喻澤林 張艷 白祖海

依據(jù)國際標準ISO/PIEC 17025《測試和校準實驗室能力的通用要求》中5.4.6“測量不確定度的評估”條款規(guī)定：測試實驗室應建立并實施測定不確定度評估程序。測量不確定度是表征合理賦予被測量之值的分散性，與測量結(jié)果相聯(lián)系的參數(shù)[1-2]。測量結(jié)果的可用性很大程度取決于測量結(jié)果不確定度的大小。對蔬菜中殺螟硫磷農(nóng)藥殘留量檢驗方法的測量不確定度研究迄今未見文獻報道。作者根據(jù)國家標準GB/T5009.20—2003和我國“測量不確定度評定與表示”的有關(guān)標準[1-4]對氣相色譜法定量測定蔬菜中殺螟硫磷農(nóng)藥殘留量的測量不確定度進行研究，找出影響不確定度的因素，求出各不確定度分量對總測量不確定度的相對貢獻，對不確定度進行評估，并對測量結(jié)果進行表述。為氣相色譜法定量測定農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留量的測量不確定度評定提供參考模型，對實驗室的分析測試工作具有一定的實用價值。

1 材料和方法

1.1 方法及原理

1.1.1 測量方法 GB/T5009.20-2003,食品中有機磷農(nóng)藥殘留量的測定[4]。

1.1.2 原理 試樣經(jīng)乙腈提取、氯化鈉分層去水后，有機相經(jīng)Carb/NH2固相萃取柱凈化后，用丙酮定容，經(jīng)GC/FPD（或GC-MS、GC/NPD）進行有機磷檢測，根據(jù)保留時間和峰面積分別進行定性和定量。

1.2 材料和儀器

1.2.1 樣品 蔬菜（泥）（質(zhì)控樣，2011年9月12日測定）。

1.2.2 殺螟硫磷標準液 100ug/ml的標準溶液（農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所，編號為GSB05-2287-2008，不確定度為±0.11ug/ml，2011年2月購買）。

1.2.3 設備與試劑 氣相色譜儀GC7890A帶FPD檢測器（安捷倫科技有限公司，編號為001-042-3）；千分之一電子分析天平（Sartorius，編號為001-004-3）；50ul移液槍(Eppendorf North America,Inc,系統(tǒng)誤差為±0.35ul)所用的試劑：為色譜純試劑；水：二次蒸餾水。

2 實驗過程

2.1 測定蔬菜（泥）（質(zhì)控樣）有機磷含量的步驟見圖1：

圖1

2.2 工作曲線制備 用50μl移液槍分別吸取100μg/ml殺螟硫磷標準溶液5、10、15、20、40μl用丙酮稀釋到1.0ml，上機測定。測定結(jié)果見表1。

2.3 樣品測定

試樣經(jīng)乙腈提取、氯化鈉分層去水后，有機相經(jīng)Carb/NH2固相萃取柱凈化后，用丙酮定容到2.0ml，經(jīng)GC/FPD進行殺螟硫磷磷檢測，測定結(jié)果見表2。

表1 標準系列下殺螟硫磷的峰面積

3 不確定度評定

3.1 建立數(shù)學模型

其中：Cx——試樣中殺螟硫磷的含量，mg/kg

C0——測定液中殺螟硫磷濃度，μg/ml

m——樣品取樣量，g

V——試樣定容體積，ml

3.2 不確定度來源分析

3.2.1 A類不確定度來源（uArel） 即由重復測定樣品引起的。

3.2.2 B類不確定度來源

3.2.2.1 樣品稱量引起的相對不確定度(umrel) 包括天平的允差、偏載誤差、重復性誤差引起的不確定度。

3.2.2.2 樣品定容體積引起的的相對不確定度(uvrel)包括2ml容量瓶允差、定容時的估讀誤差、校準與使用溫度不同引起的不確定度。

3.2.2.3 測定過程引起的相對不確定度（uxrel） 包括工作曲線擬合引起相對不確定度uxrel-1，移液槍的相對不確定度uxrel-2，標準溶液的相對不確定度uxrel-3，氣相色譜儀的相對不確定度uxrel-4。

4 不確定度分量的計算

4.1 A類不確定度評定

同一操作人員在相同的條件下對同一試樣進行6次檢測，采用標準曲線法擬合殺螟硫磷含量測定結(jié)果分別為0.303mg/kg、0.285mg/kg、0.288mg/kg、0.290mg/kg、0.300mg/kg、0.302mg/kg，平均值為0.295mg/kg。樣品重復測定的相對標準不確定度按貝賽爾公式計算，RSD=0.0267，p=6則

