張軍,胡俊琦,吳澤川,古從偉
(1.廣元市元壩區(qū)文村鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站,四川廣元 628063;2.廣元市玉田農(nóng)業(yè)開發(fā)有限責(zé)任公司,四川廣元 628021;3.廣元市元壩區(qū)畜牧食品局,四川廣元 628021)
高致病性豬藍耳病又稱豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS),是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的一種以妊娠母豬繁殖障礙、早產(chǎn)、流產(chǎn)和死胎,以及各種年齡豬,特別是以仔豬呼吸道疾病為特征的急性高致病性傳染病,我國將其列為一類疫病。該病最早發(fā)生于1987年,在美國的北卡羅來納州首次暴發(fā)。當(dāng)時人們不能確定其病因,一度被稱為“神秘病”。1991年荷蘭也從病豬中分離到了這種病毒。1992 年,該病被正式命名為 PRRS。在國內(nèi),業(yè)界一般稱之為豬的“藍耳病”,因患豬經(jīng)常被觀察到耳等部位皮膚呈藍色,但在北美發(fā)生該病時則無此現(xiàn)象。遺傳變異分析證明豬繁殖與呼吸綜合征病毒至少分為兩個型:即以美國分離的毒株為代表的美洲型(A TCC2VR22332株)和以荷蘭分離的毒株為代表的歐洲型(LV株)。1996年,郭寶清等首次報道從流產(chǎn)胎兒中分離到PRRSV,證實我國也存在豬繁殖與呼吸綜合征。1997 年,孫穎杰等從北京某豬場的死胎中分離到 PRRSV B13株,后經(jīng)趙耘、羅長寶等鑒定為歐洲型 PRRSV。2006年以來,我國又暴發(fā)了以變異美洲型的高致病性藍耳病,給我國養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。
趙坤等認為,高致病性豬藍耳病是一種高度接觸性傳染病,呈地方流行性,一年四季都可發(fā)生,以夏、秋季為嚴重發(fā)病期。PRRSV 主要是通過病毒引入傳播,易感豬群一旦有病毒入侵,大約經(jīng)4~5個月,90 %的母豬血清學(xué)檢測呈陽性,即使1~2年后,仍有20%的母豬呈陽性。該病毒的易感豬群主要是妊娠中后期的母豬和新生仔豬。因此,隱性帶毒豬是主要傳染源。豬可以通過口腔、鼻內(nèi)、肌肉、腹膜和陰道感染PRRSV。
該病毒具有高度感染性,通過肌肉或鼻內(nèi)接種 10 個或更少的病毒粒子即可感染發(fā)病。Cafruny W A 等通過腹腔或尾軟骨注射其最小感染劑量為近 1個病毒粒子。PRRSV在宿主存在時間較長,易繼發(fā)混合感染,特別是呈地方性呼吸疾病的傳染,如豬地方性肺炎,與其相關(guān)聯(lián)的混合感染還有豬支原體肺炎、豬流感、豬鏈球菌病、豬乙型腦炎、胸膜肺炎和豬放線桿菌病等。另外,空氣可能是重要的傳播媒介,風(fēng)向通常是傳播的方向。沒有豬只引進的密閉式豬場同樣發(fā)生 PRRS,說明氣源傳播是存在的。精液是PRRSV的傳播的另一媒介。研究人員通過人工感染公豬后能從精液中分離到 PRRSV,研究還發(fā)現(xiàn)通過人工授精和引進帶毒精液能引起PRRS的暴發(fā)。
研究顯示,病豬僅由PRRS 病毒單一引起時是無癥狀的,而且廣泛認為PRRS病毒引起的臨床表現(xiàn)是復(fù)雜的。當(dāng)一個豬場內(nèi)其他因素理想的情況下,由PRRS病毒引起的癥狀起決定性作用。在大多數(shù)感染群體中,PRRS 病毒將在體內(nèi)持續(xù)存在。
