國(guó)家飼料工程技術(shù)研究中心 陳 香 譙仕彥*

北京中農(nóng)穎泰生物技術(shù)有限公司 李 波

湖南偉業(yè)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)有限公司 易學(xué)武

抗菌肽是生物防御系統(tǒng)產(chǎn)生的一類對(duì)抗外源性病原體的肽類物質(zhì)，具有抗細(xì)菌、真菌、霉菌、病毒、原蟲(chóng)、癌細(xì)胞等多種活性，且不易產(chǎn)生耐藥性，具有廣闊的應(yīng)用前景（安春菊等，2003）。天蠶素抗菌肽最早由瑞典科學(xué)家Boman等于1980年用陰溝通桿菌及大腸桿菌誘導(dǎo)惜古比天蠶蛹后發(fā)現(xiàn)的該物質(zhì)，研究發(fā)現(xiàn)，其不但具有廣譜抗菌效果，而且對(duì)病毒、真菌、腫瘤等都具有一定的殺傷作用（Boman，1995）。

本試驗(yàn)所用天蠶素抗菌肽，是人工設(shè)計(jì)合成并在枯草芽孢桿菌中成功表達(dá)的基因工程產(chǎn)物（Chen等，2009）。體外試驗(yàn)已證明它能有效的抑制大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門(mén)氏菌等有害菌。目前，天蠶素抗菌肽已實(shí)現(xiàn)了發(fā)酵罐的成功發(fā)酵，因此，可將其直接運(yùn)用于斷奶仔豬的飼糧中，本文旨在探討天蠶素抗菌肽對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響，促進(jìn)其在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 試驗(yàn)選用240頭初始體重（11.64±2.30）kg的杜×大×長(zhǎng)健康斷奶仔豬進(jìn)行試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)選用的斷奶仔豬按體重相近、遺傳基礎(chǔ)相似的原則，完全隨機(jī)分為4個(gè)處理，每處理6重復(fù)，每重復(fù)（圈）10頭豬（公、母各半），試驗(yàn)設(shè)計(jì)為：對(duì)照組，即抗生素組（基礎(chǔ)飼糧+200 mg/kg 10%的硫酸抗敵素+1000 mg/kg 10%的桿菌肽鋅）；試驗(yàn)一組、二組、三組在基礎(chǔ)飼糧基礎(chǔ)上分別添加250、500、750 mg/kg的天蠶素抗菌肽。試驗(yàn)期為28 d，由專人管理與記錄，其他日常管理按正常進(jìn)行。

1.3 試驗(yàn)飼糧 試驗(yàn)采用玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，參照NRC（1998）豬營(yíng)養(yǎng)需要量標(biāo)準(zhǔn)配制豬試驗(yàn)基礎(chǔ)飼糧及預(yù)混料。試驗(yàn)基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平如表1所示，各試驗(yàn)組飼糧的4%預(yù)混料配方見(jiàn)表2，天蠶素抗菌肽由北京中農(nóng)穎泰生物技術(shù)有限公司提供。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

表2 4%預(yù)混料配方 g/kg

1.4 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)豬飼養(yǎng)在封閉式保育豬舍內(nèi)，水泥地面、漏逢地板各半，通風(fēng)良好。試驗(yàn)期間每天上午和下午各加料一次，自由采食和飲水，按豬場(chǎng)常規(guī)程序進(jìn)行消毒、驅(qū)蟲(chóng)和免疫。

1.5 檢測(cè)指標(biāo)和方法 生長(zhǎng)性能指標(biāo)：分別于試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí)早晨空腹逐只稱量其體重，以重復(fù)（圈）為單位記錄耗料量，計(jì)算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和飼料轉(zhuǎn)化率（FCR）。腹瀉率：每天觀察仔豬排糞情況，每天上午、傍晚逐頭檢查仔豬肛門(mén)，觀察有無(wú)糞便污染及紅腫并做好記錄。腹瀉頻率、腹瀉指數(shù)反映了腹瀉的嚴(yán)重程度。

1.6 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS統(tǒng)計(jì)，進(jìn)行方差分析，差異顯著則進(jìn)行Duncan’s多重比較。

