段慧榮，李毅，馬彥軍

(甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院，蘭州730070)

在限制植物產(chǎn)量的諸多環(huán)境因子中，以供水條件最為重要，據(jù)統(tǒng)計(jì)，全世界由于水分脅迫導(dǎo)致的作物減產(chǎn)，可超過(guò)其它因素造成減產(chǎn)的總和。在干旱半干旱地區(qū)，水的短缺始終是制約農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)的關(guān)鍵因素[1]。在干旱半干旱地區(qū)，通過(guò)植樹造林，改善生態(tài)環(huán)境工作已成為當(dāng)務(wù)之急，而木本植物抗旱性研究是該區(qū)造林樹種選擇的基礎(chǔ)，是關(guān)系到該區(qū)造林成敗的關(guān)鍵因素之一[2]。

種子是植物最重要的繁殖材料，種子萌發(fā)是種子植物生活史中的關(guān)鍵階段，也是進(jìn)行植物抗旱性研究的重要時(shí)期[3]。研究表明，在植物生活周期中，植物死亡至少有95%發(fā)生在種子階段[4]。在該階段，土壤水分是影響種子萌發(fā)及幼苗生長(zhǎng)的重要生態(tài)因子。發(fā)芽階段的耐旱程度一定程度上反映了該物種的耐旱狀況。種子發(fā)芽狀況也是判定種子質(zhì)量、確定播種量的一項(xiàng)重要指標(biāo)。近年來(lái)，PEG高滲溶液法已經(jīng)成為研究種子萌發(fā)性狀的重要方法，在水稻、小麥等農(nóng)作物上廣泛使用[5]，在牧草上種子抗逆性研究方面也開始逐漸增多[6-7]，而在林木種子的抗逆性研究方面相對(duì)比較少[8]。

沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)為亞洲中部荒漠地區(qū)唯一的常綠闊葉灌木，是古老的第三紀(jì)孑遺種，也是國(guó)家三級(jí)保護(hù)植物。其抗逆能力極強(qiáng)，但是人工栽培卻極為困難，在保護(hù)和開發(fā)利用沙冬青的研究中，探索沙冬青的抗逆機(jī)理及其最佳繁殖栽培技術(shù)一直是人們關(guān)注的焦點(diǎn)。目前，有關(guān)沙冬青耐旱性研究已有一些報(bào)道，最早見于對(duì)其形態(tài)解剖特征的觀察[9]，但是有關(guān)沙冬青對(duì)PEG滲透脅迫的生理響應(yīng)研究報(bào)道較少?；谝陨险J(rèn)識(shí)，本試驗(yàn)以PEG-6000溶液模擬干旱脅迫，研究5種不同PEG濃度(5%～25%)對(duì)沙冬青種子萌發(fā)的影響及萌發(fā)幼苗細(xì)胞膜透性、可溶性蛋白、丙二醛和脯氨酸含量、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)、過(guò)氧化物酶(Peroxide，POD)和過(guò)氧化氫酶(Catalase，CAT)等各項(xiàng)生理指標(biāo)的變化，以期系統(tǒng)了解沙冬青種子萌發(fā)階段的耐旱性特征并揭示其抗旱機(jī)理，為沙冬青在干旱區(qū)播種提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

沙冬青成熟莢果于2009年8月初采自甘肅省蘭州市九州臺(tái)，千粒重為55.1 g。選取健壯飽滿、無(wú)損傷和無(wú)蟲害的灰黑色種子，用75%的酒精消毒1～2 min后，用自來(lái)水和蒸餾水沖洗干凈，浸泡在100℃水5 min后，用蒸餾水沖洗冷卻降溫，放置24 h后進(jìn)行PEG-6000脅迫處理。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

