張 希, 邢孔武, 喻達輝, 黃桂菊

(1．農業(yè)部海水養(yǎng)殖生態(tài)與質量控制重點開放實驗室, 中國水產科學研究院 南海水產研究所, 廣東 廣州510300; 2. 上海海洋大學 水產與生命學院, 上海 201603)

中藥對合浦珠母貝插核手術傷口愈合效果和珍珠質量的影響

張 希1,2, 邢孔武1, 喻達輝1, 黃桂菊1

(1．農業(yè)部海水養(yǎng)殖生態(tài)與質量控制重點開放實驗室, 中國水產科學研究院 南海水產研究所, 廣東 廣州510300; 2. 上海海洋大學 水產與生命學院, 上海 201603)

研究了3種中藥對合浦珠母貝(Pinctada fucata)插核手術后體重日增長速度、傷口的愈合效果及其對珍珠質量的影響。試驗采用白藜蘆醇、蘆薈膠和云南白藥對插核傷口進行單次處理(插核手術后及時處理)和3次處理(手術后第5天和第10天分別進行第2次和第3次處理), 對體質量日增長速度、愈合率和珍珠質量進行統(tǒng)計分析。結果顯示, 休養(yǎng)期各組體質量日增長速度變化趨勢基本相同, 早期幾乎全為負增長(0.06～-0.26 g/d), 第16天基本恢復正常生長水平, 達到0.54～0.93 g/d, 后期云南白藥單次處理組的增長速度最快(1.52 g/d), 顯著高于對照組(0.34 g/d)(P＜0.05), 但處理次數對體質量增長的影響不大。各試驗組愈合率均較高, 10天時試驗組的愈合率達90%以上(90.7%～99.2%), 顯著高于對照組(79.8%)(P＜0.05), 其中云南白藥處理組的愈合率最高。各處理組的商品珠比例(87%～90%)均較高,但優(yōu)質珠比例各組差異較大, 最高的是白藜蘆醇和云南白藥單次用藥組, 分別為52.4%和54.8%。上述結果表明, 中藥處理對傷口的愈合和珍珠質量具有一定的促進作用, 其中, 白藜蘆醇或云南白藥對傷口單次處理的效果最好。

合浦珠母貝(Pinctada fucata); 中藥處理; 愈合率; 珍珠質量

合浦珠母貝(Pinctada fucata)是中國人工養(yǎng)殖海水珍珠的主要貝類。中國合浦珠母貝養(yǎng)殖珍珠的研究生產始于20世紀中期, 珍珠養(yǎng)殖過程中的插核手術是珍珠養(yǎng)殖的核心技術。插核手術實際是對珍珠貝實施的一種外科手術, 強制性的手術對貝體的創(chuàng)傷在所難免, 施術后會造成母貝的機體免疫能力下降, 且易引起插核傷口的細菌感染, 嚴重影響插核母貝的健康[1-3]。近年來, 有關珍珠養(yǎng)殖技術的研究,大多集中在對養(yǎng)殖過程中養(yǎng)殖方式的改進、遺傳多樣性和育珠母貝的選育上[4-9], 而忽視插核技術中對母貝傷口恢復的相關研究。針對這一問題, 本試驗選擇幾種溫和的中藥對合浦珠母貝插核手術后的傷口進行處理, 以了解不同藥物對傷口愈合的效果, 并探討單次和多次用藥對愈合效果的差異, 以及對育珠效果的影響, 為優(yōu)化插核育珠技術提供技術指導[10-11]。

1 材料與方法

1.1 試驗貝

試驗母貝為毅珠珍珠場在海南陵水縣黎安港養(yǎng)殖的2齡貝, 殼高6.0～7.0cm, 貝的性腺大部分飽滿,少數性腺較飽滿, 貝體健康, 鱗片生長旺盛。

1.2 試驗用中藥

試驗所用白藜蘆醇(粉劑)由長沙一家生物制品有限公司制造, 白藜蘆醇為芪三酚, 3,5,4′-三羥基芪,(E)-5-[2-(4-羥苯基)-乙烯基]-1,3-苯二酚, C14H12O3,含量98%以上, 灰白色粉末。蘆薈膠是以目前世界上最先進的“冷凍穩(wěn)定法”技術從天然草本植物蘆薈中萃取而成, 其純度非常高, 不含任何化學添加劑和雜質。云南白藥(粉劑) 成分為蒲黃、白及等, 為灰黃色至淺棕黃色的粉末, 可顯著促進機體堿性成纖維細胞生長因子(bEGF)和血管內皮生長因子(VEGF)的表達, 從而使血管生長加快, 有利于傷口的愈合。

1.3 試驗方法

分別用白藜蘆醇(A)、蘆薈膠(B)和云南白藥(C)(粉劑)處理插核手術傷口, 處理次數分別為 1次處理(I)和 3 次(II), 共 6 個處理組： AI、AII、BI、BII、CI、CII, AI表示用白藜蘆醇處理1次, AII即處理3次, 其余以此類推。單次用藥組是在插核手術完成后即時對插核母貝的傷口只進行 1次涂抹, 多次用藥組是在之后的第5天、第10天分別再用藥一次。每次每個實驗貝用藥的劑量分別為： 白藜蘆醇 0.03～0.05 g; 蘆薈膠： 0.04～0.06 g; 云南白藥： 0.03～0.06 g,用棉簽沾取藥品涂于傷口處。另設對照組, 不對手術傷口進行任何的藥物處理。每個試驗組900只貝。

