吳清民

（中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，農(nóng)業(yè)部人畜共患病重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室，動(dòng)物布病防控研究室，北京海淀 100193）

布魯氏菌?。ê?jiǎn)稱“布病”）是一種重要的人畜共患病，也是國(guó)家法定檢疫－撲殺被感染家畜的三大疫病（口蹄疫、布病和結(jié)核病）之一。該病主要發(fā)生于牛、山羊、綿羊、駱駝、豬、鹿和犬等家畜和野生動(dòng)物。動(dòng)物發(fā)病后明顯的臨床癥狀是公畜睪丸炎和附睪炎，母畜流產(chǎn)、死胎和不孕，可造成畜牧業(yè)重大損失。人群常因接觸患病動(dòng)物及其產(chǎn)品、病畜污染的環(huán)境感染發(fā)病，病人臨床主要表現(xiàn)為長(zhǎng)期發(fā)熱、盜汗、乏力、臥床、關(guān)節(jié)肌肉疼痛等；轉(zhuǎn)為慢性型后，中壯年可能完全喪失勞動(dòng)能力或生育能力，伴發(fā)關(guān)節(jié)炎、腦膜炎、心內(nèi)膜炎等，治療極其困難。我國(guó)每年新發(fā)生重癥病例3萬(wàn)多人，新感染人數(shù)粗略估計(jì)可達(dá)10萬(wàn)人。過(guò)去患病者主要為獸醫(yī)、農(nóng)民、牧民以及動(dòng)物飼養(yǎng)、裝載運(yùn)輸、屠宰及檢驗(yàn)、畜產(chǎn)品加工等職業(yè)人群，但目前兒童、學(xué)生、職業(yè)白領(lǐng)和老年人等非職業(yè)人群發(fā)病率也逐年上升，提示動(dòng)物性食品可能存在安全隱患。鑒于布魯氏菌病嚴(yán)重威脅人類健康、影響牛、羊、豬等動(dòng)物產(chǎn)品的國(guó)際貿(mào)易，發(fā)達(dá)國(guó)家如澳大利亞、新西蘭、加拿大、美國(guó)和北歐諸國(guó)等先后通過(guò)檢疫、補(bǔ)償性撲殺、局部免疫-檢疫-撲殺措施，歷經(jīng)幾十年努力分別在其全國(guó)范圍內(nèi)對(duì)動(dòng)物布魯氏菌病進(jìn)行了凈化根除。目前我國(guó)布魯氏菌病嚴(yán)重流行造成了公共衛(wèi)生安全隱患和社會(huì)恐慌，困擾著政府機(jī)關(guān)以及衛(wèi)生部、農(nóng)業(yè)部相關(guān)的防疫部門。

一、動(dòng)物布病新型防控技術(shù)需求分析

為了阻止布魯氏菌病在動(dòng)物群內(nèi)不斷擴(kuò)散并保護(hù)國(guó)民健康安全，一直以來(lái)我國(guó)試圖采用發(fā)達(dá)國(guó)家布病防控策略，即檢疫-撲殺-無(wú)害化處理等措施，但因該病為慢性傳染病，潛伏期差異大，病原在體內(nèi)休眠等機(jī)制存在，即使每月檢疫一次，幾年后仍然不能凈化群內(nèi)患病動(dòng)物。同時(shí)，因我國(guó)牛羊存欄基數(shù)大、陽(yáng)性動(dòng)物比例高，根據(jù)發(fā)達(dá)國(guó)家經(jīng)驗(yàn)即使現(xiàn)在國(guó)家下決心撥出專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)（每年約需10 000億元），用于陽(yáng)性動(dòng)物撲殺補(bǔ)償，在短期內(nèi)也無(wú)法凈化動(dòng)物群，只能緩解疫情緊急狀態(tài)，此后由于存在遺留的患病動(dòng)物，不久又會(huì)恢復(fù)原有狀態(tài)。近年來(lái)，我國(guó)采用疫苗接種為主，檢疫、監(jiān)測(cè)、局部補(bǔ)償性撲殺為輔的控制措施，但因?yàn)楝F(xiàn)有布魯氏菌病疫苗存在技術(shù)缺陷，即被接種妊娠動(dòng)物流產(chǎn)，且奶用動(dòng)物、妊娠動(dòng)物和種用動(dòng)物不能接種疫苗，導(dǎo)致免疫動(dòng)物群和非免疫動(dòng)物群混養(yǎng)、臨床感染動(dòng)物和易感動(dòng)物混養(yǎng)等現(xiàn)象普遍存在；接種動(dòng)物和臨床患病動(dòng)物無(wú)法鑒別，法定檢疫凈化措施難以實(shí)施，在動(dòng)物調(diào)運(yùn)、分娩、產(chǎn)奶和配種時(shí)，現(xiàn)有布病疫苗免疫動(dòng)物群無(wú)法監(jiān)管和檢測(cè)，致使群體中存在的患病動(dòng)物對(duì)人畜健康和畜產(chǎn)品的安全隱患不能消除，疾病擴(kuò)散蔓延趨勢(shì)無(wú)法遏制。因此，國(guó)家甚至全球各國(guó)都迫切需要對(duì)現(xiàn)有的動(dòng)物布魯氏菌病防控技術(shù)體系進(jìn)行改進(jìn)和優(yōu)化。