設(shè)質(zhì)量濃度 5%、10%、15%、20%和 25%，對(duì)應(yīng)滲透勢(shì)分別為-0.054，-0.177，-0.393，-0.735，-1.25 MPa共5個(gè)不同滲透勢(shì)濃度的PEG(中國(guó)醫(yī)藥(集團(tuán))上?；瘜W(xué)試劑公司)溶液，按照李合生[10]的方法配備，對(duì)上述沙冬青種子進(jìn)行干旱脅迫處理。處理采用紙上發(fā)芽，首先在培養(yǎng)皿內(nèi)鋪2層濾紙，將處理好的種子(大小一致無(wú)破損)置于濾紙上，然后加入等量的PEG溶液進(jìn)行萌發(fā)，以加蒸餾水為對(duì)照。每個(gè)處理3次重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50粒種子，室溫下發(fā)芽，于2009年10月份在甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。培養(yǎng)過(guò)程中每天向培養(yǎng)皿中加入相應(yīng)處理溶液，保持濾紙濕潤(rùn)。每3天更換1次濾紙，以防止溶液濃度變動(dòng)[11]。培養(yǎng)條件為:14 h光照，光照強(qiáng)度2 000 lx，晝溫20～25℃/夜溫15～20℃。

1.3 測(cè)定方法

1.3.1 種子發(fā)芽率和死亡率的測(cè)定 從種子置床之日起開始觀察，以種子露白為發(fā)芽標(biāo)準(zhǔn)[12]，逐日定時(shí)記錄發(fā)芽種子數(shù)，30 d后結(jié)束發(fā)芽試驗(yàn)。參照《種子生物學(xué)研究指南》[13]，計(jì)算發(fā)芽率和死亡率。其中死亡幼苗以種子萌發(fā)后不再生長(zhǎng)甚至腐爛為判斷標(biāo)準(zhǔn)。

發(fā)芽率=種子發(fā)芽數(shù)/供試種子數(shù)×100%

死亡率=死亡苗數(shù)/總苗數(shù)×100%

1.3.2 生理生化指標(biāo) 在室內(nèi)用電子天平(精度0.1 mg)稱取整株幼苗的鮮重[14]，在80℃烘箱內(nèi)烘干48 h，稱取干重[15]，發(fā)芽結(jié)束時(shí)自每個(gè)處理中分別選取同一生長(zhǎng)時(shí)期發(fā)育良好的健康植株整株進(jìn)行生理生化指標(biāo)的測(cè)定，每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，取平均值。細(xì)胞膜透性的測(cè)定采用相對(duì)電導(dǎo)率法，可溶性蛋白的含量測(cè)定采用G-250考馬斯亮藍(lán)法，丙二醛(MDA)含量的測(cè)定采用硫代巴比妥酸法。超氧化物歧化酶(SOD)活性的測(cè)定采用氮藍(lán)四唑(NBT)光還原法，以抑制氯化硝基氮藍(lán)四唑(NBT)光化還原50%為1個(gè)酶活性單位;過(guò)氧化物酶(POD)活性用愈創(chuàng)木酚比色法，在470 nm下測(cè)定，以每克植物鮮重中每分鐘所含酶活性單位(U)表示;過(guò)氧化氫酶(CAT)活性的測(cè)定采用過(guò)氧化氫分解法，脯氨酸(Proline)含量的測(cè)定采用酸式茚三酮顯色法[14]，顯色后在UV-2450分光光度計(jì)520 nm波長(zhǎng)處測(cè)定光密度值，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算游離脯氨酸含量。

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2003和SPSS 16.0軟件進(jìn)行作圖和數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 PEG脅迫對(duì)沙冬青種子萌發(fā)過(guò)程的影響

不同濃度PEG脅迫對(duì)沙冬青種子萌發(fā)的影響見圖1。5%和10%PEG濃度下種子發(fā)芽率及萌發(fā)幼苗鮮重與對(duì)照無(wú)明顯差異，死亡率低。PEG濃度為15%時(shí)種子死亡率為3.33%，萌發(fā)幼苗鮮重比對(duì)照降低了33.03%，差異顯著(P＜0.05);說(shuō)明PEG濃度達(dá)到 15%時(shí)開始抑制種子萌發(fā)生長(zhǎng)，并且隨著PEG濃度的升高種子所受到的抑制程度也越高。當(dāng)PEG濃度達(dá)到25%時(shí)，萌發(fā)幼苗變得矮小枯黃，鮮重降至0.116 g，極顯著地低于對(duì)照(P＜0.01)，發(fā)芽率為2%，死亡率達(dá)到98.89%。

