張夢(mèng)蕾，李亞?wèn)|，謝良善，王金亮，賀妮莎，彭宇

（1.湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，湖北 武漢430062；2.湖南武岡縣農(nóng)業(yè)綜合開發(fā)辦，湖南 武岡422400）

“綠滿園”對(duì)紅蜘蛛的生物活性及對(duì)三種蜘蛛的毒性測(cè)定

張夢(mèng)蕾1，李亞?wèn)|1，謝良善1，王金亮2，賀妮莎1，彭宇1

（1.湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，湖北 武漢430062；2.湖南武岡縣農(nóng)業(yè)綜合開發(fā)辦，湖南 武岡422400）

采用玻片粘膠浸漬法測(cè)定“綠滿園”水劑對(duì)柑桔紅蜘蛛Panonychuscitri的生物活性，同時(shí)采用浸漬法測(cè)定“綠滿園”水劑對(duì)三突花蛛、斜紋貓蛛和擬環(huán)紋豹蛛3種蜘蛛的毒力.結(jié)果表明，16% “綠滿園”水劑18.75倍稀釋液對(duì)紅蜘蛛毒性最強(qiáng)，處理72h后紅蜘蛛死亡率可達(dá)99.0%.受藥48h后，“綠滿園”對(duì)紅蜘蛛的毒力回歸方程為y＝5.175 6＋1.183 8x，致死中濃度LC50為0.710 6mg／mL.16% “綠滿園”水劑對(duì)三突花蛛和斜紋貓蛛無(wú)毒性，但對(duì)擬環(huán)紋豹蛛有較強(qiáng)的毒性，75倍稀釋液處理過(guò)的擬環(huán)玟豹蛛24h后死亡率可達(dá)70%.

“綠滿園”；柑桔紅蜘蛛；毒性測(cè)定；蜘蛛

紅蜘蛛屬蛛形綱、蜱螨目、葉螨科，是園林中常見刺吸植物汁液的有害螨類［1］.紅蜘蛛取食后，致使植物的葉綠素被破壞，光合作用減弱，葉片受害加劇，很快造成黃葉、落葉現(xiàn)象.紅蜘蛛的為害嚴(yán)重影響了我國(guó)農(nóng)業(yè)和花卉產(chǎn)業(yè)的發(fā)展.當(dāng)前，主要采用化學(xué)殺螨劑防治紅蜘蛛.使用的殺螨劑品種包括24%螨危、40%三氯殺螨醇乳油、20%螨死凈（四螨嗪）可濕性粉劑、15%噠螨靈乳油和1.8%齊螨素（阿維菌素）乳油等［2－5］.

“綠滿園”是我們自主研發(fā)的新型殺螨劑.田間藥效試驗(yàn)表明，16%的“綠滿園”水劑400倍對(duì)柑桔紅蜘蛛Panonychuscitri7d后的防治效果為84.4%，對(duì)臍橙不產(chǎn)生藥害.我們?cè)趯?shí)驗(yàn)室條件下，測(cè)定了“綠滿園”對(duì)紅蜘蛛的急性毒性，同時(shí)，以三突花蛛Ebrechtellatricuspidata，斜紋貓蛛Oxyopessertatus和擬環(huán)紋豹蛛Pardosapseudoannulata為對(duì)象，測(cè)定了“綠滿園”對(duì)害蟲捕食性天敵的毒性.該研究對(duì)于“綠滿園”的推廣應(yīng)用及農(nóng)田蜘蛛的保護(hù)具有一定的參考作用.

1 材料與方法

1.1 供試殺蟲劑16%“綠滿園”水劑，由湖南省武岡縣農(nóng)業(yè)綜合開發(fā)辦提供.

1.2 供試動(dòng)物紅蜘蛛從湖北大學(xué)校園內(nèi)的月季、槐樹和油菜上采集獲得.試驗(yàn)當(dāng)日采回帶蟲葉片，挑取個(gè)體大小一致、健康的成螨或若螨用于試驗(yàn).三突花蛛、斜紋貓蛛和擬環(huán)紋豹蛛采用扣管法或者掃網(wǎng)法從湖北大學(xué)校園內(nèi)采集得到.將采回的蜘蛛單頭飼養(yǎng)于玻璃指管（直徑2cm，長(zhǎng)13cm）中，管底部放有一小團(tuán)吸足清水的海綿，供蜘蛛飲水，管口用棉花塞?。?］.