2009年5月2日進行清貝作業(yè), 用刀切斷足絲并刮除貝殼表面的附著生物[12], 然后按 60個/框放入術前處理框(40 cm×35 cm×15 cm), 吊到浮筏下5～6 m水層。一星期后進行水層溫差刺激處理, 共處理3次, 每次處理的間隔時間為5 d, 即分別于5月9日、15日、21日將深吊(5～6 m)的試驗貝提起, 切斷足絲后淺吊30 h(浮筏下1m以上的水層), 利用兩水層的溫差刺激貝體, 促進性腺排放。試驗組的貝于2009年5月23日至5月25日進行插核手術, 6組共用插核5400只貝, 對照組共用900只貝, 每貝插核1粒, 插左袋, 珠核直徑為6.66～7.26 mm。施術后將插核貝放入休養(yǎng)籠(50 cm×50 cm×10 cm), 每籠100只貝, 吊養(yǎng)于浮筏下5 m水層, 試驗組的貝于5月28日至5月30日進行第二次藥物處理, 于6月2號至6月4號進行第3次藥物處理。 6月16日結束休養(yǎng)期, 休養(yǎng)期后轉入片狀籠吊養(yǎng)于浮筏下3～4m進行育珠, 育珠期間每個月進行一次清貝工作, 12月31日結束育珠期, 開貝收獲珍珠。

1.4 各指標的測定

休養(yǎng)期間, 每組測定50個插核貝的體質量變化,分別在第6天、第11天、第16天、第21天稱量一次貝體的體質量, 計算體質量的日增長速度。記錄每組50個貝在第6天、第8天、第10天和第12天的傷口愈合率, 愈合率=愈合個數/存活的插核貝數。按珍珠質量統(tǒng)計素珠、污珠棱柱珠、異形珠、商品珠和優(yōu)質珠的粒數, 計算各品質珍珠所占的比例[13-14]。

1.5 數據處理

采用 Excel對愈合率和休養(yǎng)期、育珠期的存活率、留核率、珍珠質量進行樣本頻率的假設檢驗[15],以此來統(tǒng)計各組差異的顯著性, 比較各組優(yōu)質珠比率的差異。采用One-way ANOVA分析體質量的日增長速度[16]。

2 結果

2.1 中藥處理對體質量增長的影響

術后至第21天休養(yǎng)期間, 各組體質量日增長速度變化趨勢基本相同, 但同一藥物不同處理次數對體質量日增長的影響不大(表1)。術后第6天, 除CⅡ組外(0.06 g/d), 其余試驗組的體質量均呈負增長(-0.01～0.26 g/d), 對照組下降最大(-0.49 g/d)。第11天測量, 各組均開始體質量增長, 其中AⅡ[(0.23±0.15)g/d]和 CⅡ[(0.17±0.13)g/d]組的增速最慢, 顯著低于對照組[(0.70±0.37)g/d,P＜0.05],BⅡ[(0.65±0.25)g/d]組增速最快, 顯著高于 CⅡ組[(0.17±0.13)g/d,P＜0.05]。第 16 天后, 各組體質量增速變化不大, 表明已基本恢復到正常生長狀態(tài), 但至第21天, CI組的增速(1.52 g/d)明顯高于其余各組(0.50～0.82 g/d), 顯著高于 BI(0.50 g/d)、BII(0.63 g/d)和對照組(0.34 g/d)(P＜0.05)。

表1 3種中藥處理后合浦珠母貝插核貝體質量日增長速度的比較Tab. 1 Daily growth rates of body weight for Pinctada fucata treated with three Chinese traditional medicines after nucleus insertion

2.2 藥物處理后傷口的愈合率

術后6 d各組愈合率達到50%左右(表2), 其中AⅡ(63.78%)和 BⅡ(66.40%)組的愈合率最高, 顯著高于AⅠ(46.51%)、BⅠ(42.86%)和對照組(36.29%)(P＜0.05), 其余各組間及其與對照組間沒有顯著性差異(P＞0.05); 術后 8天, 除 AI(65.12%)和 BI(71.43%)外, 其余各組的愈合率均在80%以上(80.00%～93.75%), 顯著高于對照組(60.48%)(P＜0.05), 但相互之間不存在顯著差異(P＞0.05); 插核10天后, 90%個體(90.70%～99.22%)的傷口已基本愈合,顯著高于對照組的 79.84%(P＜0.05), 但組間不存在顯著性差異(P＞0.05); 至第 12天, 試驗組和對照組的傷口全部愈合。

