白東清 吳 旋 郭永軍 朱國(guó)霞 邢克智 寧 博

(天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)科學(xué)系，天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，國(guó)家級(jí)實(shí)踐教學(xué)示范中心，天津 300384)

長(zhǎng)期投喂黃芪多糖對(duì)黃顙魚(yú)抗氧化及非特異性免疫指標(biāo)的影響

白東清 吳 旋 郭永軍 朱國(guó)霞 邢克智*寧 博

(天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)科學(xué)系，天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，國(guó)家級(jí)實(shí)踐教學(xué)示范中心，天津 300384)

本文旨在探討添加不同水平的黃芪多糖(astraglus polysaccharides，APS)對(duì)黃顙魚(yú)(Pelteobagrus fulvidraco)抗氧化及非特異性免疫指標(biāo)的影響。選取2齡健康黃顙魚(yú)540尾，隨機(jī)分成6組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30尾魚(yú)，分別投喂在基礎(chǔ)飼料中添加0(對(duì)照組)、300、600、900、1 200、1 500 mg/kg黃芪多糖的試驗(yàn)飼料，試驗(yàn)期為8周。于試驗(yàn)結(jié)束后測(cè)定黃顙魚(yú)體內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)與溶菌酶(LSZ)活力，丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量，吞噬細(xì)胞的吞噬百分比(PP)、吞噬指數(shù)(PI)以及疾病抗性等指標(biāo)。結(jié)果表明:與對(duì)照組相比，300 mg/kg組頭腎中以及600、900 mg/kg組肌肉中SOD活力分別提高1.61、1.95與2.08倍，差異顯著(P＜0.05);600～1 500 mg/kg黃芪多糖能顯著提高黃顙魚(yú)心臟、肝臟、脾臟、肌肉與鰓中的CAT活力(P＜0.05)，且各添加組的頭腎與中腎中CAT活力均顯著升高(P＜0.05);300～1 500 mg/kg組肝臟與脾臟中，600～1 500 mg/kg組心臟、頭腎、中腎、肌肉與鰓中的MDA含量與對(duì)照組相比顯著降低(P＜0.05)。各添加組的心臟、肝臟、脾臟與頭腎中以及600～1 500 mg/kg組的頭腎與中腎中 NO含量均顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)。在0～1 200 mg/kg范圍內(nèi)黃芪多糖添加水平與LSZ活力成正比，所有組織內(nèi)LSZ活力較對(duì)照組均有顯著性地提高(P＜0.05)。隨黃芪多糖添加水平的升高，吞噬百分比與吞噬指數(shù)顯著升高(P＜0.05)。黃芪多糖可降低遲鈍愛(ài)德華氏菌攻毒后魚(yú)的死亡率，提高免疫保護(hù)率，尤其是1 200、1 500 mg/kg組，免疫保護(hù)率均達(dá)到50.0%。由此得出，在飼料中添加適宜水平的黃芪多糖可促進(jìn)黃顙魚(yú)抗氧化功能的提升;飼料中添加黃芪多糖可促進(jìn)黃顙魚(yú)非特異性免疫功能的提高，且以1 200 mg/kg添加水平的效果最佳。

黃顙魚(yú);黃芪多糖;抗氧化指標(biāo);非特異性免疫指標(biāo)