4.2 B類不確定度評定

4.2.1 樣品稱量引起的相對不確定度(umrel) 查稱量使用的電子天平檢定證書，其最大允許誤差±0.010 g，偏載誤差±0.010g，重復性誤差±0.015g，取k=，由于樣品的稱樣量為4.832g，所以由于樣品稱取的引起的相對標準不確定度

4.2.2 樣品定容體積引起的的相對不確定度（uvrel）[5]

4.2.2.1 校準：A級2ml容量瓶允差±0.01ml，取k=，則；

4.2.2.2 定容時的估讀誤差，估計為±0.01ml,取k=，則

4.2.2.3 溫度：由容量瓶校準溫度與使用時溫度不同引起的不確定度uvrel-3在實驗中測得水溫Tt=23℃。

4.2.3 測定過程引起的相對不確定度（uxrel）

4.2.3.1 工作曲線擬合引起相對不確定度uxrel-1[6-7]

殺螟硫磷含量x是工作曲線回歸計算得出，由上述實驗計算得出，回歸方程y=ax+b（y為色譜峰面積，x為殺螟硫磷含量μg/ml），則x=(y-b)/a ；本次實驗的標準回歸方程為：y=1712.2x-35.795，r=0.9999。按實驗方法的要求，對每個濃度的標準溶液重復測定三次，求出其平均峰面積，則x的標準不確定度uxrel-1可按式(3)求得：[8]

式中a-工作曲線斜率，a=1712.2；

p-樣品測定液測量次數(shù)，p=6；

n-標準曲線各點測量總次數(shù)， n=15；

4.2.3.2 移液槍的相對不確定度uxrel-2

4.2.3.3 標準溶液的相對不確定度u[9-10]xrel-3

4.2.3.4 氣相色譜儀的相對不確定度uxrel-4

4.3 B類不確定度計算及結(jié)果

4.4 合成標準不確定度計算及結(jié)果

5質(zhì)控樣中殺螟硫磷含量的擴展不確定度U(C)

6 測定結(jié)果表示

擴展不確定U(C)=2×0.295×0.024≈0.014mg/kg，包含因子k=2。

7 結(jié)論

以氣相色譜法定量測定蔬菜中殺螟硫磷農(nóng)藥殘留量為例，討論了測定蔬菜中殺螟硫磷農(nóng)藥殘留量測量不確定度的主要來源及其各不確定度分量評定方法，分析了影響測量標準不確定度結(jié)果的各個因素，比較其對總測量不確定度的相對貢獻。由此可見，被測樣品蔬菜中殺螟硫磷農(nóng)藥殘留量測定的測量不確定度主要來源于測量重復性，其它的因素影響相對較小。通過選擇合適的、可行的試驗方案，規(guī)范操作就可以有效減少不確定度，保證測量結(jié)果的準確、可靠。該方法也可以應用于氣相色譜法測定茶葉、蔬菜中其他農(nóng)藥殘留量測量不確定度分析，還可以應用于高效液相色譜法測定防腐劑含量的不確定度評定。

[1]國家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局.JJF1059-1999測量不確定度評定與表示[S].北京:中國計量出版社,1999,4.

[2]國家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局計量司.測量不確定度評定與表示指南[M].北京:中國計量出版社,2003,15-17

[3]魏昊,喬東.化學分析中不確定度的評估指南[M].北京:中國計量出版社,2002,26-28.

[4]GB/T5009.20-2003,食品中有機磷農(nóng)藥殘留量的測定[S].北京:2003:157-167.

[5]國家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局.國家計量檢定規(guī)程JJG196-2006.常用玻璃量器檢定規(guī)程[S].北京:中國計量出版社,2006：4-6.

[6]EllisonSLR,RossleinM.QuantifyingUncertaintyinAnalyticalMeasurement[S].2ndEd.UK,Eurachempcitac,2000:11.

[7]蔣永祥,葉麗.茶葉中多種有機磷農(nóng)藥殘留量測定不確定度的評定[J].分析實驗室,2006,25(12):54-57.

[8]SLee,YPark,WYangetal[J].Chromatogr,B,2008,865:33-39

[9]卓先義,馬棟,卜俊,等.氣相色譜法測定海洛因含量的測量不確定度評定[J].法醫(yī)學雜志,2006,22(6):421-423.

[10]戴維杰.液相色譜法測定雪碧中苯甲酸的不確定度分析[J].職業(yè)與健康,2004,20(5):46-47.