鄧珍珍,關(guān) 寧
平頂山市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢驗測試中心,河南 平頂山 467000
食品添加劑是為了改善食品品質(zhì)和色、香、味以及為滿足防腐和加工工藝的需要而加入食品中的化學(xué)合成物或者天然物質(zhì),是為增強營養(yǎng)成分而加入食品中的天然或人工合成的屬于天然營養(yǎng)范圍的食品添加劑。甜味劑是賦予食品甜味的添加劑,可分為天然甜味劑和人工合成甜味劑。我國批準并廣泛使用的主要有糖精鈉、環(huán)已基氨基磺酯鈉(甜蜜素)、天門冬酰氨酸甲酯(甜味素)等。
樣品加溫除去二氧化碳和乙醇,調(diào)pH至近中性,過濾后進高效液相色譜儀經(jīng)反相色譜分離后,根據(jù)保留時間和峰面積進行定性和定量分析。
1)甲醇:經(jīng)濾膜(0.5μm)過濾;
2)氨水(1+1):氨水加等體積的水混合;
3)乙酸銨溶液(0.02mol/L):稱取1.54g乙酸,加水至1000mL溶解,經(jīng)濾膜(0.45μm)過濾;
4)糖精鈉標準儲備溶液(1.0mg/mL):準確稱取0.0851g經(jīng)120℃烘干4小時后的糖精鈉,加水溶解定容至1000mL;
5)糖精鈉標準使用溶液(0.1mg/mL):吸取糖精鈉標準儲備液10.0mL放入100mL容量瓶中,加水至刻度,經(jīng)濾膜(0.45μm)過濾。
高效液相色譜儀,紫外檢測器。
1)樣品處理
(1)汽水
稱取5.00g~10.00g樣品,放入小燒杯中,微溫攪拌除去二氧化碳,用氨水(1+1)調(diào)pH約為7。加水定容至適當(dāng)體積,經(jīng)濾膜(0.45μm)過濾。
(2)果汁類
稱取5.00g~10.00g樣品,放入小燒杯中,用氨水(1+1)調(diào)pH約為7。加水定容至適當(dāng)體積,離心沉淀,上清液經(jīng)濾膜(0.45μm)過濾。
(3)配制酒類:稱取10.00g樣品,放入小燒杯中,水浴加熱除去乙醇,用氨水(1+1)調(diào)pH約為7。加水定容至適當(dāng)體積,經(jīng)濾膜(0.45μm)過濾。
2)高效液相色譜條件
色譜柱:YWG-C18 4.6mm×250mm 10μm不銹鋼柱。
流動相:甲醇:乙酸銨溶液(0.02mol/L) (5+95)。
流速:1mL/min。
檢測器:紫外檢測器,波長230nm,靈敏度0.2AUFS。
3)測定
取樣品處理液和標準使用液各10μL(或相同體積)注入高效液相色譜儀進行分離測定,根據(jù)峰保留時間定性,峰面積定量。4)計算
式中:
X 1為樣品中糖精鈉含量,g/kg;
m1為進樣體積中糖精鈉的質(zhì)量,mg;
V1為樣品稀釋液總體積,mL;
V2為進樣體積,mL;
m2為樣品質(zhì)量,g。
結(jié)果表達:報告算術(shù)平均數(shù)的3位小數(shù)。允許相對相差小于10%.
在酸性條件下,食品中的糖精鈉用乙醚提取、濃縮、薄層色譜分離,顯色后與標準比較,進行定性和半定量分析。
1)乙醚:不含過氧化物;
2)無水硫酸鈉;
3)無水乙醇及95%乙醇;
4)聚酰胺粉:200目;
5)鹽酸(1+1):取100mL鹽酸加水稀釋至200mL;
6)展開劑:正丁醇+氨水+無水乙醇(7+1+2),異丙酮+氨水+無水乙醇(7+1+2);
7)顯色劑:溴甲酚紫溶液(0.4g/L) 稱取0.04g溴甲酚紫,用95%乙醇溶解,加氫氧化鈉溶液
(4g/L)1.1mL調(diào)節(jié)pH為8,定容至100mL;
8)硫酸銅溶液(100g/L);
9)氫氧化鈉溶液(40g/L);
10)糖精鈉標準溶液:準確稱取0.0851g經(jīng)120℃烘干4小時后的糖精鈉,加乙醇溶解,移入100mL
容量瓶中,加95%乙醇稀釋至刻度。此溶液每毫升相當(dāng)于1mg糖精鈉(C6H4CONNaSO2·2H2O)。
1)玻璃紙:生物制品透析袋或不含增白劑的市售玻璃紙;
2)玻璃噴霧器;
3)微量注射器;
4)紫外燈:波長253.7nm;
5)薄層板:10cm×20cm 或20cm×20cm;
6)展開槽。
1)樣品提取
(1)飲料、冰棍、汽水:取10mL均勻試樣(如樣品中含有二氧化碳,先加熱除去,如樣品中
含有酒精,加4%氫氧化鈉溶液使其呈堿性,在沸水浴中加熱除去)置于100mL分液漏斗中,加2mL鹽酸(1+1),用30mL、20mL、20mL乙醚提取3次,合并提取液,用5mL鹽酸酸化的水洗滌一次,棄去水層,乙醚層通過無水硫酸鈉脫水后,揮干乙醚,加2.0mL乙醇溶解殘留物,密塞保存,備用。
(2)醬油、果汁、果醬等:稱取20.0g磨碎的均勻試樣,置于100mL容量瓶中,加水至約60ml,加20ml硫酸銅溶液(100g/L),混勻,再加4.4ml氫氧化鈉溶液(40/L),加水至刻度,混勻,靜置30min,過濾,取50mL濾液置于250mL分液漏斗中,以下按①自“加2ml鹽酸(1+1)……”操作。
(3)固體果汁粉等:稱取20.0g磨碎的均勻試樣,置于200ml容量瓶中,加100ml水,加溫使之溶解、放冷。
2)薄層板的制備
稱取1.6g聚酰胺粉,加0.4g可溶性淀粉,加約7.0mL水,研磨3min~5min,立即涂成0.25mm~0.30mm厚的10cm×20cm的薄層板,室溫干燥后,在80℃下干燥1h。置于干燥器中保存。
3)點樣
在薄層板下端2cm處,用微量注射器點10mL和20mL的樣液二個點,同時點3.0mL、5.0mL、7.0mL、10.0mL糖精鈉標準溶液,各點間距1.5cm。
4)展開與顯色
將點好的薄層析放入盛有展開劑的展開槽中,展開劑液層約0.5cm,并預(yù)先已達到飽和狀態(tài)。
展開至10cm,取出薄層板,揮干,噴顯色劑,斑點顯黃色,根據(jù)樣品點和標準定性,根據(jù)斑點顏色深淺進行半定量。
總之,甜味劑在食品行業(yè)中使用應(yīng)有嚴格的質(zhì)量標準,有害雜質(zhì)不得超過允許限量,要保證在使用限量內(nèi)長期使用對人體安全無害且要保證不影響食品感官性質(zhì)和原味,對食品營養(yǎng)成分沒有破壞,只有這樣才能切實的保證食品安全。
[1]宣棟梁,黎源倩.高效液相色譜法測定環(huán)境水中的酚類化合物[J].中國公共衛(wèi)生,2002(9).
[2]林樂明.薄層色譜分析技術(shù)的新進展[J].分析儀器,1986(3).