為適應(yīng)人們生活水平的不斷提高，水產(chǎn)養(yǎng)殖規(guī)模呈現(xiàn)逐年擴(kuò)大的態(tài)勢(shì)，但隨之而來(lái)卻是養(yǎng)殖動(dòng)物疾病的大規(guī)模爆發(fā)。中草藥及其提取物已經(jīng)成為了代替抗生素，治療、預(yù)防水產(chǎn)動(dòng)物疾病的首選藥物。黃芪作為一種多年生草本補(bǔ)益類(lèi)中藥，具有味甘、性溫，具有補(bǔ)氣升陽(yáng)、固表止汗、托毒排膿和生肌等功效［1］。黃芪多糖(astraglus polysaccharides，APS)是從黃芪中提取的天然活性成分，具有抗病毒、抗腫瘤、抗氧化、調(diào)節(jié)機(jī)體體液免疫、激活免疫細(xì)胞因子等功效［2］。目前，黃芪多糖以其顯著的免疫增強(qiáng)、抗病毒作用，加之價(jià)格低廉、來(lái)源豐富、毒性低、無(wú)耐藥性等［3］特性廣泛的應(yīng)用于臨床醫(yī)療、畜牧及水產(chǎn)動(dòng)物的養(yǎng)殖中。黃顙魚(yú)(Pelteobagrus fulvidraco)是一種小型的淡水經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)，具有較高的營(yíng)養(yǎng)及經(jīng)濟(jì)價(jià)值，但近年來(lái)各種疾病的爆發(fā)成為了制約黃顙魚(yú)養(yǎng)殖業(yè)高速發(fā)展的主要因素。因此，本研究通過(guò)在飼料中添加不同水平的黃芪多糖，探討長(zhǎng)期投喂黃芪多糖對(duì)黃顙魚(yú)抗氧化及非特異性免疫指標(biāo)的影響，為黃芪多糖在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中的長(zhǎng)期應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

自天津農(nóng)學(xué)院養(yǎng)殖漁場(chǎng)選取2齡健康黃顙魚(yú)540尾，平均體重(61.6 ±5.4)g，平均體長(zhǎng)(19.5±3.2)cm，隨機(jī)分為 6組，每組 3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30尾魚(yú)(雌雄各占1/2)。6組試驗(yàn)魚(yú)分別飼喂在基礎(chǔ)飼料中添加0(對(duì)照組)、300、600、900、1 200、1 500 mg/kg 黃芪多糖(購(gòu)于陜西方晟生物科技公司，有效含量＞90%)的試驗(yàn)飼料。

試驗(yàn)魚(yú)以重復(fù)為單位飼養(yǎng)于架設(shè)在養(yǎng)殖池中的規(guī)格為1.5 m ×1.5 m ×1.0 m 的18個(gè)網(wǎng)箱中。試驗(yàn)期間水溫保持在(26±2)℃，每天連續(xù)充氧，試驗(yàn)期間每天換水1/3左右，日投飼率為2%，每日投喂3次，試驗(yàn)期為8周。

1.2 樣品制備與指標(biāo)測(cè)定

1.2.1 抗凝血及粗酶液的制備

于養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，每組隨機(jī)抽取黃顙魚(yú)30尾(雌雄各占1/2)，使用MS－222對(duì)試驗(yàn)魚(yú)實(shí)行麻醉。擦拭體表后，使用5 m L一次性無(wú)菌注射器進(jìn)行尾靜脈取血，抽血前使用的一次性無(wú)菌注射器及離心管預(yù)先用1%的肝素鈉進(jìn)行濕潤(rùn)。

抽血后的黃顙魚(yú)在冰浴條件下進(jìn)行解剖，剝?nèi)⌒呐K、肝胰臟、脾臟、頭腎、中腎、肌肉與鰓組織，各組織再按質(zhì)量體積比1∶9加入預(yù)冷生理鹽水，用YQ－3型電動(dòng)勻漿機(jī)在冰浴條件下進(jìn)行組織勻漿。用Eppendorf冷凍離心機(jī)在4℃，3 000 r/m in離心20 m in，提取上清液即為粗酶液。

1.2.2 抗氧化指標(biāo)的測(cè)定

試驗(yàn)中各組織超氧化物歧化酶(SOD)、氧化氫酶(CAT)活力及丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)及蛋白質(zhì)含量等指標(biāo)采用南京建成生物工程技術(shù)研究所提供的試劑盒進(jìn)行測(cè)定。

1.2.3 非特異性免疫指標(biāo)的測(cè)定

1.2.3.1 溶菌酶(LSZ)活力的測(cè)定

試驗(yàn)所用溶壁微球菌(Micrococcus lysodeikticus)由天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院提供。溶壁微球菌接種于瓊脂培養(yǎng)基上，在37℃條件下培養(yǎng)24 h后，用PBS緩沖液稀釋至波長(zhǎng)570 nm下吸光度為0.3的菌懸液備用。

