王延樹,李建麗,鄒麗紅,梁武,尤永君,劉浩
(瑞普(保定)生物藥業(yè)有限公司,河北保定 071000)
畜禽母源抗體對保護(hù)后代,繁衍種群,起著極為重要的作用。初生動物,由于其本身的防御機能尚未成熟,主要靠母源抗體來保護(hù)其健康成長。禽類則通過卵黃將lgG傳遞給雛禽。當(dāng)卵還在卵巢時,母禽血清中的免疫球蛋白就已輸送到卵黃中。因此,卵黃中l(wèi)gG的含量和母禽血清中的含量基本相同。但隨著時間的推移,幼雛的抗體在消耗,不同疾病的抗體消減時間不同。H9亞型禽流感(H9)和新城疫(ND)是目前影響我國養(yǎng)雞業(yè)發(fā)展的主要疫病,通過本試驗以了解子代通過母源抗體獲得被動免疫力的情況以及母源抗體的消長情況,掌握母源抗體對滅活疫苗免疫效果的影響,為在實際生產(chǎn)中制定科學(xué)的免疫程序提供可靠依據(jù)。
1.材料。
⑴實驗用雞:1日齡健康海蘭褐蛋雞購自徐水大午公司;羅斯308肉仔雞購自承德三榮公司。
⑵新流二聯(lián)疫苗:優(yōu)瑞康(雞新城疫-H9亞型禽流感二聯(lián)滅活疫苗)由瑞普(保定)生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn),批號100202。
⑶抗原和血清:禽流感H9 HI抗原、禽流感H9 Hl血清和禽流感陰性血清,均購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所。新城疫HI抗原、新城疫Hl血清和新城疫陰性血清均購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。
⑷1% 雞紅細(xì)胞液:采取成年公雞的肝素抗凝血,用生理鹽水反復(fù)洗滌4次,配制成1% 雞紅細(xì)胞液。
2.方法。
⑴母源抗體的測定: 選取20只羅斯 308肉仔雞分別于 1、3、5、7、9、14、17、21、25和 28日齡用 Hl試驗測定其H9亞型禽流感和新城疫母源抗體水平;選取20只海蘭褐蛋雞分別于1、3、5、7、9、14和 21日齡用Hl試驗測定其H9亞型禽流感和新城疫母源抗體水平。
⑵母源抗體對滅活疫苗免疫的效果影響:根據(jù)測定海蘭褐蛋雞H9亞型禽流感和新城疫母源抗體水平及臨床免疫習(xí)慣,選取80只海蘭褐蛋雛雞平均分為A、B兩組,A組于7日齡經(jīng)頸背部皮下注射0.25 ml新城疫-H9亞型禽流感二聯(lián)滅活疫苗,B組于21日齡經(jīng)頸背部皮下注射0.25 ml新城疫-H9亞型禽流感二聯(lián)滅活疫苗,于免疫后每周隨機選取20只測定H9亞型禽流感HI抗體水平。隨機抽取40只肉仔雞于7日齡經(jīng)頸部皮下注射0.25 ml新城疫-H9亞型禽流感二聯(lián)滅活疫苗,于免疫后每周隨機選取20只測定H9亞型禽流感和新城疫HI抗體水平。
1.雛雞不同時期母源抗體的變化情況。分別于1、3、5、7、9、14和21日齡用Hl試驗測定海蘭褐蛋雛雞H9亞型禽流感和新城疫母源抗體水平,結(jié)果見表1和圖1,由表1可知,蛋雛雞新城疫HI抗體在14日齡時處于保護(hù)臨界值(4 Log2)以下,H9亞型禽流感HI抗體水平在21日齡時處于保護(hù)臨界 值(4 Log2)以下。在21日齡時蛋雛雞新城疫HI抗體水平均值為1.5 Log2,部分雛雞母源抗體已消失,若選用此段時間計算半衰期顯然不準(zhǔn)確,應(yīng)選用1~14日齡,新城疫HI抗體半衰期為2.92 d。蛋雛雞1~21日齡H9亞型禽流感的HI抗體半衰期為3.56 d。