二、動(dòng)物布病新型防控技術(shù)的基本應(yīng)用程序

根據(jù)發(fā)達(dá)國(guó)家動(dòng)物群布病凈化經(jīng)驗(yàn)以及對(duì)全球動(dòng)物布病防控技術(shù)分析認(rèn)為，動(dòng)物布病凈化根除的關(guān)鍵核心技術(shù)產(chǎn)品是安全、高效的布病新型標(biāo)記疫苗及其敏感、特異的配套鑒別診斷試劑。我們認(rèn)為：對(duì)尚未實(shí)施過(guò)布病常規(guī)疫苗接種的動(dòng)物群，通過(guò)該技術(shù)產(chǎn)品實(shí)施動(dòng)物群布病凈化根除的基本程序是：（1）新型標(biāo)記疫苗接種：即每年一次對(duì)易感動(dòng)物實(shí)施新型標(biāo)記疫苗接種，以阻止布病在動(dòng)物群內(nèi)蔓延；（2）現(xiàn)場(chǎng)篩檢和鑒別診斷。即接種后6個(gè)月（布病最長(zhǎng)潛伏期）全群動(dòng)物血清采集，通過(guò)傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)現(xiàn)場(chǎng)篩檢可疑感染動(dòng)物，然后利用配套鑒別診斷技術(shù)測(cè)定可疑血清，以確定患病動(dòng)物；（3）評(píng)估市值并補(bǔ)償撲殺：通過(guò)市值評(píng)估，由國(guó)家和地方財(cái)政以及養(yǎng)殖戶等按比例分?jǐn)偦疾?dòng)物補(bǔ)償份額，一次性撲殺并無(wú)害化處理，以清除帶菌動(dòng)物；（4）凈化效果評(píng)估：即新型標(biāo)記疫苗接種12個(gè)月，在第二次新型標(biāo)記疫苗接種前，全群采集血清再次篩檢、鑒別以評(píng)估防控效果；（5）在一定區(qū)域內(nèi)，動(dòng)物群布病凈化尚未完成前，每年對(duì)所有易感動(dòng)物接種一次新型標(biāo)記疫苗，但只對(duì)具有流產(chǎn)史動(dòng)物群和待調(diào)運(yùn)動(dòng)物群實(shí)施篩檢和鑒別性檢疫。

動(dòng)物布病控制和逐漸凈化根除是人類健康和動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的根本保障。為了保障人類健康和養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，動(dòng)物布病控制已經(jīng)迫在眉睫。研究開發(fā)具有我國(guó)自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的動(dòng)物布魯氏菌病凈化根除核心技術(shù)和戰(zhàn)略產(chǎn)品，對(duì)促進(jìn)我國(guó)動(dòng)物布魯氏菌病防控體系的改建和動(dòng)物布魯氏菌病凈化根除將具有關(guān)鍵作用。

三、動(dòng)物布病新型防控技術(shù)研究進(jìn)展

為了構(gòu)建動(dòng)物布病新型防控技術(shù)體系，解決現(xiàn)有防控技術(shù)缺陷，中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)自2003年啟動(dòng)布魯氏菌致病機(jī)制和新型疫苗研發(fā)工作，2006年組建了動(dòng)物布病防控技術(shù)研究室，專業(yè)地從事該病防控技術(shù)研究。目前獲得的技術(shù)成果主要是以下3方面。