表1 基礎(chǔ)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

取200μL菌懸液與20μL粗酶液在96孔板中混勻，并在酶標(biāo)儀上使用570 nm的波長(zhǎng)測(cè)定初始光密度值A(chǔ)0，然后置于27℃下水浴30 m in，取出后立即置于冰浴中終止反應(yīng)，并在570 nm波長(zhǎng)下測(cè)定反應(yīng)后的光密度值A(chǔ)，LSZ活力=(A0－A)/A。

1.2.3.2 吞噬細(xì)胞活力的測(cè)定

試驗(yàn)所用金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)由天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供，使用法國(guó)生物梅里埃公司生產(chǎn)的VITEK2－Compact全自動(dòng)微生物鑒定儀鑒定細(xì)菌純度。將細(xì)菌接種于瓊脂培養(yǎng)基斜面上，37℃條件下傳代2次，用無(wú)菌PBS洗下菌落。離心后加入1%福爾馬林滅活24 h，將菌液調(diào)整為1.0×108cell/m L備用。

取100μL抗凝血，加入100μL的金黃色葡萄球菌液，搖勻，在27℃條件下孵育30 m in，孵育期間每隔10 m in搖晃1次。用吸管吸取混合液涂片，用甲醇固定10 m in，Giemsa染色1 h，水洗晾干后鏡檢。吞噬細(xì)胞活力分別以吞噬百分比(phagocytic percentage，PP)和吞噬指數(shù)(phagocytic index，PI)表示:

1.2.3.3 疾病抗性檢測(cè)

試驗(yàn)用遲鈍愛(ài)德華氏菌(Edwardsiella tarda)由天津市病害防治中心提供。于飼喂試驗(yàn)結(jié)束后采用遲鈍愛(ài)德華氏菌(2.0×108cell/m L)對(duì)各組試驗(yàn)魚(yú)進(jìn)行攻毒。每組分別取試驗(yàn)魚(yú)20尾(雌雄各占1/2)，經(jīng)胸鰭基部注射0.2 m L遲鈍愛(ài)德華氏菌懸液。飼養(yǎng)觀察96 h后，統(tǒng)計(jì)各組的死亡率，依下式計(jì)算死亡率(mortality rate，MR)與免疫保護(hù)率(protective rate，PR)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，數(shù)據(jù)分析采用 SPSS 17.0軟件包中的單因素方差分析(One-way ANOVA)處理，以P＜0.05作為差異顯著性標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 黃芪多糖對(duì)黃顙魚(yú)各組織中SOD活力的影響

黃顙魚(yú)體內(nèi)各組織中SOD活力順序?yàn)樾呐K＞肌肉＞鰓＞肝臟＞頭腎＞中腎＞脾臟(表2)。添加黃芪多糖對(duì)心臟、肝臟、脾臟和鰓中SOD活力影響不大(P＞0.05)。與對(duì)照組相比，300 mg/kg組頭腎中以及600、900 mg/kg組肌肉中SOD活力分別提高 1.61、1.95與 2.08倍，差異顯著(P＜0.05)。

表2 黃芪多糖對(duì)黃顙魚(yú)各組織中SOD活力的影響Table 2 Effect of APS on the SOD activity in tissues of yellow catfish U/mg prot

2.2 黃芪多糖對(duì)黃顙魚(yú)各組織中CAT活力的影響

黃顙魚(yú)體內(nèi)各組織中CAT活性順序?yàn)樾呐K＞肌肉 ＞肝臟 ＞鰓 ＞頭腎 ＞中腎 ＞脾臟(表3)。與對(duì)照組相比，600～1 500 mg/kg黃芪多糖能顯著提高黃顙魚(yú)心臟、肝臟、脾臟、肌肉與鰓中的CAT活力(P＜0.05)，且各添加組的頭腎與中腎中CAT活力均顯著升高(P＜0.05)。

