［17］［18］。通過監(jiān)測(cè)小鼠嗜堿白血球細(xì)胞(RBL-2H3)釋放出的β-氨基己糖苷酶實(shí)驗(yàn)可以得出茶樹花皂苷Floratheasaponins(AF)在不影響β-氨基己糖苷酶活性的基礎(chǔ)上，抑制β-氨基己糖苷酶的釋放從而間接抑制細(xì)胞脫粒達(dá)到抗即時(shí)過敏效果。而且，茶樹花皂苷Floratheasaponins(B，E)的抑制作用較強(qiáng)，抑制率均超過50%，且活性比藥物 Tranilast、Ketorifen fumarate 更高［7］。

2.5 減肥作用

茶樹花皂苷Chakasaponins(Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ)甲醇溶物于2009年被證明具有抑制胰脂肪酶活性的功效。該實(shí)驗(yàn)以胰脂肪酶抑制藥物orlistat為對(duì)照，比較皂苷Chakasaponins(Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ)和Floratheasaponins B脫酰基衍生物的此種活性，結(jié)果表明Chakasaponins(Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ)對(duì)胰脂肪酶的抑制IC50處于0.17～0.53 mM，抑制能力雖小于藥物orlistat的IC5036 nM，但遠(yuǎn)大于Floratheasaponins B脫?；苌铩＿@個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果或許可以得出Chakasaponins(Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ)21和22位?；且种埔戎久富钚缘闹饕课唬?0］。

3 總結(jié)與展望

研究表明成齡茶園每畝可采鮮花200～300 kg，由此推算，全國(guó)茶區(qū)每年可產(chǎn)茶花300多萬噸，資源相當(dāng)豐富。但茶樹花皂苷的研究報(bào)道多見于日本，且市場(chǎng)開發(fā)面不廣，市面上皂苷產(chǎn)品也不多見，遠(yuǎn)不及茶多酚、茶黃素等相似物質(zhì)接受程度。其中一個(gè)最大的原因莫過于皂苷單體分離難度大、耗時(shí)多，對(duì)儀器要求高，比較難以實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。但茶樹花所含皂苷量較茶葉中大，皂苷生物活性眾多，且具備獨(dú)特性的生物活性，在改善資源浪費(fèi)現(xiàn)象的同時(shí)對(duì)生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等科研領(lǐng)域以及人們生活有著一定的利用價(jià)值。相信隨著人們對(duì)茶皂苷的認(rèn)識(shí)進(jìn)一步的深入，人們對(duì)茶花皂苷單體的藥物活性的研究進(jìn)一步驗(yàn)證和安全試驗(yàn)［19］。茶樹花的應(yīng)用領(lǐng)域會(huì)得到進(jìn)一步擴(kuò)大。

1 Yang ZY，Jie GL，He PM，Tu YY.Study on the antioxidant activity of tea flowers(Camellia sinensis).ASIA PACIFIC JOURNAL OF CLINICAL NUTRITION，2007，16:148－152.

2 Yang ZY，Tu YY，Baldermann S，Dong F，Xu Y，Watanabe N.Isolation and identification of compounds from the ethanolic extract of flowers of the tea(Camellia sinensis)plant and their contribution to the antioxidant capacity.LWT-FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY，2009，42(8):1439－1443.

3 王曉婧，翁 蔚，楊子銀，屠幼英.茶花研究利用現(xiàn)關(guān)及展望.中國(guó)茶葉，2004，26(4):8 －10.

4 王秋霜，趙超藝，凌彩金.國(guó)內(nèi)外茶樹花研究進(jìn)展概述.廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009(7):35 －38.

5 Yoshikawa M， Morikawa T， Yamamoto K， Matsuda H.Floratheasaponins A-C， Acylated Oleanane-Type Triter-pene Oligoglycosides with Anti-hyper1ipidemic Activitiesfrom Flowers of the Tea Plant(Camellia sinensis).Journal of Natural Products，2005，68(9):1360－1365.

6 侯如燕，宛曉春，文 漢.茶皂甙的化學(xué)結(jié)構(gòu)及生物活性研究進(jìn)展(綜述).安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，32(3):369 －372.

7 Yoshikawa M，Nakamura S，Kato Y，Matsuhira K，Matsuda H.Medicinal flowers. XIV. New acylated oleanane-type triterpene oligoglycosides with antiallergic activity from flower buds of Chinese tea plant(Camellia sinensis).CHEMICAL＆ PHARMACEUTICAL BULLETIN，2007，55(4):598 －605.