1.3 “綠滿園”對(duì)紅蜘蛛的急性毒性測(cè)定采用聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織推薦的玻片粘膠浸漬法測(cè)定“綠滿園”對(duì)紅蜘蛛的急性毒性［7］.測(cè)定過(guò)程如下：在潔凈的載玻片一面粘上雙面膠，用毛筆將植物葉上的紅蜘蛛粘在雙面膠上，放置2～4h后于解剖鏡下檢查，剔除死紅蜘蛛.在預(yù)備實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，將“綠滿園”稀釋成6～7個(gè)濃度.將粘有紅蜘蛛的載玻片放入不同濃度的藥液中浸5s，取出后用吸水紙吸干殘留藥液.然后，放入鋪有濾紙的培養(yǎng)皿中，在濾紙上加水保濕.將載玻片置于溫度25～27℃，相對(duì)濕度80%～90%的培養(yǎng)箱中，分別于24h、48h和72h后檢查紅蜘蛛的死亡率.以用撥針輕觸蟲體，附肢和嘴都不動(dòng)者為死亡.以清水為對(duì)照處理.

1.4 “綠滿園”對(duì)蜘蛛的毒性測(cè)定采用浸漬法測(cè)定“綠滿園”對(duì)3種供試蜘蛛的毒性［8］.將蜘蛛浸入不同濃度的“綠滿園”中10s后，立即取出，放在吸水紙上吸去多余的藥液，然后移入培養(yǎng)皿中.培養(yǎng)皿中用吸足水的海綿保濕，不需喂食.每個(gè)濃度各處理蜘蛛30頭，對(duì)照用清水.分別于24h、36h和72h后檢查蜘蛛死亡率.

1.5 數(shù)據(jù)分析將紅蜘蛛的死亡率用Abbott公式進(jìn)行校正.將校正后的死亡率轉(zhuǎn)換成機(jī)率值，殺蟲劑濃度換成對(duì)數(shù)值，以濃度對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)，以死亡機(jī)率值為縱坐標(biāo)，求回歸方程、致死中濃度（LC50）、95%的置信限和X2［9］.

2 結(jié)果與分析

2.1 “綠滿園”處理后，紅蜘蛛的死亡癥狀通過(guò)顯微鏡觀察，并結(jié)合照片分析，我們對(duì)紅蜘蛛的死亡癥狀進(jìn)行描述.對(duì)照處理的紅蜘蛛個(gè)體，體色呈黃色，形態(tài)完整（見圖1A）.而用“綠滿園”處理的紅蜘蛛，身體的后半部呈黑色，嘴向外伸出，附肢向外鋪展開來(lái).其中有少數(shù)紅蜘蛛出現(xiàn)身體破裂、體液外流等現(xiàn)象（見圖1B）.

圖1 “綠滿園”處理后紅蜘蛛的中毒癥狀

2.2 “綠滿園”不同處理濃度下紅蜘蛛

的死亡率從表1可以看出，隨著“綠滿園”濃度的增加，紅蜘蛛的死亡率逐漸增加.用“綠滿園”18.75倍稀釋液處理72h后，紅蜘蛛的死亡率可達(dá)99.0%.同時(shí)，在相同“綠滿園”濃度下，紅蜘蛛的死亡率隨時(shí)間的延長(zhǎng)而增大.

2.3 “綠滿園”對(duì)紅蜘蛛的致死中濃度采用機(jī)率值分析方法，求得不同處理時(shí)間“綠滿園”對(duì)紅蜘蛛的毒力回歸方程、致死中濃度LC50、LC5095%的置信限及X2的結(jié)果（見表2）.24h和48h毒力回歸方程的X2值較小，表明藥劑濃度與死亡率之間的回歸關(guān)系顯著性較高，所求的LC50是可信的.由于紅蜘蛛在受藥24h后仍有紅蜘蛛死亡，因此，以48h的死亡率來(lái)計(jì)算LC50.“綠滿園”對(duì)紅蜘蛛的LC50為0.710 6mg／mL.

表1 “綠滿園”不同處理濃度下紅蜘蛛的死亡率 %

2.4 “綠滿園”對(duì)三種供試蜘蛛的毒性“綠滿園”對(duì)三突花蛛和斜紋貓蛛毒性測(cè)定結(jié)果見表3.用“綠滿園”水劑300倍液、150倍液、75倍液處理后，三突花蛛和斜紋貓蛛在24h、48h、72h后的死亡率均為0.表明16%“綠滿園”對(duì)這兩種蜘蛛無(wú)毒性.

16%“綠滿園”水劑對(duì)擬環(huán)紋豹蛛的毒力測(cè)定結(jié)果見表4.“綠滿園”75倍稀釋液處理過(guò)的擬環(huán)玟豹蛛在24h后死亡率可達(dá)70%，150倍稀釋液處理過(guò)的擬環(huán)玟豹蛛在24h后死亡率也可達(dá)40%.表明“綠滿園”對(duì)3種蜘蛛的毒力有很大差別，其中對(duì)擬環(huán)紋豹蛛的殺傷力最大，同時(shí)也說(shuō)明擬環(huán)紋豹蛛對(duì)“綠滿園”的耐受力比三突花蛛與斜紋貓蛛差.