表3 黃芪多糖對(duì)黃顙魚(yú)各組織中CAT活力的影響Table 3 Effect of APS on the CAT activity in tissues of yellow catfish U/mg prot

2.3 黃芪多糖對(duì)黃顙魚(yú)各組織中MDA含量的影響

黃顙魚(yú)體內(nèi)各組織中MDA含量順序?yàn)榧∪猓几闻K ＜鰓 ＜中腎 ＜頭腎 ＜心臟 ＜脾臟(表4)。與對(duì)照組相比，300～1 500 mg/kg組肝臟與脾臟中，600～1 500 mg/kg組心臟、頭腎、中腎、肌肉與鰓中的MDA含量顯著降低(P＜0.05)。

表4 黃芪多糖對(duì)黃顙魚(yú)各組織中MDA含量的影響Table 4 Effect of APS on the MDA content in tissues of yellow catfish nmol/mg prot

2.4 黃芪多糖對(duì)黃顙魚(yú)各組織中 NO含量的影響

黃顙魚(yú)體內(nèi)各組織中NO含量順序?yàn)榧∪猓拘呐K＞肝臟＞鰓＞頭腎＞中腎＞脾臟(表5)。添加黃芪多糖后，各組織中NO含量均低于對(duì)照組，且隨著黃芪多糖水平的增加而降低(除1 500 mg/kg組心臟、頭腎中NO含量略有上升)。其中，各添加組的心臟、肝臟、脾臟與頭腎中以及600～1 500 mg/kg組的頭腎與中腎中NO含量均顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)。

表5 黃芪多糖對(duì)黃顙魚(yú)各組織中NO含量的影響Table 5 Effect of APS on the NO content in tissues of yellow catfish nmol/mg prot

2.5 黃芪多糖對(duì)黃顙魚(yú)體內(nèi)組織LSZ活力的影響

黃顙魚(yú)體內(nèi)各組織中LSZ活力順序?yàn)轭^腎＞中腎＞心臟＞脾臟＞鰓＞肌肉＞肝臟(表6)。各添加組各組織中LSZ活力均高于對(duì)照組，且在0～1 200 mg/kg范圍內(nèi)黃芪多糖添加水平與酶活力成正比，所有組織內(nèi)LSZ活力較對(duì)照組均有顯著性的提高(P＜0.05)。

表6 黃芪多糖對(duì)黃顙魚(yú)各組織中LSZ活力的影響Table 6 Effect of APS on the LSZ activity in tissues of yellow catfish U/mg prot

2.6 黃芪多糖對(duì)黃顙魚(yú)吞噬細(xì)胞活力的影響

投喂含不同水平的黃芪多糖飼料8周后，檢測(cè)黃顙魚(yú)體內(nèi)吞噬細(xì)胞活力發(fā)現(xiàn)，各添加組的吞噬百分比與吞噬指數(shù)均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，且隨黃芪多糖添加水平的升高呈增加趨勢(shì)，除1 200、1 500 mg/kg組間吞噬百分比無(wú)顯著差別外(P＞0.05)，其余各組間的吞噬百分比與吞噬指數(shù)隨黃芪多糖水平增加而顯著上升(P＜0.05)(表7)。

表7 黃芪多糖對(duì)黃顙魚(yú)吞噬細(xì)胞活力的影響Table 7 Effect of APS on the phagocytic activity of yellow catfish %

2.7 攻毒試驗(yàn)結(jié)果

黃顙魚(yú)養(yǎng)殖8周后，經(jīng)遲鈍愛(ài)德華氏菌活菌攻毒96 h，對(duì)照組死亡率為80%，各添加組的死亡率均有所降低，獲得了一定的免疫保護(hù)率，尤其是1 200、1 500 mg/kg組，免疫保護(hù)率均達(dá)到50.0%。此外，試驗(yàn)中黃顙魚(yú)的死亡率與免疫保護(hù)率與黃芪多糖添加水平存在一定的劑量關(guān)系(表8)。

表8 黃芪多糖對(duì)黃顙魚(yú)疾病抗性的影響Table 8 Effect of APS on disease resistance of yellow catfish