臨床癥狀分急性感染型和慢性型,急性感染型初期,豬群表現(xiàn)為食欲低下、發(fā)熱、昏睡和精神不振等癥狀,一般持續(xù)1星期。發(fā)病高峰的主要特征是母豬早產(chǎn)、晚期流產(chǎn)以及木乃伊胎和弱仔增多;仔豬斷奶前死亡率增加,高峰期一般持續(xù)8~12星期。以下3項指標(biāo)可用于衡量急性PRRS:流產(chǎn)或早產(chǎn)超過8%;死胎率超過20%;仔豬出生后第 1星期死亡率超過24%。發(fā)病末期,母豬繁殖功能逐漸恢復(fù),達到或接近病前水平。仔豬和育肥豬存在不同程度的呼吸系統(tǒng)癥狀,痊愈豬一般生長緩慢,體重較輕。慢性型較急性型病情緩和,病期較長,對豬群的主要影響是由其他細菌或病毒侵害呼吸系統(tǒng)引起的繼發(fā)性感染,如鼻炎、肺炎等。感染豬生長率、飼料報酬率降低。
根據(jù)馬德慧等觀察,死胎及出生后不久死亡的弱仔豬可見頜下、頸下和腋下水腫,呈膠凍樣。解剖病變主要在肺部,病變常分布在肺小葉,病灶呈鮮紅色到灰紫色,肺部觸感軟硬不均勻,肺間隔增厚,外觀腫脹;肺前葉、尖葉和心葉常有“胰樣變”或“肝樣變”,當(dāng)豬出現(xiàn)并發(fā)感染時,病變會因感染不同致病菌而有不同變化,肝臟充血,呈棕黃色,肝細胞脂肪變性,少數(shù)肝細胞壞死;脾頭部腫大,切面紅髓增生;腎臟腫脹,灰黃色,時有針尖狀出血點;脾臟邊緣或表面出現(xiàn)梗死灶,腎臟呈土黃色,表面有針尖或小米粒大小出血斑點,皮下、扁桃體、心臟、膀胱、肝臟和腸道可見出血點和出血斑。肺表面有彌散、灰褐色的斑狀。
巨噬細胞和內(nèi)皮細胞是 PRRSV感染的主要靶細胞。張平英等通過試驗檢測到PRRSV抗原主要分布在脾臟、淋巴結(jié)、肺臟、肝臟的巨噬細胞和腎臟的血管內(nèi)皮細胞,引起相應(yīng)病變。顏其貴等的人工感染豬試驗的結(jié)果表明PRRSV抗原在仔豬的內(nèi)臟及心肌組織中均有分布,并通過超微觀察表明,在肺泡、淋巴結(jié)和脾臟的巨噬細胞中有散在的病毒粒子的存在。
已有研究發(fā)現(xiàn)PRRSV侵染細胞的方式首先是與豬肺泡巨噬細胞上的受體結(jié)合,然后經(jīng)胞吞作用進入細胞。已經(jīng)鑒定出豬肺泡巨噬細胞( PAMS)上具有所推斷的病毒受體。PRRSV 嗜好在PAMS和肺內(nèi)皮細胞巨噬細胞(PIMS)內(nèi)復(fù)制,結(jié)果造成這些細胞大量破壞。PRRSV感染豬2 h后,PAMS的吞噬作用增強。但是,在感染后7 d,PAMS的吞噬作用顯著減弱,其釋放超氧負離子的能力也下降,PAMS依賴于超氧負離子而發(fā)揮殺菌作用的功能也就下降。這樣就為病原微生物的繼發(fā)感染創(chuàng)造了有利條件。
PRRSV在PAMS大量復(fù)制后,隨著細胞的崩解,進入血液循環(huán)和淋巴循環(huán)。結(jié)果可導(dǎo)致病毒血癥的形成及全身淋巴結(jié)的感染。Yoon KJ等認為豬感染 PRRSV后,血清中中和抗體的滴度較低,不能有效地清除血液中的病毒,這是造成病毒血癥持續(xù)性存在的主要原因。
PRRS的診斷目前主要依靠病毒分離鑒定,借助血清學(xué)試驗檢測PRRS抗原及其抗體。由于細胞制備和PRRSV不同毒株對細胞的選擇性生長及毒株間的抗原差異,使實際診斷工作復(fù)雜、困難、費時、費力。在未成功分離PRRSV之前,該病診斷主要依靠病豬典型臨床癥狀、特征性組織學(xué)病理變化,尤其是間質(zhì)性肺炎。