8 Sugimoto S，Yoshikawa M，Nakamura S，Matsuda H.Medicinal flowers.XXV.Structures of floratheasaponin j and chakanoside II from Japanese tea flower， flowerbuds ofcamellia sinensis.HETEROCYCLES，2009，78(4):1023 －1029.

9 Yoshikawa M，Sugimoto S，Katou Y，Nakamura S，Wang T，Yamashita C，Matsuda H.Accelerating effects on gastrointestinal transit and inhibitory effects against pancreatic lipase activity of new saponins from the flowers of Camellia sinensis.2nd Symposium on Pharmaceutical Food Science.OCT 18-19，2007.Shizuoka JAPAN.YAKUGAKUZASSHI-JOURNALOFTHEPHARMACEUTICAL SOCIETY OF JAPAN，2007，127:52－54.

10 Yoshikawa M，Sugimoto S，Kato Y，Nakamura S，Wang T，Yamashita C，Matsuda H.Acylated Oleanane-Type Triterpene Saponins with Acceleration of Gastrointestinal Transit and Inhibitory Effect on Pancreatic Lipase from Flower Buds of Chinese Tea Plant(Camellia sinensis).CHEMISTRY ＆ BIODIVERSITY，2009(6):903－915.

11 Yoshikawa M，Sugimoto S，Nakamura S，Matsuda H.Medicinal flowers.XXII-structures of chakasaponins V and VI，chakanoside I，and chakaflavonoside A from flower buds of Chinese tea plant(Camellia sinensis).CHEMICAL ＆ PHARMACEUTICAL BULLETIN，2008，56(9):1297－1303.

12 Sugimoto S，Chi GH，Kato Y，Nakamura S，Matsuda H，Yoshikawa M.Medicinal Flowers.XXVI.Structures of Acylated Oleanane-Type Triterpene Oligoglycosides，Yuchasaponins A，B，C，and D，from the Flower Buds of Camellia oleifera-Gastroprotective，Aldose Reductase Inhibitory，and Radical Scavenging Effects-.CHEMICAL＆ PHARMACEUTICAL BULLETIN，2009，57(3):269－275.

13 Murakami T，Nakamura J，Matsuda H，Yoshikawa M.Bioactive Saponins and Glycosides. XV. Saponin Constituents with Gastroprotective Effect from the Seeds of Tea Plant，Camellia sinensis L.var.assamica PIERRE， Cultivated in Sri Lanka:Structures of Assamsaponins A，B，C，D，and E.CHEMICAL＆PHARMACEUTICAL BULLETIN，1999，47(12):1759－1764.

14 Kazuko Y，Hiromichi H，Masami T，Shigenobu A.Antisweet natural products.XV.Structures of jegosaponins A-D from Styrax japonica SIEB.et ZUCC.CHEMICAL＆ PHARMACEUTICAL BULLETIN，2000，48(7):1093－1096.

15 Kitagawa I，Hori K，Motozawa T，Murakami T，Yoshikawa M.Structures of new acylated oleanene type triterpene oligoglycosides，theasaponins E1 and E2，from the seeds of tea plant，Camelia slnensis(L)Kuntze.CHEMICAL ＆ PHARMACEUTICAL BULLETIN，1998，46(12):1901－1906.

16 Yoshikawa M，Wang T，Sugimoto S，Nakamura S，Nagatomo A，Matsuda H，Harima S.Functional saponins in tea flower(Flower buds of Camellia sinensis):Gastroprotective and hypoglycemic effects of floratheasaponins and qualitative and quantitative analysis using HPLC.YAKUGAKU ZASSHI-JOURNAL OF THE PHARMACEUTICAL SOCIETY OF JAPAN，2008，128:141 －151.

17 Schwartz LB，Lewis RA，Seldin D，Austen KF.Acid hydrolases and tryptase from secretory granules of dispersed human lung mast cells.The Journal of Immunology，1981，126(4):1290 －1294.

18 DL Marquardt，SI Wasserman.Modulation of rat serosal mast cell biochemistry by in vivo dexamethasone administration.The Journal of Immunology，1983，131(2):934 －939.

19 Li B，Jin YX，Xu Y，Wu YY，Xu JY，Tu YY.Safety Evaluation of Tea(Camelliasinensis(L.)O. Kuntze)FlowerExtract:Assessment of Mutagenicity，and Acute and Subchronic Toxicity in Rats.Journal of Ethno pharmacology，2011，133:583－590.