根據(jù)所得數(shù)據(jù)求得“綠滿園”對(duì)擬環(huán)紋豹蛛的毒力回歸方程、X2、LC50及其95%的置信限分別為y＝2.039 8x＋4.780 5、0.143 9、1.281 2、（0.958 2～1.974 5）mg／mL.

表2 不同處理時(shí)間“綠滿園”對(duì)紅蜘蛛的毒力回歸方程及致死中濃度

表3 “綠滿園”不同處理濃度下三突花蛛和斜紋貓蛛的死亡率

表4 “綠滿園”不同處理濃度下擬環(huán)紋豹蛛的死亡率

3 討論

一種好的殺蟲劑應(yīng)該對(duì)害蟲高效而對(duì)害蟲天敵無(wú)毒性.本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，“綠滿園”水劑對(duì)紅蜘蛛毒性很強(qiáng).16%“綠滿園”稀釋18.75倍時(shí)毒性最強(qiáng)，在用藥1d后蟲體死亡率為72.4%，3d后，蟲體死亡率達(dá)到99.0%.由于本實(shí)驗(yàn)設(shè)置的“綠滿園”濃度梯度中，最低稀釋倍數(shù)為18.75倍，而且，由表1可知，隨著稀釋倍數(shù)逐漸降低，藥劑對(duì)紅蜘蛛毒性越明顯，18.75是否為最大毒性稀釋倍數(shù)，還有待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證.本研究沒(méi)有比較“綠滿園”與其他殺螨劑對(duì)紅蜘蛛的毒性差異.同時(shí)，“綠滿園”對(duì)其他有害螨類的毒性如何，均有待進(jìn)行更深入的研究.“綠滿園”對(duì)捕食性害蟲天敵三突花蛛與斜紋貓蛛沒(méi)有毒性.但在較高濃度下，對(duì)擬環(huán)紋豹蛛的毒性較大，“綠滿園”對(duì)擬環(huán)紋豹蛛的毒性效果及原因還有待進(jìn)一步探討.本實(shí)驗(yàn)在測(cè)定“綠滿園”對(duì)害蟲天敵的毒性中只選取了田間較為常見的3種蜘蛛做實(shí)驗(yàn).“綠滿園”對(duì)瓢蟲、家蠶、蜜蜂等有益昆蟲是否安全，將會(huì)在以后的研究中進(jìn)行.

［1］王智琛.溫室紅蜘蛛的發(fā)生及無(wú)公害防治［J］.西北園藝（蔬菜專刊），2009（1）：33.

［2］趙日?qǐng)?jiān)，譚耀華.24%螨危懸浮劑防治柑橘紅蜘蛛示范試驗(yàn)［J］.廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，8：143－144.

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［7］慕立義.植物化學(xué)保護(hù)研究方法［M］.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1997.

［8］彭宇，王萌長(zhǎng)，韓召軍.蜘蛛對(duì)農(nóng)藥敏感性的測(cè)定方法［J］.動(dòng)物學(xué)雜志，2001，36（3）：47－49.

［9］Finney D J.Probit analysis［M］.London：Cambridge Univ Press，1971：1－160.

The controlling role of"Lümanyuan"toPanonychuscitriand measurement of toxicity to three kinds of spiders

ZHANG Menglei1，LI Yadong1，XIE Liangshan1，WANG Jinliang2，HE Nisha1，PENG Yu1
（1.School of Life Science，Hubei University，Wuhan 430062，China；2.Hunan Wugang County Agriculture Comprehensive Office，Wugang 422400，China）

The slides viscose immersion method was taken to determine the toxicity of"Lümanyuan"toPanonychuscitri，in the meanwhile，investigated the influence of"Lvmanyuan"on three kinds of spiders，Ebrechtellatricuspidata，OxyopessertatusandPardosapseudoannulata.The results showed that the toxicity of 16%"Lümanyuan"toP.citriwas the strongest when diluted by 18.75times，and the mortality could reach 99.0%after 72htreated by the pesticide.48hafter treatment，the linear regression equation of"Lümanyuan"toP.citriwasy＝5.175 6＋1.183 8x，LC50＝0.710 6mg／mL."Lümanyuan"was non－toxic toE.tricuspidataandO.sertatus，but it had a strong toxicity toP.pseudoannulata，actually.The mortality ofP.pseudoannulatacan reach 70%after 24htreated by the 75times diluted pesticide.

"Lümanyuan"；Panonychuscitri；measurement of toxicity；spider

S482.3

A

1000－2375（2011）04－0418－03

2011－07－14

國(guó)家自然科學(xué)基金（31071895）和武漢市科技攻關(guān)項(xiàng)目（201120722216－3）資助

張夢(mèng)蕾（1989－），女，本科生；彭宇，通信作者，教授，E－mail：pengyu＠hubu.edu.cn

（責(zé)任編輯 游俊）