血清學(xué)診斷方法是應(yīng)用最廣泛的診斷方法。對于PRRSV的血清學(xué)診斷,國內(nèi)外己建立了4種PRRSV抗體檢測方法,即間接熒光試驗(IFA)、免疫過氧化物酶單層細胞試驗(IPMA)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、血清中和試驗(SN)。IPMA 是歐洲國家廣泛用于該病診斷的一種方法,敏感性和特異性都比較好,可用于PRRSV的病毒鑒定及血清抗體檢測。IFA與IPMA具有相同的特異性和敏感性,目前在北美應(yīng)用較為廣泛。SN檢測PRRS抗體特異性好,但一般在感染后的4~6周才出現(xiàn)中和抗體,故SN不適合PRRS的早期診斷。ELISA具有快速、經(jīng)濟、敏感、適合大量樣品的檢測,結(jié)果的判定不含主觀因素,可半自動化(機器洗板)和自動顯示結(jié)果等優(yōu)點,明顯優(yōu)于 IPMA和IFA,已作為 PRRS免疫監(jiān)測和診斷的常規(guī)手段。
病毒的分離鑒定是急性病例和新疫區(qū)檢測實用方法。鑒于PRRS遺傳變異的多樣性,變異新毒株只有用核苷酸序列和氨基酸序列測定確診。RT-PCR就成了檢測PRRS病毒的有效方法。由于PRRS易伴有繼發(fā)感染,呈地方性混合感染,所以要結(jié)合與呼吸系統(tǒng)有關(guān)的細菌、病毒感染鑒別診斷。
高致病性豬藍耳病病毒具有在外界環(huán)境中存活能力較差的特點,只要消毒措施得當(dāng)就能殺滅病毒。有效控制該病與亞臨床畜群的感染、豬群內(nèi)病毒的再傳播等因素有關(guān)。目前我國使用的方法主要有:杜絕境外傳入,從不發(fā)病國家和地區(qū)引進豬及其相關(guān)產(chǎn)品;從疫區(qū)進口的種豬等要嚴格檢疫,全面普查,及時檢測;境外防止傳染,及時發(fā)現(xiàn)和撲滅疫情,以控制疫病的蔓延;發(fā)病時,對患畜進行撲殺、銷毀,以控制疾病蔓延;進行血清學(xué)檢測,對發(fā)病地區(qū)進行封鎖或限制豬及其產(chǎn)品的任意流動。由于PRRS傳播迅速,流行廣泛,而且該病毒抗原具有多樣性。目前尚無特效的治療措施,現(xiàn)在防治本病的疫苗主要是滅活苗和弱毒苗。但是弱毒苗的安全性和效力并不可靠,也不能阻止本病的再次感染。弱毒苗具有返祖現(xiàn)象,所以迫切需要研制針對我國流行毒株的免疫保護性好安全性高的 PRRS疫苗。
綜上所述,PRRS作為一種世界性的豬傳染病,給各國豬業(yè)帶來了極其嚴重的危害和巨大的經(jīng)濟損失。根據(jù)臨床和血清學(xué)調(diào)查,該病在我國普遍存在,而且近年來還呈流行態(tài)勢。雖然目前對PRRSV的分子生物學(xué)研究方面取得了很大進展,但仍有許多問題尚不十分清楚,如持續(xù)感染機制、免疫機制、一些病毒編碼的蛋白結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系等等,還有待更加深入細致的進行研究。針對PRRS仍未有一個確實、有效的防治原則適用于所有豬群的情況下,充分掌握自己豬群所處的健康狀態(tài),細化防治傳染病三環(huán)節(jié),制定合理有效的精細化養(yǎng)豬方案,可能是當(dāng)前的最佳選擇。