2.2 PEG脅迫下沙冬青萌發(fā)幼苗生理指標(biāo)的變化

2.2.1 相對(duì)電導(dǎo)率和丙二醛含量 由圖2可以看出，隨著PEG濃度的增加，沙冬青萌發(fā)幼苗的相對(duì)電導(dǎo)率和丙二醛的含量均呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)。PEG濃度在5%～10%時(shí)沙冬青的電導(dǎo)率與對(duì)照變化不大，無(wú)明顯差異。當(dāng)濃度達(dá)到15%～25%時(shí)，電導(dǎo)率呈上升趨勢(shì)，并且均與對(duì)照有極顯著差異(P＜0.01)。丙二醛含量隨PEG濃度增大而增加，且當(dāng)濃度達(dá)到15%～25%時(shí)，各含量均與對(duì)照呈極顯著差異(P＜0.01)，分別比對(duì)照上升了162.63%、182.36%和188%。

圖1 PEG脅迫對(duì)沙冬青種子萌發(fā)過(guò)程的影響

圖2 PEG脅迫對(duì)沙冬青萌發(fā)幼苗相對(duì)電導(dǎo)率和丙二醛含量的影響

2.2.2 可溶性蛋白含量 可溶性蛋白具有較強(qiáng)的親水膠體性質(zhì)，可影響細(xì)胞的保水力。隨PEG濃度增大，可溶性蛋白含量呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)。PEG濃度為5%～15%時(shí)，含量隨濃度增大而上升，與對(duì)照無(wú)明顯差異，濃度繼續(xù)增大至20%和25%時(shí)開始下降，并分別比對(duì)照降低22.37%和32.89%，與對(duì)照差異顯著(P＜0.05)，見圖3。

圖3 PEG脅迫對(duì)沙冬青萌發(fā)幼苗可溶性蛋白含量的影響

2.3 PEG脅迫對(duì)幼苗保護(hù)性酶活性的影響

2.3.1 超氧化物歧化酶(SOD)活性 SOD的主要功能是清除氧自由基，是防止其對(duì)細(xì)胞膜系統(tǒng)傷害的一種很重要的抗氧化酶。由圖4可見，PEG脅迫對(duì)幼苗SOD活性的影響整體表現(xiàn)出先上升后下降的趨勢(shì)。其中5%～15%PEG濃度培養(yǎng)下，幼苗SOD活性隨著PEG濃度的增加而增大，分別比對(duì)照上升了20.27%、31.38%和65.53%，均與對(duì)照呈極顯著差異(P＜0.05)。PEG濃度為20%時(shí)活性下降，僅比對(duì)照增加了2.86%，無(wú)顯著性差異，說(shuō)明此時(shí)抗性減弱。當(dāng)濃度增加到25%時(shí)，酶活性比對(duì)照降低了26.27%，與對(duì)照呈極顯著差異。

圖4 PEG脅迫對(duì)沙冬青萌發(fā)幼苗SOD活性的影響

2.3.2 過(guò)氧化物酶(POD)活性 POD在植物體內(nèi)具有廣泛的作用，其主要作用之一是催化H2O2降解。PEG脅迫對(duì)沙冬青幼苗POD活性的影響與對(duì)SOD活性影響相似，都表現(xiàn)出先上升后下降的趨勢(shì)。如圖5所示，PEG濃度為5%時(shí)，幼苗POD活性比對(duì)照上升了50.96%，與對(duì)照有極顯著差異(P＜0.01)。10%PEG濃度下，幼苗的POD酶活性最高，與對(duì)照相比上升了76.38%。當(dāng)PEG濃度達(dá)到15%～20%時(shí)，幼苗 POD活性開始降低并分別低于對(duì)照27.67%、56.32%，其中濃度為15%時(shí)與對(duì)照差異不顯著。幼苗受到濃度為25%PEG脅迫時(shí)POD活性最小，比對(duì)照下降了73.48%，與對(duì)照差異極顯著。