表1 海蘭褐商品代ND和H9母源抗體衰減規(guī)律
分 別 于1、3、5、7、9、14、17、21、25和28日齡用Hl試驗測定羅斯308肉仔雞H9亞型禽流感和新城疫母源抗體水平,結(jié)果見表2和圖2,由表2可知,肉仔雞新城疫抗體在14日齡時處于保護(hù)臨界值(4 Log2)以下,H9抗體水平在21日齡時處于保護(hù)臨界值(4 Log2)以下。在21日齡時肉仔雞新城疫HI抗體水平均值為1.05 Log2,部分雛雞母源抗體已消失,若選用此段時間計算半衰期顯然不準(zhǔn)確,應(yīng)選用1~17日齡,新城疫HI抗體半衰期為3.23 d。肉仔雞1~25日齡H9亞型禽流感HI抗體半衰期為3.25 d。
2.不同抗體水平雛雞免疫效果。蛋雛雞不同日齡免疫優(yōu)瑞康后H9亞型禽流感HI抗體變化水平見表3。由表3可知,在雞只母源抗體較低的情況下,免疫疫苗后抗體水平提升較快。
肉仔雞7日齡免疫優(yōu)瑞康后H9亞型禽流感和新城疫抗體水平見表4。肉仔雞于7日齡免疫一次雞新城疫-H9亞型禽流感二聯(lián)滅活疫苗,H9亞型禽流感HI抗體水平可以達(dá)到保護(hù)值以上,但新城疫抗體水平于免疫后一周低于保護(hù)值,并且抗體水平隨著時間的推移提升并不理想,需要加強免疫。
由于母源抗體對免疫效果的影響,近年來國內(nèi)有很多文章報道了母源抗體的消減規(guī)律。本實驗測定了蛋雛雞和羅斯308肉仔雞的母源抗體消減變化規(guī)律,不管是蛋雛雞還是肉仔雞母源抗體水平隨時間推移在遞減,兩個品種的雛雞新城疫HI抗體在14日齡時下降到臨界保護(hù)值(4 Log2)以下,H9亞型禽流感HI抗體在21日齡時下降到到臨界保護(hù)值(4 Log2)以下。無論是蛋雛雞還是肉仔雞,1日齡的H9亞型禽流感抗體水平都要高于新城疫HI抗體水平,這與劉國華發(fā)表文章相同。蛋雛雞新城疫HI抗體在1~14日齡半衰期為2.92 d。蛋雛雞H9亞型禽流感的HI抗體在1~21日齡半衰期為3.56 d。商品代肉仔雞H9亞型禽流感HI抗體1~25日齡半衰期為3.25 d,新城疫HI抗體1~17日齡半衰期為3.23 d。H9亞型禽流感的HI抗體消減速度要稍慢于新城疫的HI抗體消減速度。
表2 白羽肉仔雞ND和H9母源抗體衰減規(guī)律
表3 蛋雛雞免疫后抗體水平
表4 肉仔雞免疫后抗體水平
通過本次免疫試驗證實母源抗體對滅活疫苗抗體的產(chǎn)生存在較大的干擾性,母源抗體較高時免疫效果較差,只有當(dāng)ND母源抗體降到較低水平(小于3 Log2,一般要到15~20日齡后)時,對滅活疫苗免疫影響才非常小,方可產(chǎn)生較為可靠的免疫力。但由于雛雞免疫力發(fā)育不完善,此時免疫需要大約三周時間才能產(chǎn)生保護(hù)力,較晚日齡免疫不適應(yīng)臨床推廣。具體首免時間的確定,還應(yīng)根據(jù)母源抗體的滴度計算。對于肉仔雞7日齡應(yīng)用雞新城疫-H9亞型禽流感滅活疫苗,能夠達(dá)到對H9亞型禽流感產(chǎn)生保護(hù)的HI抗體水平,但對于新城疫還需加強免疫。