3 討論

3.1 黃芪多糖對(duì)黃顙魚(yú)抗氧化指標(biāo)的影響

NO是近年來(lái)研究較多的一種免疫與調(diào)控因子，其在生物體內(nèi)具有雙向調(diào)節(jié)作用的理論已經(jīng)被許多研究相繼證實(shí)［4－5］;SOD與CAT是生物體抗氧化酶系的重要組成酶類(lèi)，對(duì)生物體內(nèi)活性氧自由基地清除起著關(guān)鍵的作用;MDA則是脂質(zhì)過(guò)氧化物反應(yīng)中的最終產(chǎn)物，可導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞的損傷。檢測(cè)這些指標(biāo)可以綜合地判定生物機(jī)體的抗氧化與免疫情況。近年來(lái)的諸多研究報(bào)道均表明，黃芪多糖在促進(jìn)魚(yú)體抗氧化功能提升方面具有明顯的效果。張偉妮等［6］研究發(fā)現(xiàn)，在羅非魚(yú)(Tilapia)飼料中添加不同劑量的黃芪多糖，可提高魚(yú)體SOD與CAT活力，且添加水平在1 000～2 000 mg/kg時(shí)提高作用顯著;富麗靜等［7］研究表明，在飼料中添加0.165、0.660 g/kg的黃芪多糖可顯著地提高草魚(yú)(Ctenopharyngodon idellus)體內(nèi)SOD活力;吳旋等［8］試驗(yàn)得出，使用黃芪多糖浸泡金絲魚(yú)(Tanichthrs altbonubes)可以顯著地提高魚(yú)體內(nèi)SOD與CAT活力;劉紅柏等［9］試驗(yàn)證實(shí)，對(duì)史氏鱘(Acipenser schrenckiBrandt)灌服不同濃度的黃芪多糖水煎劑，其肝臟與血清中SOD活力較對(duì)照組均有所提高，且各濃度組MDA含量顯著降低。這充分說(shuō)明適宜添加水平黃芪多糖可以有效提高魚(yú)體的抗氧化能力。

以上學(xué)者的研究結(jié)論均可作為本試驗(yàn)的理論支撐。本試驗(yàn)的結(jié)果顯示，黃芪多糖添加在飼料中投喂黃顙魚(yú)，魚(yú)體各組織中SOD與CAT活力均提高，且在心臟與鰓等氧交換密切的組織中SOD與CAT活力明顯地高于脾臟、腎臟等組織。同時(shí)，與對(duì)照組相比，各添加組肝臟與脾臟中MDA含量也得到了顯著地降低。在以前的研究中，鮮有關(guān)于魚(yú)類(lèi)肌肉抗氧化酶活力的報(bào)道，大多數(shù)的研究?jī)H是測(cè)定魚(yú)體血清、肝臟等少數(shù)組織的抗氧化酶活力。而在研究中發(fā)現(xiàn)，黃顙魚(yú)的肌肉組織抗氧化功能較強(qiáng)，且投喂黃芪多糖后效果更佳顯著。因此，本研究很好的證實(shí)了有些魚(yú)類(lèi)的肌肉具有較高的抗氧化功效這一理論，在今后的生產(chǎn)實(shí)踐中具有良好地開(kāi)發(fā)前景及應(yīng)用空間。

