江明慶

癲癇（epilepsy）是以神經(jīng)元反復(fù)過度同步異常放電為特征的中樞神經(jīng)系統(tǒng)綜合征，其發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。近年來國內(nèi)外學(xué)者通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)癲癇的發(fā)病機(jī)制與機(jī)體的神經(jīng)免疫系統(tǒng)功能紊亂有密切關(guān)系[1]。白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子（TNF-α）是兩種重要的細(xì)胞因子，在機(jī)體免疫調(diào)控中扮演著重要角色，眾多研究已表明其在機(jī)體炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)答、細(xì)胞調(diào)節(jié)等過程發(fā)揮了重要的作用。但目前關(guān)于IL-1β和TNF-α與癲癇的關(guān)系研究較少。本實(shí)驗(yàn)通過觀察癲癇患者血清中L-1β和TNF-α變化，探討免疫學(xué)機(jī)制在癲癇發(fā)病中的作用，為將來癲癇患者的治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 資料和方法

1.1 臨床資料 40例癲癇患者均為2009年10月1日～2011年1月31日我院神經(jīng)內(nèi)科住院患者。根據(jù)病史、臨床特征、腦電圖、CT、MRI等輔助檢查而確診為原發(fā)性癲癇，并排除伴有感染、免疫性疾病或應(yīng)用免疫抑制劑或激素者。男26例，女14例，起病年齡12～68歲。40例急性腦梗死患者均為同期內(nèi)在我院確診的急性腦梗死患者（經(jīng)顱腦CT或MRI證實(shí)），男19例，女21例，起病年齡42～68歲。正常對(duì)照組為同一時(shí)間內(nèi)在我院經(jīng)體檢健康成人及兒科保健兒童人員，共40例。

1.2 標(biāo)本采取 抽取肘靜脈血3ml，2000rPm離心10min，分離血清與血細(xì)胞，留取血清lml，-20℃冰箱保存。血清IL-1β、TNF-α水平測定采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定，試劑盒購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，具體操作方法嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示。應(yīng)用SPSS13.0軟件處理，組間比較采用t檢驗(yàn)。由自動(dòng)Y計(jì)數(shù)器，按預(yù)定編制程序直接給出有關(guān)參數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)曲線及樣品濃度。Pearson直線關(guān)分析IL-1β、TNF-α相關(guān)性；P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組研究對(duì)象血清中IL-1β含量的比較，見表1。癲癇患者血清IL-1β含量較急性腦梗死患者組、正常人群組顯著增高（P＜0.01）；急性腦梗死患者IL-1β較正常人群組增高（P＜0.05）。

2.2 各組研究對(duì)象血清TNF-α含量的比較，見表1。癲癇患者血清TNF-α含量較急性腦梗死患者、正常人群組顯著增高（P＜0.01）；急性腦梗死患者TNF-α較正常人群組增高（P＜0.05）。

表1 各組血清IL-1β、TNF-α含量的比較

2.3 各組研究對(duì)象血清中IL-1β、TNF-α相關(guān)性分析。對(duì)癲癇組IL-1β、TNF-α含量進(jìn)行相關(guān)性分析，二者之間的相關(guān)系數(shù)為r=0.865，（P＜0.001），表明二者之間存在高度正相關(guān)；急性腦缺血組IL-1β和TNF-α之間存在弱相關(guān)（r=0.141，P＜0.05）；正常對(duì)照組無明顯相關(guān)性。