圖5 PEG脅迫對(duì)沙冬青萌發(fā)幼苗POD活性的影響

2.3.3 過(guò)氧化氫酶(CAT)活性 圖6表明，各濃度PEG脅迫下CAT酶活性表現(xiàn)為先上升后下降的變化趨勢(shì)，與對(duì)照之間呈現(xiàn)極顯著差異(P＜0.01)。5%～10%PEG濃度下酶活性呈上升趨勢(shì)，分別比對(duì)照上升了68.14%和136.38%。當(dāng)PEG濃度達(dá)到15%時(shí)，酶的活性開始下降，但仍比對(duì)照高出81.06%，濃度為20%～25%時(shí)，酶活性比對(duì)照分別下降14.23%和63.39%。

圖6 PEG脅迫對(duì)沙冬青萌發(fā)幼苗CAT活性的影響

2.4 PEG脅迫對(duì)幼苗脯氨酸含量的影響

脯氨酸含量的提高是逆境條件下植物的自衛(wèi)反應(yīng)之一，細(xì)胞脯氨酸含量增加，維持了細(xì)胞的膨壓，同時(shí)可以保護(hù)酶和膜系統(tǒng)免受毒害。由圖7看出，PEG濃度低于20%時(shí)，隨濃度的增加沙冬青幼苗的脯氨酸含量升高，說(shuō)明5%～20%的PEG可以刺激幼苗脯氨酸含量極顯著地上升(P＜0.01)，并分別比對(duì)照增加了 164.37%、293.38%、313.7%和 332.03%。當(dāng)濃度達(dá)到25%時(shí)，脯氨酸含量迅速下降，并比對(duì)照下降了48.57%，與對(duì)照之間差異不明顯。

圖7 PEG脅迫對(duì)萌發(fā)幼苗脯氨酸含量的影響

3 討論

3.1 PEG脅迫對(duì)種子萌發(fā)的影響

用一定濃度的聚乙二醇(PEG)溶液模擬干旱逆境處理種子，使之產(chǎn)生滲透脅迫來(lái)研究水分脅迫下種子的生理反應(yīng)，已有較多報(bào)道。種子吸水力與植物的抗旱性呈正相關(guān)，吸水力強(qiáng)的種子在干旱脅迫下能夠保持較高的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)，而吸水力弱的種子則相反[16]。本試驗(yàn)中，隨脅迫程度的加深，沙冬青種子發(fā)芽率顯著下降，死亡率呈明顯上升趨勢(shì)，鮮重下降。表明隨脅迫程度的加深，沙冬青種子萌發(fā)受到不同程度的抑制，當(dāng)脅迫超過(guò)種子的耐受限度(25%)時(shí)將難以萌發(fā)并致死，這與董麗華[17]等的研究結(jié)果一致。

3.2 PEG脅迫對(duì)萌發(fā)幼苗生理生化指標(biāo)的影響

細(xì)胞膜是植物體內(nèi)部與外部物質(zhì)交換的通道，多種逆境都會(huì)使植物細(xì)胞膜系統(tǒng)受損，導(dǎo)致膜透性增大，內(nèi)容物滲漏。植物組織外滲液電導(dǎo)率可以表征質(zhì)膜透性的變化并反映脅迫條件下質(zhì)膜受損傷的程度，電導(dǎo)率增幅越大，植物受脅迫損傷程度越重。丙二醛(MDA)是植物在受到傷害時(shí)細(xì)胞膜發(fā)生膜脂過(guò)氧化作用形成的最終分解產(chǎn)物，其含量代表著植物細(xì)胞遭受逆境傷害的程度和膜脂過(guò)氧化程度[18]。本試驗(yàn)中，隨脅迫程度的加深，沙冬青萌發(fā)幼苗的電導(dǎo)率不斷上升，同時(shí)MDA含量也不斷增加，表明隨脅迫程度加深，萌發(fā)幼苗的膜系統(tǒng)受到不同程度的破壞，膜質(zhì)過(guò)氧化作用增大，抗性減弱，這與王宇超等[18]的研究結(jié)果一致。