動(dòng)物布病新型標(biāo)記疫苗株2個(gè)。初步試驗(yàn)證實(shí)，該兩種疫苗株具有兩大優(yōu)點(diǎn)：第一，安全性高，能夠注射接種包括妊娠、奶用和種用的牛群和羊群，對(duì)防疫人員安全性較高，經(jīng)小群動(dòng)物試驗(yàn)表明新型標(biāo)記疫苗接種妊娠動(dòng)物無(wú)流產(chǎn)現(xiàn)象、種公畜未見明顯組織異常變化、奶用動(dòng)物排菌期短；第二，具有雙重鑒別診斷標(biāo)記，疫苗接種后不干擾對(duì)動(dòng)物群的法定檢疫和對(duì)動(dòng)物引種、調(diào)運(yùn)的監(jiān)管，接種后24周左右（布病最長(zhǎng)潛伏期）采集動(dòng)物血清，利用廉價(jià)的布魯氏菌病虎紅平板凝集試驗(yàn)抗原進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)篩檢（第一標(biāo)記測(cè)定），將可疑動(dòng)物血清送實(shí)驗(yàn)室，利用鑒別診斷試劑（第二標(biāo)記測(cè)定）確定診斷患病動(dòng)物，通過(guò)兩輪檢測(cè)可一次性地從動(dòng)物群中清除淘汰患病動(dòng)物，使國(guó)家布病控制、凈化，甚至根除的成本大大降低；目前，該項(xiàng)研發(fā)處于掃尾階段，即將進(jìn)入臨床區(qū)域性試驗(yàn)。

新型標(biāo)記疫苗配套鑒別診斷試劑3種。通過(guò)本試劑可從免疫動(dòng)物群中鑒別確定患病動(dòng)物，但為節(jié)省動(dòng)物布病凈化的財(cái)政支出，應(yīng)首先用廉價(jià)的布魯氏菌病虎紅平板凝集試驗(yàn)抗原對(duì)動(dòng)物群進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)篩檢，然后通過(guò)特異性強(qiáng)、敏感性高的鑒別診斷試劑對(duì)可疑動(dòng)物確診，這種做法每年可為國(guó)家財(cái)政節(jié)約檢測(cè)費(fèi)用數(shù)十億元；經(jīng)對(duì)300余份臨床患病動(dòng)物和常規(guī)疫苗免疫動(dòng)物血清檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，三種鑒別診斷試劑的特異性和敏感性均為95%以上，且患病動(dòng)物抗體持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，有利于臨床上檢測(cè)發(fā)現(xiàn)患病動(dòng)物；目前鑒別診斷試劑研發(fā)處于標(biāo)化階段，將于布魯氏菌病新型標(biāo)記疫苗同步走向市場(chǎng)。

目前該項(xiàng)研究已獲國(guó)家發(fā)明專利7項(xiàng)，正在申報(bào)國(guó)際專利4項(xiàng)，正在聯(lián)系相關(guān)企業(yè)進(jìn)行成果轉(zhuǎn)化。

我國(guó)動(dòng)物布病防控工作未來(lái)展望

鑒于我國(guó)甚至全球發(fā)展中國(guó)家動(dòng)物布魯氏菌病防控面臨的技術(shù)瓶頸和需求，我國(guó)相關(guān)研究院所正在研發(fā)的具有國(guó)內(nèi)自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的動(dòng)物布病新型防控技術(shù)核心技術(shù)產(chǎn)品-新型標(biāo)記疫苗及其配套鑒別診斷試劑，并即將走向臨床應(yīng)用。這些新型產(chǎn)品與國(guó)內(nèi)外現(xiàn)有疫苗S19、M5、S2以及診斷試劑相比，將具有明顯的應(yīng)用性和技術(shù)性優(yōu)勢(shì)，是國(guó)家以最低成本、最快速度凈化甚至根除動(dòng)物布魯氏菌病的關(guān)鍵技術(shù)，同時(shí)也是我國(guó)動(dòng)物布魯氏菌病新型防控體系建設(shè)的戰(zhàn)略性核心技術(shù)產(chǎn)品。我們相信：在新技術(shù)產(chǎn)品推廣應(yīng)用之時(shí)，只要國(guó)家和地方財(cái)政支持，我國(guó)動(dòng)物布魯氏菌病凈化根除指日可待，屆時(shí)布魯氏菌對(duì)人類健康和養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)性發(fā)展相關(guān)的社會(huì)及經(jīng)濟(jì)影響將會(huì)逐漸緩解和消除。