3 討論

癲癇是一種常見的神經(jīng)系統(tǒng)慢性發(fā)作性疾病，是一組由不同病因所引起，腦部神經(jīng)元高度同步化，且常具有自限性的異常放電所導(dǎo)致的以發(fā)作性、短暫性、重復(fù)性及刻板性的中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能失常為特征的綜合征。有關(guān)癲癇的發(fā)病機(jī)制目前有多種學(xué)說，包括鈣離子、興奮性氨基酸及多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路參與。自從有學(xué)者提出的免疫-神經(jīng)-內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)學(xué)說以來，國內(nèi)外許多學(xué)者在體內(nèi)外癲癇模型及臨床研究中證實(shí)了癲癇模型及癲癇患者在給予癲癇藥治療前后存在免疫異?，F(xiàn)象[1-3]。近年來隨著國內(nèi)外學(xué)者對(duì)癲癇的免疫學(xué)機(jī)制不斷深入研究，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞因子在癲癇免疫學(xué)機(jī)制中起了重要的作用，這些因子主要集中在IL-1β、IL-6和TNF-α等[4-5]。IL-1β和TNF-α主要由單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，具有多種生物學(xué)效應(yīng)的細(xì)胞調(diào)節(jié)因子，其異常表達(dá)和分泌失控與一些自身免疫性疾病的發(fā)生密切相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)癲癇發(fā)作時(shí)，IL-1β，TNF-α可誘導(dǎo)IL-8的表達(dá)，IL-8分泌增加，引起免疫細(xì)胞在受累組織內(nèi)浸潤、積聚和釋放多種生物活性物質(zhì)，造成局部組織的炎癥反應(yīng)[4-6]，其參與癲癇病理生理過程的機(jī)制可能與以下機(jī)制有關(guān)：抑制膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)谷氨酰合成酶的活性，使興奮性氨基酸（谷氨酸）活性增強(qiáng)；刺激膠質(zhì)細(xì)胞增生，并誘導(dǎo)膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生其他細(xì)胞因子；對(duì)海馬CA3錐體細(xì)胞產(chǎn)生興奮性影響，并減弱抑制性突觸后電位致異常癇樣放電等機(jī)制。

IL-1β、TNF-α作為兩種重要的炎性因子在多種疾病病理生理過程中發(fā)揮了重要的作用，但其在癲癇發(fā)病中的作用研究較少，本研究結(jié)果顯示癲癇患者血清IL-1β、TNF-α含量顯著高于急性腦梗死組及正常人群對(duì)照組患者（P＜0.05）。說明癲癇患者血清IL-1β、TNF-α異常升高為自身表現(xiàn)所致,繼而異常升高的IL-1β、TNF-α等細(xì)胞因子又參與了癲癇的病理生理過程，提示早期抑制癲癇患者細(xì)胞因子升高可減弱癲癇患者神經(jīng)元細(xì)胞損傷。另有學(xué)者在癲癇動(dòng)物模型及癲癇患者研究發(fā)現(xiàn)，抗癲癇藥物可顯著降低癲癇動(dòng)物模型及癲癇患者血清中IL-1β、TNF-α含量。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)IL-1β與TNF-α進(jìn)行了相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)癲癇組患者中二者的相關(guān)系數(shù)為r=0.865，說明二者高度相關(guān)。可能二者在癲癇的發(fā)病過程中相互影響，共同參與癲癇發(fā)病的免疫機(jī)制。

[1]Friedman A, Dingledine R.Molecular cascades that mediate the influence of inflammation on epilepsy[J].Epilepsia,2011,Suppl 3:33-39.

[2]Bauer S, Cepok S, Todorova-Rudolph A, et al.Etiology and site of temporal lobe epilepsy influence postictal cytokine release[J].Epilepsy Res,2009,86(1):82-88.

[3]Li G, Bauer S, Nowak M,et al.Cytokines and epilepsy [J].Seizure,2011,20(3):249-256.

[4]Chou IC, Lin WD, Wang CH,et al.Interleukin (IL)-1beta, IL-1 receptor antagonist, IL-6, IL-8, IL-10, and tumor necrosis factor alpha gene polymorphisms in patients with febrile seizures[J].J Clin Lab Anal,2010,24(3):154-159.

[5]Asano T, Ichiki K, Koizumi S,et al.IL-8 in cerebrospinal fluid from children with acute encephalopathy is higher than in that from children with febrile seizure[J].Scand J Immunol, 2010, 71(6): 447-451.

[6]Medhi B, Prakash A, Avti PK,et al.Intestinal inflammation and seizure susceptibility: understanding the role of tumour necrosis factor-alpha in a rat model[J].J Pharm Pharmacol,2009, 61(10):1359-1364.