關(guān)于中草藥多糖對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物機(jī)體NO的調(diào)節(jié)機(jī)制，科研工作者也進(jìn)行了相應(yīng)的研究:黃江［10］通過(guò)試驗(yàn)得到，灌服含黃芪、當(dāng)歸等成分的復(fù)方中草藥水煎液的史氏鱘血液中NO的含量顯著降低，黃芪、魚(yú)腥草、甘草復(fù)方則可顯著降低史氏鱘肝臟內(nèi)NO的含量，而單方貫眾、復(fù)方四卻對(duì)史氏鱘血液中NO含量具有明顯的促進(jìn)作用;蘇嶺等［11］研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)方甘草與紫草對(duì)鯽魚(yú)(Carassius aumtus)脾臟內(nèi)NO含量具有抑制作用，但對(duì)肝臟中NO含量卻具有促進(jìn)作用;同時(shí)，黃芪多糖對(duì)脾臟中NO的含量也具有促進(jìn)作用。在本試驗(yàn)中，黃顙魚(yú)肌肉NO含量明顯高于其他組織，但各組織NO含量隨著黃芪多糖添加水平的增加而下降。而此結(jié)論卻與有關(guān)黃芪多糖在適宜的添加范圍內(nèi)可促進(jìn)動(dòng)物體內(nèi)NO含量提升的研究結(jié)論［6］不盡相同。因此，綜合以上的研究結(jié)果得出，黃芪多糖對(duì)生物體內(nèi)NO含量的影響與中草藥、中草藥多糖的種類(lèi)、劑量、給藥時(shí)間、生物機(jī)體自身等多種因素有關(guān)，在生產(chǎn)實(shí)踐中對(duì)上述因素應(yīng)進(jìn)行仔細(xì)考量。

3.2 黃芪多糖對(duì)黃顙魚(yú)非特異性免疫指標(biāo)的影響

非特異性免疫能力有LSZ活力、吞噬細(xì)胞活性、疾病抗性等多種反應(yīng)組成，是魚(yú)類(lèi)抵抗病原入侵，維護(hù)機(jī)體健康的重要特性。近年來(lái)，許多學(xué)者就黃芪多糖對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物非特異性免疫功能的調(diào)節(jié)作用進(jìn)行了大量的研究。胡兵等［12］研究發(fā)現(xiàn)，添加黃芪多糖能提高異育銀鯽(Carassiusauratus gibelio)體內(nèi)LSZ活力，且0.05%的添加水平效果最佳;Yin等［13］使用含0.5%黃芪水提物的飼料對(duì)鯉魚(yú)(Cyprinus carpio)進(jìn)行投喂，結(jié)果發(fā)現(xiàn)魚(yú)體血液中LSZ活力、吞噬細(xì)胞的吞噬活力、疾病抗性與對(duì)照組相比均有大幅的提升;孫永新［14］發(fā)現(xiàn)，飼料中添加黃芪多糖可有效提高刺參(Apostichopus jaoponicus)體內(nèi)LSZ活力、吞噬指數(shù)與吞噬率，攻毒后試驗(yàn)組的發(fā)病率有所降低;László等［15］用含有黃芪水提物的飼料投喂羅非魚(yú)，結(jié)果表明魚(yú)體LSZ活力顯著高于對(duì)照，攻毒后的存活率也有所提高。

以上結(jié)論與本試驗(yàn)得出黃芪多糖可以有效提高黃顙魚(yú)體內(nèi)LSZ活力，且以魚(yú)類(lèi)最主要的免疫器官頭腎中的酶活力最強(qiáng)，對(duì)黃顙魚(yú)的吞噬細(xì)胞活性及疾病抗性的提高也有顯著的功效，并且存在規(guī)律的量效關(guān)系的結(jié)論相一致，進(jìn)一步證明了黃芪多糖在促進(jìn)黃顙魚(yú)非特異性免疫功能方面的良好效果。

4 結(jié)論

①本試驗(yàn)中，長(zhǎng)期連續(xù)投喂適宜水平的黃芪多糖能有效地促進(jìn)黃顙魚(yú)體內(nèi)SOD、CAT活力，降低MDA含量，但對(duì)黃顙魚(yú)體內(nèi)NO含量卻具有抑制作用。

②不同添加水平的黃芪多糖對(duì)各項(xiàng)抗氧化指標(biāo)的作用效果存在差異，對(duì) SOD、CAT、MDA及NO指標(biāo)的最適添加水平分別為600、1 200、1 500和300 mg/kg。

③不同添加水平的黃芪多糖可有效地提高黃顙魚(yú)體內(nèi)LSZ活力、吞噬細(xì)胞活性與疾病抗性，且作用功效較為規(guī)律，綜合各項(xiàng)指標(biāo)判定1 200 mg/kg的添加水平對(duì)黃顙魚(yú)非特異性免疫功能的促進(jìn)作用最佳。