逆境和脅迫會(huì)導(dǎo)致植物體內(nèi)大量活性氧的產(chǎn)生，SOD作為重要的活性氧清除酶，能及時(shí)清除體內(nèi)產(chǎn)生的活性氧將超氧陰離子自由基快速歧化為H2O2和H2O，保護(hù)細(xì)胞免受傷害[19]。POD和CAT是清除H2O2的重要酶類，能夠分解H2O2為H2O和O2，CAT與超氧化物歧化酶SOD偶聯(lián)，可以徹底清除體內(nèi)超氧陰離子及H2O2等氧自由基，消除逆境對(duì)植物的傷害。試驗(yàn)中隨脅迫程度的加深，SOD、POD和CAT活性均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，這表明在一定范圍(5%～10%)內(nèi)，PEG脅迫能誘導(dǎo)體內(nèi)保護(hù)酶活性提高，從而有效地清除活性氧，但嚴(yán)重脅迫則會(huì)破壞體內(nèi)保護(hù)酶系統(tǒng)的活力和平衡，損傷膜的結(jié)構(gòu)并抑制酶的活性。這與左利萍等[20]在檸條葉片的抗氧化酶活性影響的結(jié)果一致。

蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的體現(xiàn)者，植物不同其蛋白質(zhì)的種類和數(shù)量也不同。植物體內(nèi)的可溶性蛋白質(zhì)大多是參與各種代謝的酶類，在受到干旱脅迫時(shí)，它們會(huì)發(fā)生一定的變化，測(cè)定其含量是了解植物抗逆性的一個(gè)重要指標(biāo)[21]。試驗(yàn)中，沙冬青萌發(fā)幼苗中可溶性蛋白的含量隨脅迫程度加深先增加后降低，說(shuō)明通過(guò)生成蛋白為抵抗脅迫環(huán)境提供物質(zhì)基礎(chǔ)。研究中，當(dāng)PEG濃度在20%以上時(shí)，可溶性蛋白的含量明顯低于對(duì)照，說(shuō)明此脅迫已超過(guò)沙冬青的耐受極限，蛋白質(zhì)水解加快。游離脯氨酸是作為滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)和防脫水劑而起作用的，可以降低細(xì)胞水勢(shì)和維持膨壓，脯氨酸除了發(fā)揮其本身的滲透、保護(hù)作用外，又為新的蛋白質(zhì)的合成提供了氨基，從而促進(jìn)了與抗旱有關(guān)的新蛋白質(zhì)的合成。研究表明，在干旱或其它逆境條件中植物體內(nèi)脯氨酸含量會(huì)大量積累。本試驗(yàn)結(jié)果表明，沙冬青萌發(fā)幼苗中脯氨酸含量隨脅迫程度加深先增大后降低，表明脯氨酸作為細(xì)胞內(nèi)的滲透調(diào)節(jié)劑，在滲透脅迫較輕時(shí)可以有效地平衡液泡滲透勢(shì)，保護(hù)生物大分子不被破壞，作為活性氧的清除劑和抗冷劑抵抗?jié)B透脅迫。脅迫濃度超過(guò)25%時(shí)，細(xì)胞被破壞，導(dǎo)致脯氨酸含量反而降低。

由于本次試驗(yàn)只是對(duì)PEG模擬干旱脅迫下沙冬青種子萌發(fā)進(jìn)行了研究，認(rèn)為沙冬青可以適應(yīng)PEG濃度15%以下的干旱脅迫環(huán)境，至于后期生長(zhǎng)過(guò)程中的幼苗形態(tài)和生理生化變化，還有待進(jìn)一步研究和探討。

4 結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明，沙冬青種子在PEG濃度為5%～10%時(shí)能夠萌發(fā)生長(zhǎng)，通過(guò)增加滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)如可溶性蛋白和脯氨酸的含量，提高保護(hù)性酶SOD、POD與CAT的活性來(lái)抵抗脅迫環(huán)境。其能夠忍受PEG濃度15%的干旱脅迫環(huán)境，但已經(jīng)開始出現(xiàn)不適現(xiàn)象，在高濃度(20%和25%)時(shí)保護(hù)作用被抑制，種子基本不能萌發(fā)，萌發(fā)幼苗矮小枯黃，死亡率上升，抗性下降。

[1] 鄧潔，陳靜，賀康寧.灌水量和灌水時(shí)期對(duì)冬小麥耗水特性和生理特性的影響[J].水土保持研究，2009，16(2):191-194.