2 結(jié)果

試驗(yàn)仔豬采食量、日增重和飼料轉(zhuǎn)化率如表3所示。試驗(yàn)初始的各組體重差異不顯著（P=0.99），試驗(yàn)期的平均日增重，試驗(yàn)各組相對(duì)于抗生素組均有改善趨勢(shì)，差異均不顯著（P＞0.05）。但從各指標(biāo)的趨勢(shì)上看，添加天蠶素抗菌肽的試驗(yàn)組的表現(xiàn)優(yōu)于抗生素對(duì)照組。與抗生素對(duì)照組相比，飼料轉(zhuǎn)化率則有明顯的改善。試驗(yàn)一組、試驗(yàn)二組和試驗(yàn)三組在飼料轉(zhuǎn)化率上比抗生素對(duì)照組分別降低了 18.29%（P ＜ 0.01）、7.93%（P ＜0.05）和14.02%（P＜0.05）。各組之間日采食量之間差異不顯著（P=0.291）。試驗(yàn)一組、試驗(yàn)二組和試驗(yàn)三組的采食量分別比抗生素對(duì)照組降低了14.29%、7.69% 和8.79%（P＞0.05）。 這證明試驗(yàn)組的斷奶仔豬在不影響日增重的情況下減少了采食量，有效降低生產(chǎn)成本。

表3 天蠶素抗菌肽對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響

3 討論

3.1 抗菌肽與傳統(tǒng)抗生素對(duì)比優(yōu)勢(shì) 與傳統(tǒng)的抗生素相比，抗菌肽除了能殺滅細(xì)菌、真菌、寄生蟲(chóng)和病毒以外，對(duì)癌細(xì)胞也有一定殺傷作用，此外，抗菌肽在先天及獲得性免疫方面具十分重要的作用，傳統(tǒng)抗生素對(duì)細(xì)胞的作用靶點(diǎn)通常是單一的個(gè)體或者族群，而抗菌肽的作用靶點(diǎn)并不如此特定，可能摻在多靶點(diǎn)；在耐藥性上，傳統(tǒng)抗生素的抗藥性菌產(chǎn)生頻率為10-7～10-10，或者僅僅在亞MIC濃度下幾代產(chǎn)生，而對(duì)于抗菌肽來(lái)說(shuō)，耐藥性一般不能直接產(chǎn)生，需要在亞MIC下誘導(dǎo)許多代后才有耐藥性菌產(chǎn)生；抗菌肽可以相對(duì)獨(dú)立地發(fā)揮其抗菌作用，也可以與其他因子協(xié)同作用，顯示出更高的活性，抗菌肽之間，抗菌肽與傳統(tǒng)抗生素具有協(xié)同作用，也與乳鐵蛋白、溶菌酶等發(fā)生作用以提高活性（Marr等，2006）。

本試驗(yàn)表明，通過(guò)在飼糧中添加不同劑量的天蠶素抗菌肽，對(duì)斷奶仔豬的各項(xiàng)生產(chǎn)性能均有所提高。

3.2 抗菌肽作為飼料添加劑應(yīng)用的優(yōu)勢(shì) 抗菌肽能夠耐受飼料制粒時(shí)的高溫，本試驗(yàn)所采用的是顆粒飼料，試驗(yàn)表明，其抗菌肽生物學(xué)活性未受到損失；抗菌肽殺菌機(jī)理獨(dú)特，病原菌不易對(duì)抗菌肽產(chǎn)生耐藥性，以工程菌工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)抗菌肽，可大規(guī)模生產(chǎn)，生產(chǎn)周期短，生產(chǎn)成本低且不受季節(jié)和氣候變化等外在環(huán)境的影響。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)證明，在斷奶仔豬飼糧中添加天蠶素抗菌肽，飼料轉(zhuǎn)化率、促生長(zhǎng)和抗腹瀉等效果要優(yōu)于抗生素組（10%的硫酸抗敵素200 mg/kg和10%的桿菌肽鋅1000 mg/kg）。其中，以添加250 mg/kg的天蠶素抗菌肽效果最優(yōu)。

[1]安春菊，盛長(zhǎng)忠，李德森，等.一類潛在的新藥——抗菌肽[J].中國(guó)新藥雜志，2003，12（9）：704 ～707.

[2]Boman H G.Peptide antibiotics and their role in innate immunity[J].Annual Review of Immunology，1995，13（3）：61 ～92.

[3]Marr A K，Gooderham W J，Hancock R E.Antibacterial Peptides for therapeutic use：obstaclesand realistic outlook [J].CurrentOpinion in pharmacolog，2006，6（5）：468 ～472.

[4]Chen X，Zhu F M，Cao Y H，et al.Nover Expression Vector for Secretion of Cecropin AD in Bacillus subtilis with Enhanced Antimicrobial Activity[J].Antimicrob Agents Chemother，2009，53（9）：3683 ～3689.