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*Corresponding author，professor，E-mail:kzxing@yahoo.com.cn

(編輯 菅景穎)

Effect of Astragalus Polysaccharides on Antioxidant and Nonspecific Imm une Indices of Yellow Catfish(Pelteobagrus fulvidraco)over Long-term Feeding

BAIDongqing WU Xuan GUO Yongjun ZHU Guoxia XING Kezhi*NING Bo
(Tianjin Key Laboratory of AQU-ecology and Aquaculture，National Demonstration Center of Teaching Practice，Tianjin Agricultural University，Tianjin300384，China)

This experimentwas conducted to investigate the effect of astragalus polysaccharides(APS)on antioxidant and nonspecific immune indices of yellow catfish(Pelteobagrus fulvidraco).Five hundred and forty 2-year-old and healthy yellow catfish were random ly divided into 6 groups with 3 replicates per group and 30 fish per replicate.Yellow catfish in the 6 groupswere fed basal dietswith 0(control group)，300，600，900，1 200 and 1 500 mg/kg APS，respectively.The experiment lasted for 8 weeks.A t the end of the experiment，the activities of superoxide dismutase(SOD)，catalase(CAT)and lysozyme(LSZ)，the contents ofmalondialdehyde(MDA)and nitric oxide(NO)，phagocytic percentage(PP)，phagocytic index(PI)，and disease resistance indiceswere determ ined.The results showed as follows:compared with the control group，the head kidney SOD activity in the 300 mg/kg APS group and themuscle SOD activity in the 600 and 900 mg/kg APS groupswere increased by 1.61(P＜0.05)，1.95(P＜0.05)and 2.08(P＜ 0.05)times，respectively.The CAT activity in heart，liver，spleen，muscle and gill was significantly enhanced when supplemented with 600 to 1 500 mg/kg APS in diets(P＜0.05).The CAT activity in head kidney and mesonephros in all APS groupswas significantly higher than that in the control group(P＜0.05).Compared with the control group，the MDA activity in liver and spleen in the 300 to 1 500 mg/kg APS groups and the MDA activity in heart，head kidney，mesonephros，muscle and gill in the 600 to 1 500 mg/kg APS groupswere significantly increased(P＜0.05)，while the NO content in heart，liver，spleen and head kidney in all groups and the NO content in head kidney and mesonephros in the 600 to 1 500 APS groupswere significantly decreased(P＜0.05).When supplemental levels of APS ranged from 0 to 1 200 mg/kg，the LSZ activity was proportional to APS supplemental level，and the LSZ activity in all tissues was significantly higher than that in the control group(P＜0.05).With increasing APS levels，the PP and PIwere significantly increased(P＜ 0.05).APS could decrease themortality rate and enhance the protective rate when fish were over attacked withEdwardsiella tard，and the protective rate in the 1 200 and 1 500 mg/kg APS groups reached 50.0%，respectively.It is suggested that proper amount of APS supplementation in diets can enhance antioxidant of yellow catfish;additionally，1 200 mg/kg APS supplementation has the greatest effects on enhancing nonspecific immunity function of yellow catfish.［Chinese Journal of Animal Nutrition，2011，23(9):1622-1630］

yellow catfish(Pelteobagrus fulvidraco);astragalus polysaccharides;antioxidant indices;nonspecific immune indices

S963

A

1006-267X(2011)09-1622-09

10.3969/j.issn.1006-267x.2011.09.023

2011－03－23

天津市高等學(xué)?？萍及l(fā)展基金計(jì)劃(2008ZD21和2006ZD24);天津市農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化與推廣項(xiàng)目(201004040)

白東清(1970—)，女，河北遷安人，教授，博士，碩士生導(dǎo)師，主要從事水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料學(xué)的教學(xué)和研究工作。E-mail:baidongqing@tjau.edu.cn

*通訊作者:邢克智，教授，碩士生導(dǎo)師，E-mail:kzxing@yahoo.com.cn