[2] 崔大練，馬玉心，石戈，等.紫穗槐幼苗葉片對(duì)不同干旱梯度脅迫的生理生態(tài)響應(yīng)[J].水土保持研究，2010，17(2):178-185.

[3] 李培英，孫宗玖，阿不來(lái)提.PEG模擬干旱脅迫下29份偃麥草種質(zhì)種子萌發(fā)期抗旱性評(píng)價(jià)[J].中國(guó)草地學(xué)報(bào)，2010，32(1):32-39.

[4] 班勇.植物生活史對(duì)策的進(jìn)化[J].生態(tài)學(xué)雜志，1995，14(3):33-39.

[5] 安永平，強(qiáng)愛玲，張媛媛，等.滲透脅迫下水稻種子萌發(fā)特性及抗旱性鑒定指標(biāo)研究[J].植物遺傳資源學(xué)報(bào)，2006，7(4):421-426.

[6] 賈國(guó)梅，張紅燕，韓京成.土壤含水量對(duì)狗牙根葉片生理生態(tài)指標(biāo)的影響[J].水土保持研究，2009，16(5):199-202.

[7] 左勝鵬，王會(huì)梅，李鳳民，等.半干旱區(qū)四種典型豆科牧草群落生理生態(tài)的分異研究[J].水土保持研究，2010，17(1):167-173.

[8] 曾彥軍，王彥榮.幾種旱生灌木種子萌發(fā)對(duì)干旱脅迫的響應(yīng)[J].生態(tài)學(xué)報(bào)，2002，13(8):953-956.

[9] 張濤.沙冬青生理結(jié)構(gòu)特性的研究[J].林業(yè)科學(xué)，1988，24(4):508-509.

[10] 李合生.植物生理生化試驗(yàn)原理和技術(shù)[M].北京:高等教育出版社，2000:260-265.

[11] 宋麗華，周月君.鹽脅迫對(duì)臭椿種子發(fā)芽的影響[J].種子，2008，27(9):22-25.

[12] 秦文靜，梁宗鎖.四種豆科牧草萌發(fā)期對(duì)干旱脅迫的響應(yīng)及抗旱性評(píng)價(jià)[J].草業(yè)學(xué)報(bào)，2010，19(4):61-70.

[13] 宋松泉，程紅焱，龍春林，等.種子生物學(xué)研究指南[M].北京:科學(xué)出版社，2000.

[14] 鄭光華.種子生理研究[M].北京:科學(xué)出版社，2004:706.

[15] 杜建雄，侯向陽(yáng)，劉金榮.草地早熟禾對(duì)干旱及旱后復(fù)水的生理響應(yīng)研究[J].草業(yè)學(xué)報(bào)2010，19(2):31-38.

[16] 郭彥軍，倪郁，呂俊，等.豆科牧草種子萌發(fā)特性與其抗旱性差異的研究[J].中國(guó)草地，2003，25(3):24-27.

[17] 董麗華，王寧，姚愛興.不同品種早熟禾種子萌發(fā)期抗旱性研究[J].農(nóng)業(yè)科學(xué)研究，2005，26(2):6-8.

[18] 王宇超，王得祥，彭少兵，等.干旱脅迫對(duì)木本濱藜生理特性的影響[J].林業(yè)科學(xué)，2010，46(1):61-67.

[19] 安鈺，沈應(yīng)柏，張志翔.傷害脅迫對(duì)合作楊葉片膜質(zhì)過(guò)氧化及抗氧化酶活性的影響[J].水土保持研究，2010，17(5):241-244.

[20] 左利萍，李毅，李朝周.滲透脅迫對(duì)檸條葉片脂質(zhì)過(guò)氧化及抗氧化酶活性的影響[J].中國(guó)草地學(xué)報(bào)，2009，31(4):69-73.

[21] 史玉煒，王燕凌，李文兵，等.水分脅迫對(duì)剛毛檉柳可溶性蛋白、可溶性糖和脯氨酸含量變化的影響[J].新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，30(2):5-8.