表2 休養(yǎng)期間傷口愈合率的比較Tab. 2 Recuperation rates during recovery period

2.3 中藥處理對珍珠質量的影響

各組的素珠、污珠和異形珠的比例均比較低, 絕大部分都在 5%以下, 商品珠率則高達 85%以上(表3), 但優(yōu)質珠比例則差異較大, 其中, AⅠ和CⅠ組最高, 分別為 52.42%和 54.81%, 均顯著高于對照組(41.23%)(P＜0.05)。CⅡ組的優(yōu)珠率(37.38%)最低,AII、BI和BII組均在45%左右, 高于對照組。

表3 藥物處理對珍珠質量的影響Tab. 3 Impact of traditional Chinese medicines on the quality of pearls

3 討論

3.1 藥物處理對術后體質量日增長和愈合效果的影響

在早期各處理組體質量日增長速度呈下降趨勢,至16 d后體質量增長速度基本恢復正常, 但云南白藥單次處理組在后期增長速度比其他組高許多, 且其愈合率也是比較高的, 而且云南白藥多次用藥組的愈合率最高, 表明云南白藥對貝體生理機能有一定影響, 但其作用機制還有待研究?？赡芘c其具有促進組織修復的效用有關[17]?，F代藥理研究表明, 云南白藥具有抗炎、促進傷口修復和抑菌等功能[18]。此外, 3種中藥早期的愈合效果均優(yōu)于對照組, 表明中藥對傷口愈合均能起到一定的效用, 相同藥物單次和多次處理后的體質量差異不顯著, 說明處理次數對傷口的治愈效果影響不大。試驗10 d后傷口愈合率均達到90%以上, 與企鵝貝的情況(6～10 d基本都能愈合)差不多[19]。

3.2 藥物處理對珍珠質量的影響

各試驗組中, 白藜蘆醇和云南白藥單次用藥組的優(yōu)質珠比例最高, 分別為 52.4%和 54.8%, 且與對照組存在顯著差異, 表明這兩種中藥對提高珍珠質量具有促進作用。在以前的研究報道中不同研究者不同處理方法所獲得的優(yōu)質珠比例不同, 如鄧陳茂等只進行術前處理的優(yōu)質珠比例低于 35%[20], 低于本研究的優(yōu)質珠比例。但在勞贊等的研究中, 經過術前處理后優(yōu)質珠比例達到53.1%和51.4%[17], 優(yōu)質珠比例高于本研究結果, 因此橫向比較意義不大, 主要看與對照組差異是否顯著。但從商品珠比例來看,各試驗組差異不大, 且與對照組差異不顯著。因此白藜蘆醇和云南白藥對優(yōu)質珠比例影響的穩(wěn)定性還有待進一步檢驗。

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Impact of traditional Chinese medicines on recuperation of nucleus inserting cut and pearl quality in pearl oysterPinctada fucata

ZHANG Xi1,2, XIN Kong-wu1, YU Da-hui1, HUANG Gui-ju1
(1. Key Laboratory of Mariculture, Ecology and Quality Control, Ministry of Agriculture; South China Sea Fisheries Research Institute, the Chinese Academy of Fishery Sciences, Guangzhou 510300, China; 2. College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University, Shanghai 201603, China)

Oct., 25, 2010

Pinctada fucata; traditional Chinese medicine treatment; recover rate; pearl quality

The effects of three traditional Chinese medicines on daily growth rates of body weight, wound recover rates after nucleus insertion, and pearl quality were investigated. Resveratrol, Aloe gel and Yunnanbaiyao were used to treat the implanted oysters by single or multiple administrations (treated at 5 d and 10 d after implantation). The results showed that daily growth rates of body weight in each group changed in the same manner. Negative daily growth rates in the early stage were observed. Daily growth rates were not normal until 16 days after first treatment,reaching 0.54～0.93g/d. At the end of the recovery period, the group with Yunnanbaiyao single treatment showed the greatest daily growth rate (1.52 g/d), which was significantly higher than that of the control group (0.34 g/d) (P＜0.05). However, there was little difference between single and multiple treatments in daily growth rates. The recover rates were generally high for all treatments and get to over 90% (90.7% ～ 99.2%) after 10 days, which were significantly higher than that of the control group (79.8%) (P＜ 0.05). The highest recover rate was observed in the group treated with Yunnanbaiyao. The proportion of commercial pearls was high in each group (87%～90%), but the proportions of elite pearls showed significant difference among groups, while the groups with single treatment of Resveratrol or Yunnanbaiyao reached the highest, being 52.4% and 54.8%, respectively. This study suggested that the three traditional Chinese medicines are beneficial to wound recuperation and pearl quality, among which Resveratrol and Yunnanbaiyao single treat are better.

S966.23

A

1000-3096(2011)06-0025-05

2010-10-26;

2011-01-29

國家科技支撐計劃項目(2006BAD01A13); 公益性行業(yè)(農業(yè))科研專項(200903028); 廣東省科技計劃項目(2006B20201063); 廣東省海洋漁業(yè)科技推廣項目(A200901A10)

張希(1984-), 女, 河北石家莊人, 碩士, 從事海洋生物技術研究, E-mail： vivicici-0627@163.com; 喻達輝, 通信作者, 博士,博士研究生導師, 研究員, E-mail： pearlydh@163.com

梁德海)