李 君

（內(nèi)蒙古扎蘭屯林業(yè)學(xué)校，內(nèi)蒙古 扎蘭屯 162650）

歐洲火棘組培快繁技術(shù)研究

李 君

（內(nèi)蒙古扎蘭屯林業(yè)學(xué)校，內(nèi)蒙古 扎蘭屯 162650）

以歐洲火棘當(dāng)年生枝頂芽或腋芽為材料進(jìn)行組織培養(yǎng)，最佳分化增值培養(yǎng)基為MS+6-BA0.5～1.0+IBA0.2，最佳瓶?jī)?nèi)生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.3，瓶外生根采用500mg/L的NAA及800mg/L的ABT進(jìn)行速蘸處理效果較好。

歐洲火棘；組織培養(yǎng)；快速繁殖

歐洲火棘為薔薇科火棘屬常綠灌木，在歐洲已作為優(yōu)良庭院綠化樹(shù)種廣泛栽培.其黃色或桔黃色的果實(shí)累累，經(jīng)冬不落，甚受人們喜愛(ài)。2007年對(duì)從波蘭引進(jìn)的歐洲火棘進(jìn)行了組培快繁技術(shù)研究，目的是為快速繁殖歐洲火棘優(yōu)良品種提供實(shí)用技術(shù)。

1 培養(yǎng)條件

外植體接種培養(yǎng)基：①1/3MS+6-BA1.0mg/L（單位下同）+IBA0.02+2.5%蔗糖；增殖培養(yǎng)基：②MS+6-BA0.5+IBA0.2，③MS+6-BA1.0+IBA0.2，④MS+6-BA1.5+IBA0.2，1個(gè)月左右繼代1次；生根培養(yǎng)基：⑤1/2MS+NAA0.1，⑥1/2MS+NAA0.3，⑦1/2MS+NAA0.5，⑧1/2MS+NAA0.8，⑨1/2MS+NAA1.0。培養(yǎng)基中均加入0.6%的倍力凝（一種微生物多糖固化劑），增殖培養(yǎng)基中加3%蔗糖，生根培養(yǎng)基中加1.5%蔗糖。培養(yǎng)室內(nèi)溫度（25±2）℃，空氣相對(duì)濕度38%～70%，全自然光照，光照度 1000～2000lx，光照時(shí)間9～13h/d。

2 外植體接種

從生長(zhǎng)健壯的植株上剪取帶有頂芽或腋芽的半木質(zhì)化枝條，流水沖洗2～4h后，用牙刷蘸少量洗衣粉（或香皂）刷洗材料表面1～2遍，再用流水將洗衣粉（或香皂）泡沫沖去，將材料在超凈工作臺(tái)上切成1～1.5cm的帶芽莖段，在無(wú)菌條件下，先用75%酒精消毒15～30s，再用0.1%HgCl2消毒 1～1.5min，用無(wú)菌水沖洗 4～5遍后，接入培養(yǎng)基（1）中，10d左右頂芽或腋芽開(kāi)始萌發(fā)。

3 分化與增殖

將萌發(fā)的無(wú)菌芽接入增殖培養(yǎng)基②、③、④中，不同的培養(yǎng)基由于細(xì)胞分裂素6-BA的濃度不同，經(jīng)過(guò)若干代的繼代培養(yǎng)后，組培苗亦呈現(xiàn)出不同的表現(xiàn)，②培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的組培苗叢生芽較粗壯，葉片綠色較深，新芽分化數(shù)較少。③培養(yǎng)基中組培苗叢生芽較細(xì)弱，葉片呈正常的綠色，新芽分化數(shù)適中。④培養(yǎng)基中叢生芽纖細(xì)，葉片小，淡綠色，但新芽分化數(shù)很多；根據(jù)組培苗生長(zhǎng)及新芽分化情況，采用②、③培養(yǎng)基交替使用，或使6-BA的濃度控制在0.5～1.0mg/L較為適宜，這樣既可獲得生長(zhǎng)健壯的組培苗，又可使新芽分化數(shù)保持在適中的水平。

4 生根培養(yǎng)

4.1 瓶?jī)?nèi)生根

剪取生長(zhǎng)健壯、高3～6cm的組培苗單株，接入生根培養(yǎng)基⑤～⑨中，40～50d調(diào)查生根情況，由于培養(yǎng)基⑤～⑨中生長(zhǎng)素NAA的濃度不同，組培苗的生根情況也表現(xiàn)出差異。⑤～⑨培養(yǎng)基的生根率分別為31%、76%、81%、88%、73%，平均生根數(shù)分別為 0.8、2.6、2.8、3.0、3.4 條；⑤培養(yǎng)基其生根率及生根數(shù)均較低，雖然⑧、⑨培養(yǎng)基的生根率及生根數(shù)較高，但其大多組培苗基部帶有不同程度的愈傷組織，在愈傷組織上發(fā)生的不定根移栽時(shí)易脫落，成活率低，且⑧、⑨培養(yǎng)基上組培苗的長(zhǎng)勢(shì)亦較弱，因此，⑥、⑦號(hào)培養(yǎng)基為生根的最適培養(yǎng)基。

4.2 瓶外生根

為簡(jiǎn)化組培程序，降低生產(chǎn)成本，對(duì)于生長(zhǎng)健壯的組培苗，可采用瓶外生根。剪取莖桿粗壯、葉色深綠、4cm以上的的組培苗單株，基部在 100、300、500、800、1000mg/L的NAA、ABT溶液中速蘸后，插入用0.2%的高錳酸鉀消過(guò)毒的蛭石中，覆膜保濕，溫度保持22～28℃，濕度在85%以上，待根系長(zhǎng)出后，逐漸揭去薄膜，移栽時(shí)調(diào)查生根情況。各處理無(wú)根苗生根率在56.4%～91.2%之間，表明一定濃度的生長(zhǎng)素有利于無(wú)根苗生根，其中500mg/L的NAA及800mg/L的ABT處理的無(wú)根苗，生根情況較好，其生根率分別為91.1%、89.9%，平均生根數(shù)為3.8、4.1條。

5 煉苗移栽

瓶?jī)?nèi)生根的試管苗打開(kāi)瓶口煉苗5～7d后，用鑷子小心將已生根的組培苗取出，洗去附著在根部的培養(yǎng)基后栽入消過(guò)毒的蛭石中，覆膜保濕，溫度保持22～28℃，濕度在85%以上，15d后逐漸揭去薄膜，30d后即可移栽至營(yíng)養(yǎng)缽，移栽成活率達(dá)95%以上。

［1］曹孜義，劉國(guó)民.實(shí)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)教程［M］.甘肅：甘肅科學(xué)技術(shù)出版社，1996.

［2］寇鳳仙，李紅，溫秀榮，等.掌葉半夏的組織培養(yǎng)及快速繁殖技術(shù)［J］.林業(yè)實(shí)用技術(shù)，2010，（10）.

［3］郭偉珍，林艷，邢存旺.美洲南蛇藤的組織培養(yǎng)與快速繁殖［J］.植物生理學(xué)通訊，2008，（2）.

S723.137

A

1002-3356（2011）06-0023-01

2011-09-20